健康孕婦不同妊娠期血清同型半胱氨酸水平分析

劉艷 葉青 歐陽(yáng)凱 陳寶琳 鄭冼華

廣東省婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣州 510030

同型半胱氨酸（Hcy）是人體內(nèi)含硫氨基酸的一個(gè)重要的代謝中間產(chǎn)物，血清中Hcy含量與遺傳、營(yíng)養(yǎng)、雌激素及年齡等因素有關(guān)。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，出生缺陷及妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生不僅和葉酸缺乏直接相關(guān)［1］，而且還和體內(nèi)Hcy的異常代謝有關(guān)［2］。缺乏葉酸和維生素B12導(dǎo)致血中Hcy向蛋氨酸轉(zhuǎn)化受阻，易造成高同型半胱氨酸血癥（HHcy），HHcy與習(xí)慣性流產(chǎn)、妊娠期糖尿病、妊娠高血壓綜合征、胎盤(pán)早剝、胎兒發(fā)育異常等具有一定相關(guān)性［3-6］，對(duì)于婦女孕產(chǎn)期健康及嬰兒出生缺陷干預(yù)具有重要指導(dǎo)意義。然而，關(guān)于妊娠期HHcy的診斷界值目前尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。本文旨在通過(guò)檢測(cè)1 123例健康孕婦和87例健康育齡婦女的Hcy水平，以了解不同妊娠期Hcy的水平及參考區(qū)間，并為妊娠期HHcy的臨床診斷提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年3月至2018年3月在本院產(chǎn)前檢查并足月分娩的健康孕婦1 123例，其中妊娠早期組（妊娠1～12周末）174例、妊娠中期組（妊娠13～27周末）500例、妊娠晚期組（妊娠28周至分娩前）449例。孕婦均符合以下標(biāo)準(zhǔn)：（1）健康育齡婦女，年齡范圍為20～40歲；（2）孕前3個(gè)月和孕早期3個(gè)月均正常服用葉酸；（3）排除原發(fā)性糖尿病、高血壓、冠心病、肝炎；（4）排除妊娠合并癥如妊娠期高血壓、妊娠期糖尿病、胎盤(pán)早剝、前置胎盤(pán)等疾病；（5）規(guī)律產(chǎn)檢，分娩正常足月新生兒；（6）無(wú)吸煙、酗酒嗜好，肝腎功能均無(wú)異常。選取同時(shí)期的健康育齡婦女87例作為健康對(duì)照組。

1.2 儀器與試劑 Hcy試劑盒（循環(huán)酶法）由四川邁克生物科技有限公司提供。檢測(cè)儀器為西門(mén)子ADVIA 2400全自動(dòng)生化儀。

1.3 方法 空腹抽取肘靜脈血2 ml，置于一次性真空采血管中，并在2 h內(nèi)分離血清檢測(cè)。采用循環(huán)酶法，每次檢測(cè)前進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控分析，運(yùn)行低值高值兩水平質(zhì)控，質(zhì)控在控再進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，正態(tài)分布的計(jì)量資料以（±s）表示，采用One-Way ANOVA對(duì)各組試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，如果各組Hcy水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，則進(jìn)行多重比較。若各組方差齊選擇Bonferroni檢驗(yàn)，若各組方差不齊選擇Tamale’s T2檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用直線(xiàn)相關(guān)與回歸分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同組別血清Hcy水平變化比較 通過(guò)方差分析顯示，不同孕期組的Hcy水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=104.782，P＜0.001）。多重比較Bonferroni檢驗(yàn)顯示，妊娠早期組與妊娠中期組Hcy水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；妊娠晚期組與妊娠早期組、妊娠中期組Hcy水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；且妊娠早期、中期、晚期與健康對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 影響健康孕婦血清Hcy水平的單因素分析 線(xiàn)性相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，妊娠期婦女的年齡、孕周與其血清Hcy水平在P=0.01水平（雙側(cè)）上顯著相關(guān)（r=0.090、0.046）。分別進(jìn)行各組Hcy水平線(xiàn)性相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，妊娠早期組、妊娠中期組血清Hcy與妊娠期婦女的年齡、孕周無(wú)相關(guān)關(guān)系。只有妊娠晚期組血清Hcy與妊娠期婦女的年齡、孕周在P=0.05水平（雙側(cè)）上顯著相關(guān)。

3 討 論

目前認(rèn)為，正常Hcy參考值隨種族、地域、檢測(cè)方法的不同而有所差別，正常血漿Hcy水平為5～15μmol/L，血清Hcy水平稍高，正常妊娠婦女血清Hcy水平低于孕前。我國(guó)在Hcy水平用于出生缺陷干預(yù)及孕期健康評(píng)估指標(biāo)的規(guī)范應(yīng)用這一領(lǐng)域尚處于空白，因此檢測(cè)孕期Hcy水平確定孕期Hcy平均水平和不同孕期Hcy的參考區(qū)間，可以對(duì)HHcy進(jìn)行早期干預(yù)、早期治療，提高孕婦健康水平，降低新生兒出生缺陷率。

有關(guān)研究指出，正常妊娠期婦女血清Hcy水平從孕早期開(kāi)始下降，孕中晚期降至孕前的50%～60%，然后維持在相對(duì)較穩(wěn)定的水平直至分娩［7］。本研究通過(guò)檢測(cè)1 123例孕產(chǎn)期婦女的Hcy水平，并根據(jù)其檢測(cè)Hcy水平時(shí)所處孕周不同分為妊娠早期組、妊娠中期組、妊娠晚期組3組，確定各組Hcy的基線(xiàn)水平。從數(shù)據(jù)上可以發(fā)現(xiàn)，健康育齡婦女Hcy水平為（8.52±3.92）μmol/L，早孕期為（6.31±2.84）μmol/L，中孕期為（6.01±2.96）μmol/L，晚孕期Hcy水平為（7.76±3.65）μmol/L，與上述研究有一定相關(guān)性。另外，有國(guó)內(nèi)外研究表明，Hcy水平高于正常值的P75以上，孕婦發(fā)生妊娠期并發(fā)癥及胎兒畸形等危險(xiǎn)性增加。本研究數(shù)據(jù)顯示，孕早期婦女血清Hcy的P75水平為7.13μmol/L，孕中期婦女血清Hcy的P75水平為6.90μmol/L，孕晚期婦女血清Hcy的P75水平為9.00μmol/L，與駱?gòu)日涞龋?］提出的早孕Hcy水平＞7.53μmol/L（P75）、中孕＞7.21μmol/L（P75）、晚孕＞8.32μmol/L（P75）較接近。其差異可能與不同孕期妊娠婦女例數(shù)不同，以及檢查的各孕期妊娠婦女年齡差異相關(guān)；還可能與妊娠婦女所處地域及飲食習(xí)慣和是否服用葉酸、維生素B12等因素相關(guān)。

本研究發(fā)現(xiàn)早中孕期婦女較正常育齡婦女Hcy水平略有下降，而后期又慢慢升高直至分娩。發(fā)生以上變化的原因可能是妊娠期婦女?dāng)z取多于生理需要量的葉酸，有效地抵抗了葉酸Hcy代謝缺陷，增加了紅細(xì)胞葉酸水平，從而正常妊娠期女性血清Hcy水平降低。也有研究指出這一變化可能與雌激素水平升高有關(guān)，妊娠早期Hcy水平即會(huì)出現(xiàn)生理性下降。妊娠中期，機(jī)體血容量增加致血液被稀釋?zhuān)瑫r(shí)胎兒對(duì)必需氨基酸的需求增加致Hcy過(guò)度甲基化，隨著孕婦雌激素水平進(jìn)一步升高Hcy水平反而降低［7］。正常妊娠晚期Hcy水平又逐漸升高，可能是由于孕婦和胎兒代謝產(chǎn)物增多，腎臟負(fù)擔(dān)加重，腎血漿流量及腎小球?yàn)V過(guò)率迅速提高，導(dǎo)致葉酸及水溶性維生素B丟失增加，從而體內(nèi)Hcy水平升高。當(dāng)Hcy水平超過(guò)一定濃度時(shí)，就會(huì)直接或間接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞［8］，而妊娠期女性對(duì)Hcy損傷敏感度提高，所以Hcy水平輕度升高即可導(dǎo)致一系列血管內(nèi)皮細(xì)胞受損。血清Hcy水平過(guò)高還可對(duì)胚胎有直接毒性，可引起血管內(nèi)皮損傷，促進(jìn)氧化型低密度脂蛋白形成，促進(jìn)血小板聚集及血管平滑肌細(xì)胞增殖［9］，從而誘使動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生［10］，引發(fā)高血壓及其他血管性病變，妊娠女性表現(xiàn)為妊娠高血壓或其他類(lèi)型的不良妊娠結(jié)局。

表1 健康孕婦與健康對(duì)照組的血清同型半胱氨酸水平變化

本文采用循環(huán)酶法，此方法操作簡(jiǎn)便、干擾因素少、重復(fù)性好、線(xiàn)性范圍較寬，并與高效液相法有較好的相關(guān)性，完全符合實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)的需要［11］。本研究樣本量較大，隨訪(fǎng)難度高，不能逐一排除影響因素，所得結(jié)果可能有一定偏差，不能完全反映妊娠婦女的Hcy水平。此外，本研究所選取的妊娠婦女均為在本院進(jìn)行產(chǎn)前檢查并住院足月分娩的，故所研究的妊娠婦女Hcy水平有一定的地域性，只能為本院提供依據(jù)，有一定的局限性。如果想要得到一個(gè)比較符合我國(guó)婦女圍孕期Hcy的正常值標(biāo)準(zhǔn)，還需結(jié)合更多其他地區(qū)的相關(guān)研究才能確定。

許多研究指出補(bǔ)充葉酸和水溶性維生素B可以有效降低血清Hcy水平，從而葉酸和水溶性維生素B成為治療HHcy的潛在藥物。Cotlarciuc等［12］研究證實(shí)了葉酸能顯著降低血清Hcy水平，同時(shí)指出葉酸對(duì)HHcy的治療效果與遺傳因素存在密切聯(lián)系，而與飲食習(xí)慣和年齡關(guān)系不大。研究指出單獨(dú)服用維生素B6、B12降低Hcy水平的效果不明顯，只有與葉酸同時(shí)服用才可顯著性降低Hcy水平，且治療效果要比單獨(dú)進(jìn)行葉酸治療效果更明顯。因此，妊娠婦女注意監(jiān)測(cè)Hcy水平，聯(lián)合補(bǔ)充葉酸和水溶性維生素B，糾正葉酸缺乏，降低血清Hcy水平，有利于產(chǎn)婦孕期保健及胎兒生長(zhǎng)發(fā)育，降低出生缺陷，具有重要的意義。

利益沖突：作者已申明文章無(wú)相關(guān)利益沖突。