吳福斌,李國棟
(1.東港市疾病預防控制中心檢驗科,遼寧丹東 118300;2.東港市中心醫院傳染科,遼寧丹東 118300)
乙型肝炎是由乙肝病毒(HBV)感染引起的疾病,該病傳染性強,隨著病情的發展可出現肝硬化、肝癌等。臨床上對乙肝感染的判斷主要是通過乙肝病毒血清標志物的檢驗,而在檢驗方法上,化學發光免疫法(CLIA)和酶聯免疫吸附法(ELISA)是主要的檢測方法,其中ELISA具有操作簡單、技術成熟的優點,但是其重復性不佳,且靈敏度不高,易出現假陽性、漏檢等情況[1-2]。CLIA是近年來的新型檢驗技術手段,是半定量的檢測方法,能提高乙肝的早期檢出率,且重復性好,靈敏度與特異度高[3]。本研究基于此對比分析CLIA與ELISA在乙肝病毒血清學檢驗中的應用價值,現報道如下。
1.1 一般資料 選取2018年1月至2020年12月東港市中心醫院收診的133例疑似乙型肝炎患者。入選患者中男性79例,女性54例;年齡23~77歲,平均(45.9±11.3)歲。納入標準:伴有惡心嘔吐、肝區疼痛、既往有與乙肝患者接觸史者。排除標準:既往有肝臟器質性病變疾病者;合并其他傳染性疾病者;伴有精神疾病者。患者或家屬對本研究知情同意,且經東港市中心醫院醫學倫理委員會批準此項研究。
1.2 方法 采集患者外周空腹靜脈血10 mL,將其分別置于兩個試管中,每個試管5 mL,分別用CLIA檢測和ELISA檢測乙肝病毒血清學檢測。血液標本在4 ℃環境下離心處理,轉速為3 000 r/min,離心10 min后,取上層清液待檢。其中CLIA檢測采用全自動化學發光免疫分析儀檢測表面抗原(HBsAg)、表面抗體(HBsAb)、e抗原(HBeAg)、e抗體(HBeAb)、核心抗原(HBcAb)等五項乙肝病毒血清學標志物;ELISA檢測采用洗板機和酶標儀進行檢測。熒光定量PCR檢測采用Roche LC480實時熒光分析儀和配套試劑檢測,以上3種檢測方法均按照說明書操作。
1.3 觀察指標 ①比較兩種檢測方法對乙肝五項病毒血清學標志物檢測的陽性率。②以PCR檢測結果為金標準,比較兩種檢測方法診斷乙肝的準確度、靈敏度、特異度,準確度=真陽性例數+真陰性例數/總受檢例數。靈敏度=真陽性例數/(真陽性例數+假陰性例數)×100%;特異度=真陰性例數/(真陰性例數+假陽性例數)×100%。CLIA:HBeAg的臨界值指數≥1.00,則檢測結果判定為陽性,ELISA:HBcAb相對光強度/臨界相對光強度≤1.00,HBsAg、HBsAb相對光強度/臨界相對光強度≥1.00均可判定為陽性。③比較兩種檢測方法對HBsAg的檢測結果。
1.4 統計學分析 使用SPSS 24.0統計軟件進行數據分析,計數資料以[例(%)]表示,組間行χ2檢驗。以P<0.05表示差異有統計學意義。
2.1 陽性率 兩種檢測方法對5項血清學指標的陽性率比較,差異均無統計學意義(均P>0.05);CLIA檢測對HBsAg、HBeAg的陽性率均顯著高于ELISA檢測,差異均有統計學意義(均P<0.05),見表1。

表1 兩種檢測方法陽性率比較[例(%)]
2.2 診斷效能 金標準下,ELISA與CLIA診斷乙肝的準確度、靈敏度及特異度比較,差異均無統計學意義(均P>0.05),見表2、3。

表2 兩種檢測方法的診斷結果(例)

表3 兩種檢測方法的診斷效能(%)
2.3 HBsAg檢測 經CLIA檢測HBsAg為陽性的有127例,其中HBsAg低水平的標本共有88例,ELISA最低水平HBsAg(HBsAg≤0.5 ng/mL)的檢出率為81.82%(72/88),見表4。

表4 兩種檢測方法對HBsAg的檢測結果比較
由于乙型肝炎病毒的傳染性較強,因此早期檢出感染乙肝病毒的人群,并采取有效的措施干預,對于預防乙肝的流行有重要意義[4]。
ELISA是經典的檢測乙型肝炎的方法,但其實施的是定性檢測,無法進行定量分析,檢測結果存在一定誤差[5]。CLIA是近年來在臨床檢驗工作中得到廣泛應用的一種化學發光測定技術,具有高靈敏度、高特異度的特點,能有效識別出各種逃逸的變異株,減少人為因素的干擾,準確率較高[6-7]。本研究中,兩種方法檢測HBsAb、HBeAb、HBcAb的陽性率比較,差異均無統計學意義(均P>0.05),CLIA檢測HBsAg、HBeAg的陽性率均高于ELISA,提示在乙肝病毒血清學檢測中,CLIA檢測對HBsAg、HBeAg的靈敏度更高。
CLIA檢測中采用的顆粒表面積大,體積小,因而檢測中有更大的反應面積,且標志物的循環利用,能延長發光時間,增加強度,準確的反應出HBV感染的進程,提高檢測結果的準確度和靈敏度[8]。本研究中,CLIA與ELISA對乙肝診斷的準確度、靈敏度、特異度比較,差異均無統計學意義(均P>0.05),ELISA最低水平HBsAg(HBsAg≤0.5 ng/mL)的檢出率低于CLIA,提示兩種檢測方法在乙肝的診斷中均有較高的應用價值,對于低水平的HBsAg檢測,CLIA的靈敏度更高,其能進行半定量檢測,更加迅速地檢出HBsAg,避免低水平HBsAg標本的假陰性結果。
綜上,CLIA和ELISA在乙肝診斷中均有較高價值,但CLIA能進行半定量分析,在HBsAg、HBeAg的檢測中靈敏度更高,值得推廣。