基于牛源A型多殺性巴氏桿菌溶血表型的蛋白組學分析

王佳楠，汪德會，李 攀，王遠蘭，趙宗鈴，彭遠義

(西南大學 動物科技學院，重慶400700)

多殺性巴氏桿菌(Pasteurellamultocida,Pm)是一種革蘭陰性條件致病菌，根據其莢膜抗原的不同可分為A、B、D、E和F共5種血清型[1]，其中牛源A型多殺性巴氏桿菌作為牛呼吸道正常棲息菌，在應激條件下引起的牛呼吸道疾病綜合征可給養牛業造成巨大的經濟損失[2]。目前多殺性巴氏桿菌的致病機制尚不明確，研究其致病機制可對多殺性巴氏桿菌病的防控提供理論依據。

細菌溶血素是細菌分泌的一類外毒素。目前，已知細菌、對蝦[3]、微藻[4]、植物病原體[5]、螺旋體[6]、支原體[7]等生物皆能分泌溶血毒素。可分為重復子毒素家族(repeats in toxin family，RTX)、膽固醇依賴細胞溶素家族(cholesterol-dependent cytolysin family，CDC)以及其他類。重復子毒素家族蛋白的概念在1991年首次被提出，該家族蛋白的羧基(C)端有一段富含甘氨酸-天冬氨酸的九肽重復序列(G-G-XG-(N/D)-D-x-(L/I/F)-X)，該區域內含Ca2+結合位點；在氨基(N)末端區域具有疏水結構域，該結構域可參與靶膜孔的形成；該家族蛋白通過Ⅰ型分泌系統轉運至胞外后結合Ca2+而激活，并與宿主細胞膜相互作用[8]。膽固醇依賴型細胞溶素(cholesterol dependent cytolysins，CDCs)是一種成孔毒素(pore-forming toxins，PFTs)，后發現革蘭陰性菌也能分泌此類毒素[9]。大多數CDC家族成員之間具有較高的相似性，其基本特征是該毒素結構域4(domain 4)的L1環(Loop 1)含有一段保守的膽固醇識別基序(cholesterol recognition motif，CRM)ECTGLAWEWWR，可與靶膜上的膽固醇受體發生結合，從而產生一系列的生物學效應[10]。其他類中像磷脂酶具有磷酸二酯酶(如PLC和PLD)和酰基水解酶(如PLA1，PLA2，PLB)的活性[11]。目前，與溶血功能相關且研究得較多的有磷脂酶A1，A2和C。……