非綜合征型唇腭裂易感基因的研究進展＊

文/梁軍榮，葉宇

根據是否存在其他先天畸形，將唇腭裂分為：非綜合征型唇腭裂和綜合征型唇腭裂。以某綜合征的表型之一出現的稱為綜合征型唇腭裂,多為單個基因突變引起，符合孟德爾遺傳模式；而非綜合征型唇腭裂（NSCL/P）臨床中所指其唇裂、唇裂合并腭裂發生時不伴隨他類系統的畸形，同時也不屬于任何綜合征，其中大多數病理特征不符合孟德爾遺傳模式。研究表明NSCL/P的發病與遺傳和環境因素共具有很大的相關性，唇腭部發育受到多種因子的影響，參與的調控的因子，在任何過程中其作用都會受到干擾，都是可能導致唇腭裂的發生。目前已發現有四類導致NSCL/P的易感基因。第一類：為葉酸代謝相關基因,包括：FR-1（葉酸受體）、MTHFR、Folbp1（folic acid-binding protein one gene）、CBS及經SHH基因介導的甲硫氨酸合成酶還原酶（MSR gene）；第二類：為細胞代謝調控及信號傳導的相關基因,包括：EPHX1、SHH、BCL3、GABRB3、IRF6 等；第三類：為生長因子及甾類/視黃酸超家族相關的調控基因,包括：TGFA、TGFB3、TGFB2、RARA、EGF 等；第四類：為綜合征型唇腭裂的相關致病基因。此類基因數量眾多,當下已知的約250種，在總唇腭裂中約占 9%-25%，數量眾多的基因類型也帶來了明顯的影響，此類型大部分均表現出染色體上單個基因突變，從而致病誘發綜合征型唇腭裂,具有明確的特征，易于分辨。如：Van der Woude Syndrome（1q32，IRF6），Treacher Collins （5q32）等[1]。現就與NSCL/P相關的第一類基因進行簡要介紹。

MTHFR基因位于1 號染色體的1p36 區域。Tolarova等[2]首次于1995年展開報道中提出，即阿根廷人群中的MTHFR基因與NSCL/P的發生存在一定關聯。MTHFR為葉酸代謝中所需的關鍵酶，同時也是葉酸在體內的主要活性形式，即可對5,10-亞甲基四氫葉酸形成催化，令其還原為5-亞甲基四氫葉酸。后者屬于體內主要的甲基供體，當MTHFR基因發生突變時,將改變葉酸的生成能力，又能影響DNA的合成，造成包括NSCL/P在內的多種出生缺陷問題發生風險增高,不僅增加了臨床負擔,還給臨床疾病研究帶來了較大的影響[3-4]。

國外學者針對編碼MTHFR基因的兩個功能性突變位點在不同人群中進行了大量研究，但對這些易感基因的分析與研究結果顯示,不同學者得出的結論并不完全一致，很多結論之間存在關聯,又相互影響,甚至有的相互對立。

Passos-Bueno等[5]通過針對MTHFR基因的C677T多態性展開分析，T等位基因頻數的表現，作為NSCL/P患者會比正常人高，但對比，無統計學意義。但Jugessur等[6]研究證實,發生CL/P與CL/P患兒表現出MTHFR基因的C667T或A1298C多態性，兩者之間并無風險影響，但若患者目前存在C677T突變，該后代會存在NSCL/P發生率；患兒CPO的發生風險率增加與MTHFR基因的C677T多態性相關，其母親的基因型不會對CPO發生率形成影響；在單體型傳遞不平衡試驗中，677T/及1298A外，其余存在的單體型不會過多向后代進行傳遞。在針對中國人群的研究中，趙如冰等[7]對29個核心家庭實施PCR-RFLP方法檢測MTHFR熱敏感性基因型，經證實,NSCL/P基因的遺傳易感因素與多態性無明顯關聯。而在萬偉東等[8]的研究中,通過對中國安徽/江蘇兩地區人群展開調查分析,研究發現C677T多態性的傳遞并未出現不平衡，而NSCL/P患者中T等位基因的頻率高于對照組，認為NSCL/P與C677T多態性之間密切相關。這與趙如冰的研究相悖。也有學者展開研究發現，在NSCL/P患者的母親存在MTHFR的突變頻率會明顯增高，認為NSCL/P發生過程中有明顯的變化，葉酸循環起到了作用，分析原因可能：母親的基因型帶來了一定的影響，對NSCL/P的發生起到了促進作用，但其發生機制并不是只與胚胎基因型有關。NSCL/P作為一種多基因疾病，是在多對微效基因協同作用下產生，并且與環境因素的影響關系密切，其易感基因的定位克隆非常困難。但截至目前，臨床對該疾病只停留于分子遺傳學研究中，因此從功能角度不能對其關系進行進一步探究，從而其相互作用與NSCL/P發病相關的機制有待解釋。

另外營養狀態也與NSCL/P的發生也有關系。Hall等[9]指出母體中葉酸的缺乏，會令胎胚的宮內生長受到影響，甚至胎盤出現斷裂與梗死。高劑量的葉酸（如，6mg/d）在原發腭與繼發腭形成的特定時期攝入，可能降低唇腭裂發生的可能性。而圍產期常規量（低于lmg/d）攝入葉酸對發病率并無顯著影響。Pezzetti等分別對患兒母親與對照組母親進行比較，發現患兒母親MTHFR基因的變異率更高，并揭示了母親的基因型比胎兒的基因型作用更大。

總之，NSCL/P 是一種復雜的遺傳性疾病，截至目前，對于該疾病發生機制尚未存在明確答案。神經峭細胞的發育和遷移決定了面部胚胎發育，以及鰓弓、面突的形成等幾個融合且連續的過程，同時在其發展過程中，細胞增殖和遷移、分化、外基質的產生等都會存在相關性，而這一系列復雜的過程同時會被多種因子的調控所影響。近年，隨著分子遺傳學的快速發展，該疾病的基因研究在臨床已獲得初步進展，且目前仍在不斷探索中。但是由于該疾病存在一定的復雜性，以及患者自身遺傳方式不確定，與結果重復性差，不同地區甚至不同表型 NSCL/P 的候選基因座差異性，在遺傳模式研究結果中出現了較多分歧，甚至背離該研究。截至目前，臨床對于唇腭裂發病機制研究的關鍵，將眼光放在基因表達調控所呈現的細胞因子、受體和信號傳導中，對其進行正確分析，才可了解該疾病的發病機理。為進一步對其基因進行認識、了解，臨床仍需進行大量實驗與研究，以便對其發病機制的研究更加完善，實現對疾病的準確判斷、預防等目的。