慢性乙肝和肝硬化患者HBV DNA與HBsAg相關性分析

王 軍，黃文達，薛思為

（惠陽三和醫院檢驗科，廣東惠州 516211）

慢性乙肝是發病率較高的慢性傳染病，該病癥因感染乙肝病毒（HBV）所致。相關調查顯示，全球人口中約35%感染過HBV，其中15%～30%HBV攜帶者會發展為肝硬化[1]。HBV DNA是診斷HBV感染最直接的指標，其特異性、靈敏性較高，HBV攜帶者的傳染性強弱與HBV DNA定量水平密切相關，其在判斷病毒復制程度和抗病毒藥物治療效果中具有重要價值，但該指標對檢測儀器和環境要求較高[2]。乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是HBV感染的重要標志物，在HBV感染患者中，HBsAg亞病毒顆粒數量與成熟病毒顆粒相比明顯更多，即便經藥物抑制病毒復制，HBsAg仍在持續合成與分泌，因此其水平與肝病的發展存在密切關聯[3]。本研究旨在探討慢性乙肝和肝硬化患者HBV DNA與HBsAg的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析惠陽三和醫院2019年1月至2020年10月收治的105例肝病患者的臨床資料，按照不同疾病類型分為3組。將37例慢性乙肝患者納入A組，其中男性23例，女性14例；年齡26～64歲，平均（38.61±8.27）歲；其中乙型肝炎E抗原（HBeAg）陽性25例。將32例代償期肝硬化患者納入B組，其中男性20例，女性12例；年齡24～65歲，平均（38.56±8.18）歲；其中HBeAg陽性22例。將36例失代償期肝硬化患者納入C組，其中男性25例，女性11例；年齡25～63歲，平均（38.68±8.37）歲；其中HBeAg陽性24例。3組患者一般資料相比，差異無統計學意義（P＞0.05），組間具有可比性。研究經院內醫學倫理委員會批準。納入標準：所有患者均符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）》[4]中的相關診斷標準；肝硬化患者符合《臨床肝臟病學》[5]中的相關診斷標準；患者無抗病毒治療史；初診患者。排除標準：其他原因所致的肝炎或肝硬化患者；擬診肝癌患者；患者入組前有提高血細胞、降酶藥物治療史。

1.2 方法 采集3組患者空腹肘靜脈血5 mL，室溫下放置30 min，離心處理（轉速3 000 r/min，半徑9 cm，時間14 min），取上層血清備檢，采用圣湘SLAN96實時定量PCR儀對HBV DNA定量水平進行檢測；采用化學發光法對HBsAg定量水平進行檢測，檢測儀器為羅氏ROCH601化學發光免疫分析儀。

1.3 觀察指標 ①比較3組患者HBV DNA和HBsAg定量水平。②觀察并比較3組HBeAg陽性患者HBV DNA和HBsAg定量水平。③分析3組患者HBV DNA與HBsAg的相關性。④分析HBV DNA、HBsAg與肝硬化程度的相關性。

1.4 統計學分析 采用SPSS 24.0統計軟件處理數據，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，多組間比較采用重復測量方差分析；符合正態分布的數據相關性分析采用Pearson檢驗，不符合正態分布的數據數據相關性分析使用Spearman檢驗。以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組患者HBV DNA、HBsAg水平 A組患者HBV DNA、HBsAg水平均顯著高于B組、C組，且B組顯著高于C組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表1。

表1 3組患者HBV DNA、HBsAg水平比較(±s,IgIU/mL)

表1 3組患者HBV DNA、HBsAg水平比較(±s,IgIU/mL)

注：與A組比，*P＜0.05，與B組比，#P＜0.05。HBV：乙肝病毒；HBsAg：乙型肝炎表面抗原。

組別 例數 HBV DNA HBsAg A組 37 7.59±1.16 3.93±0.69 B組 32 6.61±1.05* 3.54±0.37*C組 36 5.58±0.98*# 2.71±0.33*#F值 32.347 56.991 P值 ＜0.05 ＜0.05

2.2 3組HBeAg陽性患者HBV DNA、HBsAg水平 A組HBeAg陽性患者25例，B組HBeAg陽性患者22例；C組HBeAg陽性患者24例。A組HBeAg陽性患者HBV DNA、HBsAg水平均顯著高于B組、C組，B組HBeAg陽性患者HBsAg定量水平顯著高于C組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）；B組、C組HBeAg陽性患者HBV DNA定量水平經比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05），見表2。

表2 3組HBeAg陽性患者HBV DNA、HBsAg水平比較(±s,IgIU/mL)

表2 3組HBeAg陽性患者HBV DNA、HBsAg水平比較(±s,IgIU/mL)

注：與A組比，＊P＜0.05，與B組比，#P＜0.05。

組別 例數 HBV DNA HBsAg A組 25 7.69±1.10 4.31±0.56 B組 22 6.85±0.97* 3.76±0.45*C組 24 6.41±0.81* 3.11±0.41*#F值 11.043 38.366 P值 ＜0.05 ＜0.05

2.3 HBV DNA與HBsAg的相關性Spearman相關性分析結果顯示，A組中，HBV DNA與HBsAg呈正相關（r=0.982，P＜0.05）；而B組、C組中，HBV DNA與HBsAg定量水平之間無明顯相關性（r=0.085、0.067，均P＞0.05），見表3。

表3 HBV DNA與HBsAg的相關性

2.4 HBV DNA與HBsAg定量水平與肝硬化程度的相關性Spearman相關性分析結果顯示，HBV DNA、HBsAg定量水平與肝硬化程度均呈負相關（r=-0.715、-0.504，均P＜0.05）。

3 討論

慢性乙肝是指患者感染HBV持續6個月以上，且肝臟出現不同炎癥壞死和（或）肝纖維化的疾病。全球有2億多慢性HBV感染者，而多數HBV感染患者隨著病情加重會發展為肝硬化，在國內，約60%的HBV患者會轉化為肝硬化[6]。HBV DNA位于HBV核心內，其是HBV感染的最直接證據，具有特異性、靈敏度較高的特點，其定量水平與病毒復制和傳染性存在密切關聯。HBsAg是HBV感染的重要標志物，具有穩定可靠的特點，可作為診斷HBV感染的重要依據，其是一種由乙型肝炎病毒S基因分泌而來的病毒包膜蛋白質，可排放至細胞外。研究表明，與感染性成熟病毒顆粒相比，HBsAg亞病毒顆粒定量水平更高，在及時進行抗病毒治療后，仍不能完全抑制病毒復制增生，HBsAg仍可持續合成與分泌[7]。可見，HBsAg在HBV感染和疾病發展中發揮著重要作用。血清HBsAg是肝細胞核基因整合的共價閉合環DNA（cccDNA）的轉錄和翻譯結果，其滴度與cccDNA數量相關，因此，通過檢測血清HBsAg可反映肝細胞中cccDNA的轉錄和翻譯活性。由于HBV DNA只能反映HBV復制情況，而HBsAg可提供與HBV DNA不同的互補信息，因此可將HBsAg作為感染細胞數量的替代性指標。

本研究結果顯示，A組患者HBV DNA、HBsAg水平均顯著高于B組、C組，B組顯著高于C組，提示HBV DNA、HBsAg定量水平隨著病情加重而逐漸降低。分析原因可能為HBV的入侵會改變人體機能，體內細胞會更具有特異性，體液也會出現明顯的免疫應答，進而破壞肝細胞，隨著疾病的不斷發展，肝細胞的損壞范圍會繼續擴大，增加肝部的纖維化容量，可能出現HBV DNA和HBsAg水平降低的情況[8]。本研究結果還顯示，A組HBeAg陽性患者HBV DNA與HBsAg定量水平均顯著高于B組、C組，B組HBeAg陽性患者HBsAg定量水平顯著高于C組，B組、C組HBeAg陽性患者HBV DNA定量水平相比，差異無統計學意義(P＜0.05），提示隨著慢性乙型肝炎向肝硬化進展，患者肝損傷不斷加重，HBsAg和HBV DNA定量水平可能逐漸降低，但并不能完全說明HBV復制不活躍，也可能與本研究樣本量少有關。

本研究結果顯示，HBV DNA、HBsAg在A組中呈正相關，在B組、C組中無明顯相關性，提示HBV DNA、HBsAg在疾病不同階段并不完全平行，分析原因可能與HBV DNA、HBsAg在不同疾病階段的合成和分泌路徑不完全相同有關[9]。Spearman相關性分析顯示，HBV DNA、HBsAg與肝硬化程度呈負相關，但HBsAg和HBV DNA定量較低的肝硬化患者，不等同于肝細胞內cccDNA數量的相應減少，仍需積極的抗病毒治療，加強腫瘤篩查，可聯合血清學和影像學檢查來提高早期肝癌的檢出率。

綜上，隨著病情加重，HBV DNA、HBsAg定量水平呈逐漸降低趨勢，且HBV DNA與HBsAg呈正相關，但其在不同疾病階段并不完全平行，HBV DAN、HBsAg與肝硬化呈負相關，臨床通過對HBV DNA、HBsAg進行定量測定可有效預防肝硬化發展進程。