高效液相色譜法測定復方氨酚烷胺膠囊中對乙酰氨基酚的溶出度

郭倩倩 荊 輝 河南省三門峽市食品藥品檢驗檢測中心 472000

復方氨酚烷胺膠囊，是常用的感冒類用藥。常用于緩解感冒所引起的發熱、頭痛等癥狀，對預防感冒也有一定效果[1-3]。其執行標準為《衛生部藥品標準》，在該標準中，未規定溶出度的檢查。而溶出度的高低對于固體制劑在人體內起作用大小非常關鍵，也可以從側面考察該藥的制備工藝等參數[4-6]。為了進一步了解復方氨酚烷胺膠囊在人體中的溶出情況。我們選用高效液相色譜法來測定對乙酰氨基酚的溶出量。現報道如下。

1 儀器與試劑

1.1 儀器 Waters e2695高效液相色譜儀系統(Empower 2操作系統)，Waters 2998二極管陣列檢測器，天津市天大天發科技有限公司ZRS-8G型智能溶出儀，上海科導超聲儀器有限公司SK2510HP超聲波清洗器，德國賽多利斯BSA224S電子分析天平。所用儀器均在檢定周期內。

1.2 試劑 色譜純醋酸(南京化學試劑股份有限公司)，色譜純甲醇(天津市四友精細化學品有限公司)，水為超純水，分析純鹽酸(鄭州龍達化工產品有限公司)。對乙酰氨基酚對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：100018-201610)；復方氨酚烷胺膠囊(四川依科制藥有限公司，批號：190102、181105、180704)。

2 方法

2.1 溶出條件設置 根據《中國藥典》(2015年版)通則0931[7]的相關要求，該復方制劑溶出采用第一法轉籃法。每個轉籃內放1粒樣品，轉速設定為100r/min，取樣時間設定為45min。溶出溶液為0.1mol/L的鹽酸。

2.2 高效液相色譜條件設置 高效液相色譜柱使用Agela C18色譜柱(250mm×4.6mm,5μm)，流動相為甲醇∶1%醋酸水溶液(15∶85),柱溫箱設定溫度為(30±2)℃，檢測波長設置為254nm，流動相流速設置為1.0ml/min。

2.3 供試品溶液制備 取0.1mol/L的鹽酸6份,每份900ml，分別加入6個溶出杯中，將加入溶出液的溶出杯超聲20min以排除氣泡。超聲完畢后，放入溶出儀，待溶液溫度穩定在37℃時，放下轉籃，以100r/min開始轉動，計時開始，在特定的時間取樣10ml，過濾，取續濾液3ml加入10ml棕色容量瓶中，用0.22μm的濾膜過濾后進行色譜分析。

2.4 對照品溶液制備 精密稱取對乙酰氨基酚對照品20.12mg，置于100ml的棕色容量瓶中，加適量流動相超聲使溶解，用流動相稀釋至刻度,作為對照品儲備液。精密吸取對照品儲備液5ml，加入10ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，作為對照品溶液。

2.5 進樣及計算 精密吸取對照品、供試品溶液各10μl按照上述條件進行色譜分析，根據對乙酰氨基酚的色譜峰面積，對其含量進行計算。

3 試驗結果

3.1 線性關系試驗 精密吸取對照品儲備液6份，每份1ml，分別置于100ml、50ml、25ml、20ml、10ml、5ml棕色的容量瓶中，加流動相稀釋至刻度。搖勻后，按照“2.2”和“2.5”中規定的方法進行試驗。峰面積作為縱坐標(Y)，濃度作為橫坐標(X)，進行線性回歸分析。可得回歸方程為：Y=30 675X+568.45(r=0.999 7)；提示在2.07～207.66μg/ml的范圍內，對乙酰氨基酚線性關系良好。

3.2 精密度試驗 精密吸取對照品溶液，按照“2.2”和“2.5”中規定的方法進行試驗，連續進樣6次，根據峰面積計算其RSD為0.9%。對乙酰氨基酚對照品的色譜圖見圖1。

圖1 對乙酰氨基酚對照品色譜圖

3.3 回收率試驗 取已知對乙酰氨基酚含量的復方氨酚烷胺膠囊內容物適量(約相當于對乙酰氨基酚10mg)10份,每份10mg，分別置于100ml棕色容量瓶中，分別精密稱取對照品適量分別加入容量瓶中，用流動相溶解并定容至相應刻度，搖勻后濾過，按照“2.2”和“2.5”中規定的方法進行試驗，見表1。

表1 回收率試驗結果

3.4 溶出度試驗 按照“2.1”中設置的溶出度方法，分別取3批樣品各6粒，加入溶出儀進行試驗，在15min取樣檢測；同法，另取樣品進行試驗，分別在30min、45min、60min取樣進行檢測。另取對照品28.03mg，加入100ml棕色容量瓶中，用流動相溶解并定容至刻度。按照“2.2”和“2.5”中規定的方法進行試驗。計算各樣品相對于標示量的平均溶出度。結果表明，在45min時，溶出率基本可以達到100%。見表2。

表2 溶出度試驗結果

4 討論

4.1 取樣時間的選擇 《中國藥典》(2015年版)規定，硬膠囊劑的崩解時限為30min，在30min時取樣發現溶出率在75%左右，這說明在30min的時候，對乙酰氨基酚還沒有完全釋放到溶液中。這可能和藥物的制備方法、工藝等有關。在45min時取樣檢測發現溶出率基本在100%左右，因此，筆者將取樣的時間定到45min。

4.2 溶出介質的選擇 對乙酰氨基酚呈酸性且在水溶液中不易溶，因此，不能選擇水作為溶出介質。0.1mol/L的鹽酸溶液接近人胃液的溶度，在此種溶液中進行溶出度試驗，更符合人吃藥后藥物轉化的實際情況，并且對乙酰氨基酚在此種酸性溶液不易解離，利于應用高效液相色譜法進行測定。

4.3 溶出轉速的選擇 根據《中國藥典》(2015年版)中的實例，轉速一般為50r/min、75r/min和100r/min，本試驗按照這三個轉速均進行了試驗，試驗結果發現采用50r/min、75r/min時，完全溶出所需要的時間較長。為了節約時間，更快速、準確地得到試驗結果，本試驗采用100r/min進行試驗。本試驗采用環境友好的試劑進行試驗。能快速、準確地測定復方氨酚烷胺膠囊中對乙酰氨基酚的溶出度。測定結果準確可靠。利用溶出度試驗，更準確地模擬了藥品在體內的溶出狀況，為安全用藥提供了科學依據,建議在標準中加入對其溶出度的檢查。