微生物送檢標本在培養前進行涂片鏡檢的意義分析

蔡恒洋，曲軼，王桂煥

（東港市中心醫院檢驗科，遼寧 丹東 118300）

急性、慢性下呼吸道感染、社區獲得性感染及醫院獲得性感染等疾病均較為常見[1]，隨著臨床抗菌藥物的廣泛使用，疾病抗菌藥物治療的耐藥性明顯增高，為保證患者用藥安全和療效，國家相關部門加強對抗菌藥物的合理管理，微生物檢驗逐漸引起臨床高度重視，其檢驗的藥敏結果可直接作為臨床治療感染性疾病的重要依據[2]，因此，檢驗結果的準確性和有效性直接關系臨床醫生用藥的有效性和合理性[3]。微生物檢驗標本質量受較多因素影響，如微生物送檢標本是否及時、有效檢出，將直接影響藥敏試驗結果的準確性[4]。如何保證微生物送檢標本質量，是標本進行藥敏培養的關鍵環節。目前，有效的篩查送檢前不合格標本是提高病原菌檢出率的重要途徑。涂片鏡檢通過送檢標本制作薄片，進行革蘭氏染色、顯微鏡下觀察微生物形態，可早期診斷、鑒別細菌，判斷標本是否合格，且準確鑒定細菌類型，在微生物送檢標本培養前使用，可提升微生物標本送檢的合格率和準確率，為臨床醫師有效用藥和治療提供重要依據[5]。基于此，本研究選取2019年1月至2019年6月本院采集的417份微生物送檢標本作為研究對象，旨在探究微生物送檢標本在培養前進行涂片鏡檢的臨床意義，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料選取2019年1月至2019年6月本院采集的417份微生物送檢標本作為研究對象。

1.2 儀器快速革蘭氏染色液（珠海貝索生物技術有限公司），法國梅里埃VT2微生物鑒定系統。

1.3 方法涂片染色鏡檢：使用無菌棉簽挑取痰液、分泌物及膿液標本，提取薄片，取5～8 mL新鮮尿液及其他標本置于無菌試管中，3 000 r/min離心30 min取尿沉渣制作涂片，涂片烘干后，進行革蘭氏染色和鏡檢分析。

接種培養：使用一次性定量無菌接種環（1μL）挑取標本，痰液標本分別接種于血平板、巧克力平板、麥康凱平板、科馬嘉平板上，對涂片檢出菌株者加種沙保羅培養基，于35℃5%二氧化碳孵化箱中培養1～2 d[6]，采用BD公司Crystal微生物分析系統鑒定。

1.4 觀察指標合格標本[7]及陽性結果判斷[8]，痰液標本：鱗狀上皮細胞≥10個低倍鏡視野，外觀膿性或血性，白細胞＜25個低倍鏡視野表示合格；尿液標本：＜10個油鏡視野，平均每個視野有＜1個細菌者表示標本合格；分泌物標本：無菌采集，涂片無鱗狀上皮細胞表示標本合格。接種培養結果與涂片鏡檢符合，檢出致病菌與涂片檢出致病菌形態相符。

1.5 統計學方法采用SPSS 20.0統計軟件進行數據分析，計數資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 微生物送檢標本分布結果417例標本中，痰液標本105份，尿液標本102份，分泌物標本167份，其他標本43份，見表1。

表1 微生物送檢標本分布結果Table 1 Distribution results of microbiological specimens submitted for inspection

2.2 標本篩查合格率及不同類型標本陽性率比較不合格標本27份，不合格率6.47%，合格標本390份，合格率為93.53%，不同類型標本陽性率比較差異無統計學意義，見表2。

表2 標本篩查合格率及不同類型標本陽性率比較Table 2 Specimen screening qualification rate and comparison of positive rates of different types of specimens

2.3 合格標本涂片鏡檢與接種培養陽性符合率比較390例合格標本檢出致病菌株陽性101份，占比25.90%，接種培養法檢出致病菌株陽性117份。涂片鏡檢的痰液、尿液、分泌物及其他標本培養的陽性率與接種培養法比較差異無統計學意義，兩種培養方法痰液、尿液、分泌物及其他標本陽性符合率分別為78.79%、87.50%、93.33%、86.67%，見表3。

表3 合格標本涂片鏡檢與接種培養陽性符合率比較Table 3 Comparison of positive coincidence rate of smear microscopy and inoculation culture of qualified specimens

3 討論

對呼吸道感染醫源性感染等疾病患者進行痰液培養及藥敏感度試驗培養具有重要的臨床意義。痰標本培養質量關系細菌培養結果的準確性，而結果的準確性可為臨床提供真實可靠的實驗依據；同時，有助于臨床評估患者病情，制定合理的治療方案，避免經驗性治療或用藥，可顯著減少臨床抗菌藥物濫用，降低抗菌藥物的耐藥性，改善患者疾病治療預后，節約有限的醫藥衛生資源[9]。

痰涂片鏡檢可保證標本質量，提高標本培養結果準確性。在微生物送檢前對標本進行合格篩查，排除不合格標本，是細菌培養的重要依據。目前，國內大部分醫院均未進行培養前涂片鏡檢篩查，而直接進行藥敏或標本細菌培養，易影響結果的準確性，臨床濫用抗生素，甚至錯誤的藥敏試驗結果將導致細菌耐藥，疾病誤診或延誤治療病情的最佳時機。因此，在微生物送檢前采用統一標準化試驗，可避免假陰性，提升標本檢查結果的精準度[10]。

本研究結果顯示，對417例微生物標本進行涂片鏡檢，不合格標本27份，合格標本390分，合格率93.53%，其中痰液標本合格占比29.49%，尿液標本31.28%，分泌物標本30.77%，其他標本8.46%。根據涂片鏡檢結果，對合格標本進行鏡檢，發現均符合白細胞鱗狀上皮細胞≥10個低倍鏡視野，白細胞＜25個低倍鏡視野，性狀分析發現外觀膿性或血性，未見唾液或口腔細菌黏液，培養結果均為正常菌群；在微生物標本涂片鏡檢時，能及時排除不合格標本，降低采集標本的錯誤率，提高檢驗結果的準確性和即時性，減少培養工作的誤差，降低疾病漏誤診率[11]；同時，避免標本不合格可為臨床診治提供重要、準確的依據。對送檢的微生物標本進行革蘭氏染色分析，于顯微鏡下能直接觀察微生物是否感染。在顯微鏡下初步篩查，鑒別細菌類型，選擇藥敏性紙片；早診斷、早篩查，判定合格的標本，并提示患者是否還需輔助其他項目檢查，有利于細菌鑒定[12]。

對390例合格標本進行分析，進一步篩查陽性致病菌117份，涂片鏡檢陽性101份，不同類型微生物標本的陽性率比較差異均無統計學意義，涂片鏡檢與接種培養痰液、尿液、分泌物及其他標本符合率分別為78.79%、87.50%、93.33%、86.67%，均較高。對部分存在符合率誤差的原因進行分析，可能因涂片制作薄片的材料不當，無法真實反映標本的真實性，或涂片太薄，也對標本真實性會產生一定影響。涂片進行革蘭氏染色分析，染色后背景為紅色，而陰性桿菌也為紅色，因此，會增加漏檢或誤檢率[13]。此外，部分細菌為不動桿菌，鏡檢下形態與革蘭陰性相似，易發生混淆；此外，不排除標本接種造成的污染。為進一步提升和保證微生物標本檢驗的準確性，需采集更大的樣本量，盡可能降低誤差率。

綜上所述，涂片鏡檢用于微生物送檢標本前篩查，操作便捷，可提升微生物送檢標本的合格率，提高標本檢出的符合率和陽性率，具有重要的推廣價值。