血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶、血漿神經(jīng)肽Y及振幅整合腦電圖動(dòng)態(tài)變化早期預(yù)測(cè)窒息新生兒缺血缺氧性腦病的意義

梁大康 李雪萍 陳潔靜

廣東省四會(huì)市人民醫(yī)院，廣東四會(huì) 526200

新生兒缺血缺氧性腦病（HIE）是足月新生兒 窒息后引發(fā)的嚴(yán)重且常見并發(fā)癥，致死致殘率較高，近年來新生兒腦損傷診斷廣泛采用振幅整合腦電圖（aEEG），其能連續(xù)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，具圖像直觀、操作方便等優(yōu)點(diǎn)[1]。但研究發(fā)現(xiàn)新生兒娩出后24 h內(nèi)迅速確切的早期預(yù)測(cè)其腦部疾病的指標(biāo)，能避免其腦損傷進(jìn)一步加重[2]。因此尋求窒息新生兒HIE的早期生化指標(biāo)、檢測(cè)方法等具有顯著的臨床意義。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)新生兒HIE早期相關(guān)生化指標(biāo)水平存在異常，如血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、血漿神經(jīng)肽Y（NPY）等[3]。因此本研究通過aEEG動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)及血清NSE、血漿NPY檢查，早期預(yù)測(cè)窒息新生兒HIE，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018年6月至2020年6月于我院NICU治療足月窒息新生兒116例，為研究組，同期收集新生兒病房中無腦損傷足月新生兒58例，為對(duì)照組，且研究組據(jù)《新生兒窒息分度及診斷標(biāo)準(zhǔn)》[4]均分研究A組（輕度窒息）與研究B組（重度窒息），每組各58例。對(duì)照組中男32例，女26例，胎齡38～41周，平均（39.2±1.6）周，出生體重2668～3986 g，平均（3326.5±146.1）g，分娩方式：剖宮產(chǎn)18例、陰道助娩8例、自然分娩32例；研究A組中男30例，女28例，胎齡38～41周，平均（39.6±1.3）周，出生體重2713～3972g，平均（3342.5±157.3）g，分娩方式：剖宮產(chǎn)16例、陰道助娩9例、自然分娩33例；研究B組中男33例、女25例，胎齡38～41周，平均（39.4±1.5）周，出生體重2655～4000 g，平均（3327.8±151.7） g，分娩方式：剖宮產(chǎn)20例、陰道助娩8例、自然分娩30例。三組新生兒胎齡、性別、出生體重等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：三組新生兒胎齡均為38～41周；研究組均符合新生兒HIE的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；窒息新生兒均接受顱腦核磁共振成像（MRI）檢查；三組新生兒體重范圍2.5～4.0 kg；三組新生兒娩出后日齡≤7 d；家屬均自愿參與，且簽署知情書。排除標(biāo)準(zhǔn)：其他致新生兒Apgar評(píng)分低的疾病；伴有先天性心臟病等嚴(yán)重臟器類疾?。粺o法行aEEG、顱腦MRI圖像分析。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核后通過。

1.2 方法

1.2.1 血清NSE、血漿NPY檢查 均在娩出24 h、3 d及7 d時(shí)間點(diǎn)抽取靜脈血5 ml，分兩管，其中一管離心機(jī)離心后，獲上層清液待檢，另一管置于含抑肽酶、10%EDTA-Na2的試管，待混勻后于4℃下離心機(jī)離心，獲血漿待檢[5]。血清NSE采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀[歐蒙醫(yī)學(xué)診斷（中國）有限公司，型號(hào)：RAAnalyzer15]及其配套試劑盒診斷；血漿NPY采用放射免疫分析法及其配套試劑盒（北京科美東雅生物技術(shù)有限公司）診斷。

1.2.2 aEEG動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè) 在新生兒娩出6 h、3 d及7 d三個(gè)時(shí)間點(diǎn)采用aEEG監(jiān)護(hù)儀（美國尼高力公司，型號(hào)：Nicolet EEG）分別動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)其腦功能，時(shí)間均為3 h。aEEG電極位置使用國際通用10-20標(biāo)準(zhǔn)的8導(dǎo)聯(lián)法，將電極頭放置時(shí)需避開新生兒的前囟、顱縫及血腫等，且相鄰的aEEG電極間距需＞75 mm。監(jiān)測(cè)期間不可將阻抗超過20 kΩ。監(jiān)測(cè)后記錄數(shù)據(jù)，以半對(duì)數(shù)形式，且新生兒腦電活動(dòng)的記錄速度為6 cm/h，顯像為振幅形式的波譜[6]。aEEG動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)結(jié)果以背景活動(dòng)評(píng)價(jià)。

1.3 觀察指標(biāo)

①三組新生兒不同時(shí)間點(diǎn)血清NSE、血漿NPY水平比較；②不同時(shí)間點(diǎn)背景活動(dòng)與窒息程度的相關(guān)性。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：正常：腦電圖上出現(xiàn)連續(xù)性活動(dòng)，且aEEG的上邊界＞10 μV、aEEG的下邊界＞5 μV；輕度異常：腦電圖上出現(xiàn)不連續(xù)性活動(dòng)，且aEEG的下邊界呈可變性，且＜5 μV，但其上邊界＞10 μV；重度異常：腦電圖上出現(xiàn)連續(xù)性極低振幅活動(dòng)，aEEG上下邊界＜5 μV或上下浮動(dòng)[7-8]。③窒息新生兒HIE的早期預(yù)測(cè)價(jià)值。計(jì)算公式為：敏感度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100%；特異度=真陰性/（真陰性+假陽性）×100%；陽性預(yù)測(cè)值=真陽性/（真陽性＋假陽性）×100%；陰性預(yù)測(cè)值=真陰性/（假陰性＋真陰性）×100%；診斷符合率=（真陽性＋真陰性）/（真陽性＋假陽性＋假陰性＋真陰性）×100%。娩出第7天行顱腦MRI診斷，使用1.5TMRI（飛利浦醫(yī)療科技，型號(hào)：Achieva）成像系統(tǒng)掃描檢查。診斷標(biāo)準(zhǔn)參照世界衛(wèi)生組織公布的顱腦MRI診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 22.0處理，計(jì)量資料以（）表示，行Dunnett-t檢驗(yàn)或Friedman（F）檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組新生兒不同時(shí)間點(diǎn)血清NSE水平比較

研究B組娩出24 h、3 d、7 d的血清NSE水平、血漿NPY水平均高于對(duì)照組、研究A組（P＜0.05）；研究A組娩出24 h、3 d的血清NSE水平、血漿NPY水平均高于對(duì)照組（P＜0.05）；且娩出第7天對(duì)照組、研究A組血清NSE水平接近參考正常值上限16.3μg/L。見表1。

2.2 不同時(shí)間點(diǎn)aEEG背景活動(dòng)與窒息程度的相關(guān)性

新生兒娩出后6 h、3 d及7 d時(shí)間點(diǎn)aEEG背景活動(dòng)異常比例與其窒息程度存在正性相關(guān)（r=0.733、0.825，P＜0.05），且aEEG背景活動(dòng)異常比例伴隨新生兒窒息程度的增加而逐漸加重；新生兒娩出7 d時(shí)研究A組、研究B組中仍存在15例、31例aEEG背景活動(dòng)異常。見表2。

2.3 窒息新生兒HIE的早期預(yù)測(cè)價(jià)值

研究A組窒息新生兒HIE早期預(yù)測(cè)的敏感度為87.2%、特異度為90.5%、預(yù)測(cè)符合率為91.4%；研究B組窒息新生兒HIE早期預(yù)測(cè)的敏感度為97.4%、特異度為84.2%、預(yù)測(cè)符合率為93.1%。見表3。

3 討論

aEEG動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)以其操作簡單、便于新生兒床旁腦電監(jiān)測(cè)等優(yōu)勢(shì)被高度關(guān)注及使用，因睡眠周期，足月正常新生兒的aEEG波譜表現(xiàn)為寬窄相間，且窄波譜帶與動(dòng)態(tài)睡眠、覺醒相關(guān)，寬波譜帶與安靜睡眠相關(guān)。而與常規(guī)腦電監(jiān)測(cè)相比較，aEEG監(jiān)測(cè)時(shí)使用的電極少，操作方便，對(duì)安靜環(huán)境的要求相對(duì)低，腦電波譜圖形直觀，易于分析，且能長時(shí)間內(nèi)連續(xù)記錄，適合窒息新生兒腦功能的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)[9-10]。而近年來發(fā)現(xiàn)血清NSE及血漿NPY檢查在窒息新生兒HIE的疾病診斷中具有密切相關(guān)性。因此本研究通過振幅整合腦電圖動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)及血清NSE、血漿NPY檢查，早期預(yù)測(cè)窒息新生兒HIE。

表1 三組新生兒不同時(shí)間點(diǎn)血清NSE水平比較（x ± s，μg/L）

表2 不同時(shí)間點(diǎn)aEEG背景活動(dòng)與窒息程度的相關(guān)性[n（%）]

表3 窒息新生兒HIE的早期預(yù)測(cè)價(jià)值

臨床研究發(fā)現(xiàn)新生兒HIE是由多種因素誘導(dǎo)的缺氧、腦血流量減少，從而致腦組織損傷，但研究認(rèn)為其是由多種因素介導(dǎo)、參與的[11-12]。經(jīng)新生兒血清NSE及血漿NPY檢測(cè)，分析不同娩出時(shí)間點(diǎn)新生兒血清NSE及血漿NPY水平，結(jié)果顯示，研究B組娩出24 h、3 d、7 d的血清NSE水平均高于對(duì)照組、研究A組，上述結(jié)果與黃家琴等[13]研究結(jié)果近似，提示伴隨日齡的增加，新生兒的血清NSE水平明顯下降，其中輕度窒息新生兒在娩出7 d時(shí)血清NSE水平趨于正常參考值的上限，但重度窒息新生兒在娩出7 d時(shí)血清NSE仍處于較高水平。血清NSE主要存在于神經(jīng)纖維、神經(jīng)元及神經(jīng)的內(nèi)分泌細(xì)胞，占在腦內(nèi)全部可溶性蛋白中的占比為1.5%，其是大腦神經(jīng)元受損的敏感性、特異性標(biāo)志，研究報(bào)道圍生期新生兒在窒息后期血清NSE水平升高是可診斷嚴(yán)重缺氧缺血性腦損傷的重要的指標(biāo)[14-15]。NSE為糖酵解酶，參與新生兒腦組織糖酵解過程，且血清NSE水平的高低能直觀反映腦神經(jīng)元的損傷嚴(yán)重程度及損傷范圍的大小，而當(dāng)窒息后新生兒腦組織損傷越嚴(yán)重，其NSE合成釋放的越多[16]。因此認(rèn)為圍生期窒息新生兒檢測(cè)其血清NSE水平最佳準(zhǔn)確時(shí)間點(diǎn)為娩出24 h，該時(shí)間點(diǎn)預(yù)測(cè)診斷價(jià)值最大。不同時(shí)間點(diǎn)血清NPY檢查結(jié)果提示重度窒息新生兒的血漿水平在娩出24 h、3 d、7 d的三個(gè)時(shí)間點(diǎn)高于輕度窒息新生兒，且在娩出24 h時(shí)濃度最高。NPY為神經(jīng)調(diào)節(jié)因子，廣泛存在于交感神經(jīng)末梢與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)遞質(zhì)中，是一種能強(qiáng)收縮血管的因子，可調(diào)節(jié)腦內(nèi)抑制-興奮平衡及行為，且能直接對(duì)血管平滑肌產(chǎn)生作用，抑制舒血管因子及增強(qiáng)其他縮血管因子的作用，從而影響腦組織發(fā)育[17]。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，血漿NPY水平與新生兒HIE的腦損傷存在密切相關(guān)性。HIE會(huì)致使以神經(jīng)核損傷為主的腦組織損傷，且當(dāng)機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，反射興奮新生兒的交感-兒茶酚胺系統(tǒng)，從而導(dǎo)致血漿NPY水平釋放量增加[18]。因此窒息新生兒HIE早期預(yù)測(cè)，通過檢查娩出24 h時(shí)間點(diǎn)的血漿NPY水平能有效早期預(yù)測(cè)疾病。

文獻(xiàn)報(bào)道aEEG動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)在新生兒HIE的早期預(yù)測(cè)中具有顯著意義[19]。通過aEEG動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)窒息新生兒，研究發(fā)現(xiàn)新生兒娩出后6 h、3 d及7 d時(shí)間點(diǎn)aEEG背景活動(dòng)異常比例與其窒息程度存在正性相關(guān)，且aEEG背景活動(dòng)異常比例伴隨新生兒窒息程度的增加而逐漸加重，證實(shí)使用aEEG能早期發(fā)現(xiàn)窒息后患兒HIE，且能預(yù)測(cè)不同窒息程度新生兒HIE病情。本研究經(jīng)過監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)新生兒娩出7 d時(shí)研究A組、研究B組中仍存在15例、31例aEEG背景活動(dòng)異常，表明患兒在娩出后7 d的aEEG圖像存在異常，代表其神經(jīng)系統(tǒng)功能性恢復(fù)不好，因此使用aEEG可早期診斷窒息新生兒的腦組織損傷，評(píng)估其腦功能狀態(tài)。因此通過aEEG動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)窒息新生兒的腦電信號(hào)，分析新生兒娩出后6 h的aEEG背景活動(dòng)，可早期預(yù)測(cè)其腦損傷程度，早期預(yù)測(cè)HIE。經(jīng)過診斷研究A組窒息新生兒HIE早期預(yù)測(cè)符合率為91.4%；研究B組預(yù)測(cè)符合率為93.1%，表明血生化指標(biāo)聯(lián)合aEEG動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，能加強(qiáng)對(duì)新生兒HIE的預(yù)測(cè)診斷，避免因aEEG獨(dú)立診斷病情增加誤判率。

綜上所述，aEEG動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)以及血清NSE、血漿NPY檢查早期預(yù)測(cè)窒息新生兒HIE，具有顯著應(yīng)用價(jià)值，預(yù)測(cè)符合率較高，值得推廣。