痰涂片與痰培養(yǎng)在下呼吸道感染診斷中的價(jià)值比較

王媛

睢寧縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇徐州 221200

人體呼吸道主要由上呼吸道與下呼吸道兩部分組成，其中上呼吸道包括鼻、咽、喉，下呼吸道則包括支氣管與肺。調(diào)查顯示[1]，下呼吸道感染常見(jiàn)病包括：急性支氣管炎、慢性支氣管炎、肺炎、支氣管擴(kuò)張等，病因在于細(xì)菌、病毒、支原體、衣原體等感染?；颊咧饕Y狀包括：流涕、咳嗽、發(fā)熱等，對(duì)其健康、生活等均造成不良危害。病原學(xué)診斷是鑒別病原菌、針對(duì)性治療疾病的基礎(chǔ)，目前臨床多以痰涂片鏡檢與痰培養(yǎng)檢查兩種措施診斷疾病，痰涂片鏡檢具有操作簡(jiǎn)單、無(wú)創(chuàng)、樣本容易獲取等優(yōu)勢(shì)，但容易受外界因素干擾，如上呼吸道菌群影響，而痰培養(yǎng)則檢查時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，操作較為復(fù)雜，如何選擇兩種診斷方法值得臨床深入研究[2]。該文以該院2020年6—8月收治的600例下呼吸道感染患者為例，均接受痰涂片與痰培養(yǎng)診斷，對(duì)比二者結(jié)果差異性，探究臨床應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

抽選該院收治確診下呼吸道感染患者600例進(jìn)行研究，包括男395例，女205例；年齡最小為22歲，最大為80歲，平均年齡（40.5±1.4）歲；病程2～8 d，平均病程時(shí)間（4.1±0.3）d，其中98例患者診斷罹患支氣管擴(kuò)張，262例患者診斷罹患肺炎，89例患者診斷罹患支氣管哮喘合并感染，151例患者診斷罹患慢性支氣管炎。535例患者存在咳嗽癥狀表現(xiàn)，301例患者存在輕度發(fā)熱情況，292例患者有流涕表現(xiàn)。該次研究經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①均診斷為下呼吸道感染，符合該疾病相關(guān)癥狀表現(xiàn)及診斷要求[3]；②患者及家屬均同意配合該次研究。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①上呼吸道感染患者；②合并其他疾病患者；③抵觸研究患者。

1.2 方法

在患者入院后首日采集痰液樣本，在采集前需詢問(wèn)其是否具有抗生素服藥史，必須在臨床使用抗生素前獲得樣本，以降低藥物對(duì)細(xì)菌含量的影響，保證檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，如患者在入院前已經(jīng)服用抗生素類藥物，則必須在停藥至少1 d后采集。指導(dǎo)患者自行采樣的操作技巧，并叮囑其選擇下呼吸道深部痰液作為樣本，通過(guò)深呼吸咳嗽的方式排出痰液，并將其咳入專用無(wú)菌樣本盒內(nèi)，且在樣本采集后2 h內(nèi)必須轉(zhuǎn)送至檢驗(yàn)科微生物室內(nèi)，以避免樣本受空氣中細(xì)菌的污染[4]。

微生物室在接收痰液樣本后需標(biāo)注患者姓名、性別、年齡、病歷號(hào)等相關(guān)信息，提取部分樣本直接涂抹于載玻片上，并采取革蘭氏染色法處理樣本，在光學(xué)顯微鏡下觀察痰液樣本內(nèi)細(xì)菌的具體形態(tài)。需檢查涂片樣本是否合格，其一為在低倍鏡視野內(nèi)樣本中包含的上皮細(xì)胞應(yīng)在10個(gè)以下；其二為低倍鏡視野內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量應(yīng)在25個(gè)以上，再根據(jù)觀察到的細(xì)菌形態(tài)特征對(duì)其種類進(jìn)行評(píng)估，并記錄在患者數(shù)據(jù)下。

涂片觀察完成后需再次提取部分樣本，將其分別接種在巧克力培養(yǎng)皿、血平板培養(yǎng)皿、麥康凱平板上，并將培養(yǎng)皿置于35°C恒溫箱內(nèi)進(jìn)行孵育。其中麥康凱平板需在無(wú)二氧化碳的環(huán)境下孵育，溫度設(shè)定為35℃；巧克力、血平板則不僅需將孵育溫度控制在35℃左右，還需在恒溫箱內(nèi)注入濃度為5%的二氧化碳?xì)怏w。所有接種樣本的培養(yǎng)皿均需經(jīng)過(guò)18～24 h培養(yǎng)后讀碟，使用VITEK 2 COMPACT設(shè)備鑒定細(xì)菌的具體種類，要求使用設(shè)備配套器械、鑒定卡等，嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作，并開(kāi)展針對(duì)各類抗生素藥物的藥敏試驗(yàn)，以獲取治療敏感度最高的藥物，有效輔助臨床治療工作[5]。

1.3 觀察指標(biāo)

歸納總結(jié)患者痰涂片與痰培養(yǎng)結(jié)果，分析病原菌分布情況，并對(duì)比痰涂片與痰培養(yǎng)結(jié)果差異性。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

整理數(shù)據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果利用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件完成數(shù)據(jù)系統(tǒng)處理，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)和百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 痰涂片檢測(cè)結(jié)果分析

600例患者通過(guò)痰涂片革蘭染色檢查，其中270例患者發(fā)現(xiàn)致病菌，占比45.00%，330例患者未發(fā)現(xiàn)致病菌，占比55.00%。見(jiàn)表1。

表1 痰涂片檢測(cè)結(jié)果分析Table 1 Analysis of sputum smear test results

2.2 痰培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果分析

600例患者經(jīng)痰培養(yǎng)檢測(cè)總計(jì)分離病原菌276株，占比46.00%。見(jiàn)表2。

表2 痰培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果分析Table 2 Analysis of sputum culture test results

2.3 痰涂片、痰培養(yǎng)結(jié)果對(duì)比

對(duì)比痰涂片與痰培養(yǎng)結(jié)果發(fā)現(xiàn)二者檢出率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表3 痰涂片、痰培養(yǎng)結(jié)果對(duì)比分析Table 3 Comparative analysis of sputum smear and sputum culture results

3 討論

呼吸道感染是呼吸系統(tǒng)疾病中較為常見(jiàn)的類型之一，根據(jù)感染部位不同可分為上呼吸道和下呼吸道兩類感染病癥。其中上呼吸道感染指的是口腔、鼻腔以及靠近咽喉的氣管發(fā)生的感染類病變，此類病變中超過(guò)70%者為病毒性感染，而20%左右群體表現(xiàn)為細(xì)菌感染，剩余極少部分會(huì)出現(xiàn)微生物感染的情況[6]。常見(jiàn)的上呼吸道感染大多為普通流行性感冒，即由流行性病毒感染所引發(fā)的炎癥反應(yīng)，患者大多表現(xiàn)為低燒、間歇性或持續(xù)性噴嚏、大量流涕、咽喉部腫痛等，該病癥具有明顯的季節(jié)性發(fā)作特征。下呼吸道感染則包括支氣管、肺部以肺內(nèi)各分支氣管的炎癥病變，此類病變患者絕大多數(shù)為細(xì)菌性感染，少見(jiàn)病毒或微生物感染病例，在發(fā)病后臨床表現(xiàn)與上呼吸道感染存在明顯差異，患者會(huì)出現(xiàn)持續(xù)性咳嗽、胸悶、呼吸困難等情況，但無(wú)明顯流涕、噴嚏等情況，證明細(xì)菌并未侵犯鼻腔或上呼吸道黏膜，如病情嚴(yán)重時(shí)還會(huì)出現(xiàn)血液快速升高、心率增快、意識(shí)模糊或休克等嚴(yán)重病情，可直接威脅患者的生命安全[7]。目前治療下呼吸道感染時(shí)推薦使用抗生素，可有效抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)和繁殖能力，但由于臨床應(yīng)用抗生素量的不斷增加，導(dǎo)致院內(nèi)耐藥菌株的產(chǎn)生率大幅提升，尤其是上個(gè)世紀(jì)末頭孢菌素類抗生素的無(wú)節(jié)制使用，使得下呼吸道院內(nèi)感染患者中銅綠假單胞菌、腸球菌等感染率快速提升，對(duì)整體治療效果造成了巨大的影響。因此，現(xiàn)代治療下呼吸道感染前要求必須先對(duì)感染源種類進(jìn)行確認(rèn)，并開(kāi)展藥敏試驗(yàn)后選擇藥物敏感性較強(qiáng)的抗生素開(kāi)展后續(xù)治療，以保證整體治療效果，降低耐藥菌株的產(chǎn)生率[8]。

臨床常用的下呼吸道感染菌株檢驗(yàn)方式包括痰液涂片法和痰液培養(yǎng)法兩類，其中痰液涂片法的應(yīng)用時(shí)間相對(duì)較早，且操作更加簡(jiǎn)便，在獲取痰液樣本后直接提取少部分涂抹于載玻片上，要求涂成薄層，并選擇革蘭氏染色法進(jìn)行處理，以此輔助檢驗(yàn)人員分辨菌株為革蘭氏陰性或陽(yáng)性。在涂片完成后還需對(duì)樣本質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估，可直接利用光學(xué)顯微鏡的低倍鏡進(jìn)行觀察，如視野內(nèi)所包含的白細(xì)胞數(shù)量超過(guò)25個(gè)，而上皮細(xì)胞數(shù)量低于10個(gè)，則說(shuō)明該樣本涂片制作合格，反之則為不合格樣本，需重新制作涂片[9]。如反復(fù)3次制作涂片仍顯示不合格，則需通知患者重新采集痰液樣本，并由護(hù)理人員面對(duì)面指導(dǎo)，以提升樣本采集質(zhì)量。該檢驗(yàn)的操作時(shí)間相對(duì)較短，具有較強(qiáng)的特異性，可用于指導(dǎo)早期用藥，但很容易受到咽喉部正常菌群的影響，進(jìn)而導(dǎo)致敏感性相對(duì)較低。

痰液培養(yǎng)法則是通過(guò)培養(yǎng)皿接種菌株的方式直接獲得大量目標(biāo)菌株，根據(jù)不同培養(yǎng)皿可獲得不同種類的菌株，再通過(guò)專用鑒定設(shè)備對(duì)種類開(kāi)展更準(zhǔn)確的測(cè)定，同時(shí)可檢驗(yàn)感染菌株的藥物敏感性。痰液培養(yǎng)法可將菌株測(cè)定細(xì)致到某一個(gè)種類，進(jìn)而為臨床治療提供更加準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，加之應(yīng)用藥敏試驗(yàn)可直接選擇敏感性較高的藥物，最大程度降低了耐藥菌株的出現(xiàn)概率，也可提升患者的臨床治療速度。但痰液培養(yǎng)的時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，通常需要18～24 h，因此檢驗(yàn)結(jié)果在第2天才能確認(rèn)，為此需將痰液涂片和痰液培養(yǎng)進(jìn)行聯(lián)合使用[10]。根據(jù)臨床研究顯示，大多數(shù)患者痰液涂片和痰液培養(yǎng)結(jié)果均表現(xiàn)為高度一致，但也有少部分表現(xiàn)為不一致的情況。造成這一情況的原因相對(duì)復(fù)雜，可能與痰液樣本采集質(zhì)量有關(guān)，如樣本中唾液、黏液等含量過(guò)多，就會(huì)對(duì)細(xì)菌形成包裹，導(dǎo)致革蘭氏染色無(wú)法影響該類細(xì)菌；或者樣本中包含的細(xì)菌數(shù)量相對(duì)較少[11]；或感染細(xì)菌為特殊菌株，例如流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌等在接種和培養(yǎng)的過(guò)程中很容易出現(xiàn)死亡的情況，導(dǎo)致痰液培養(yǎng)結(jié)果為假陰性；或患者感染細(xì)菌種類為厭氧型，在高氧氣濃度或正常空氣條件下難以存活等。

該次痰涂片檢出陽(yáng)性率45.00%與痰培養(yǎng)檢出陽(yáng)性率46.00%相近（P＞0.05），該結(jié)果與孫麗敏[12]研究結(jié)果痰涂片檢出率43.24%與痰培養(yǎng)檢出率相近（P＞0.05）。

綜上所述，痰涂片與痰培養(yǎng)均能有效診斷下呼吸道感染疾病，其中痰涂片操作更為簡(jiǎn)單，可用于臨床初步鑒別病原體，為其提供可靠數(shù)據(jù)參考。