濕疹病情與患者血清Th1/Th2細胞因子的關(guān)系研究

王修勇 常 遠 高 明 張 帆

鄭州大學(xué)附屬洛陽中心醫(yī)院，河南省洛陽市 471000

濕疹是皮膚科常見的皮膚疾病之一，主要表現(xiàn)為強烈的皮膚瘙癢，其在老年人群中有較高的發(fā)病率。患者往往由于皮膚瘙癢反復(fù)搔抓而引起皮膚組織損傷，增加了細菌感染和各種并發(fā)癥的發(fā)生風險。濕疹的病因復(fù)雜，目前還存在較大分歧。研究表明，輔助型T細胞1(Th1)/Th2失衡是導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)濕疹類炎癥反應(yīng)的重要機制[1]，但目前有關(guān)Th1/Th2細胞因子分泌障礙與濕疹間的關(guān)系的報道較少。本文對86例濕疹患者進行Th1/Th2細胞因子水平進行檢測，分析不同病情狀態(tài)下Th1/Th2細胞因子水平的差異，以探討濕疹病情與Th1/Th2細胞因子的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1 一般資料 收集2016年12月—2018年12月在我院皮膚科門診就診的濕疹患者86例，納入病例組，其中男44例，女42例；年齡34～82(42.7±5.8)歲，病程3～60(45.1±16.2)個月；急性期45例，慢性期41例；泛發(fā)性濕疹35例，局限性濕疹51例。選擇標準：(1)符合《皮膚性病學(xué)》中的診斷標準[2]；(2)入組前4周內(nèi)未曾用抗生素、糖皮質(zhì)激素治療者；(3)簽署知情同意書者。排除標準：(1)合并感染患者；(2)合并風濕、類風濕性疾病的患者；(3)入組前4周內(nèi)曾用抗生素、糖皮質(zhì)激素治療者。另外收集同期在我院門診進行體格檢查的志愿者50例作為對照組，其中男24例，女26例；年齡32～84(43.2±6.0)歲。兩組性別、年齡對比差異無顯著性(P>0.05)，符合科研的隨機對照性原則。本研究經(jīng)倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集：采集待測者晨起空腹肘部靜脈血5ml，裝入含肝素的抗凝管中，用即用型淋巴細胞分離液分離淋巴細胞，將獲得的淋巴細胞清洗后，加入含胎牛血清的RPMI-1640液，使細胞密度調(diào)整為1×109/L，再加0.05g/L的刀豆球蛋白A誘導(dǎo)，置于75%CO2、37℃、飽和濕度的培養(yǎng)箱中孵育48h，取出細胞在離心機上以3 200r/min離心5min,分離上層清液置于-70℃低溫冰箱中保存待用。

1.2.2 Th1/Th2細胞因子的檢測：采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、腫瘤壞死因子-ɑ(TNF-α)及γ干擾素(IFN-γ)表達水平，IL-2、IL-4、IL-5、IL-6試劑盒均由上海博谷生物科技有限公司提供，TNF-α、IFN-γ試劑盒由上海康朗生物科技有限公司提供，操作均嚴格按試劑盒說明書進行。

1.3 觀察指標 觀察比較兩組IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比 與對照組相比，病例組血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量均明顯升高(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比

2.2 急性期與慢性期患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比 與慢性期患者相比，急性期患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ含量均明顯升高(P<0.05)，急性期患者的IL-6、TNF-α含量與慢性期患者相近(P>0.05)，見表2。

表2 急性期與慢性期患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比

2.3 泛發(fā)性與局限性濕疹患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比 泛發(fā)性患者的血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量與局限性濕疹相近(P>0.05)，見表3。

表3 泛發(fā)性與局限性濕疹患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比

3 討論

濕疹是臨床常見的一種接觸性皮膚過敏疾病，其發(fā)病可能是致敏性因素引起機體Th1/Th2功能失衡，導(dǎo)致相應(yīng)的細胞因子分泌障礙所致。Th1細胞主要分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ并形成細胞免疫系統(tǒng)；Th2細胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6而形成體液免疫系統(tǒng)[3]。本文中，病例組血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量較正常人群明顯升高(P<0.05)，提示濕疹患者存在Th1/Th2細胞亞群活性升高及相關(guān)細胞因子過量分泌情況，這些細胞因子在皮膚炎癥反應(yīng)和損傷修復(fù)中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。TNF-α、IFN-γ可上調(diào)表皮中的郎格罕細胞及角朊細胞的HLA-DR和黏附因子的表達[4]，使細胞免疫反應(yīng)和體液反應(yīng)的強度增加，進而調(diào)控T細胞的分化，使Th1向Th2偏移，導(dǎo)致Th2細胞分泌IL-4、IL-5、IL-6的量增多，而這些細胞因子會促進 Th1細胞成熟，促使Th1細胞分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ[5]。本文中，急性期患者的IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ含量較慢性期患者明顯升高(P<0.05)，提示濕疹急性期患者機體的細胞免疫和體液免疫均處于強烈的應(yīng)激反應(yīng)狀態(tài)，致使Th1、Th2細胞分泌大量細胞因子來應(yīng)對皮膚炎性反應(yīng)，而慢性濕疹患者因病情緩和，從而使免疫應(yīng)激反應(yīng)較輕，致使相應(yīng)的細胞因子分泌量相對較少，這也說明Th1/Th2失衡程度和細胞因子表達會隨著濕疹病情加重而加劇。但本文發(fā)現(xiàn)，急性期患者IL-6、TNF-α含量與慢性期患者比較并無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，提示濕疹引起的免疫反應(yīng)激活的機制較為復(fù)雜，IL-6、TNF-α在誘導(dǎo)Th1細胞成熟過程中被消耗較多，致使其表達水平未因炎癥加劇而明顯升高，而且，本文所收集的很多患者病程較長，使其機體IL-6、TNF-α的表達量在疾病治療后期或病情反復(fù)時由于其他類型相關(guān)細胞因子反調(diào)節(jié)作用而逐漸消耗，進而引起急性期、慢性期患者血清IL-6、TNF-α表達量無明顯差異。本文發(fā)現(xiàn)泛發(fā)性和局限性濕疹患者血清細胞因子水平相近(P>0.05)，提示濕疹引起的免疫反應(yīng)而導(dǎo)致細胞因子大量分泌有普遍性和全身性特點，故在各類皮膚濕疹患者中可通過檢測血清細胞因子水平來評估患者病情及機體免疫應(yīng)答狀態(tài)。

總之，濕疹患者存在Th1/Th2細胞因子水平異常變化，這種變化與病情密切相關(guān)，因此可通過檢測此類細胞因子水平來評估其病情，具有一定的臨床參考價值。