結(jié)核感染T細(xì)胞斑點試驗聯(lián)合腺苷脫氨酶在結(jié)核性胸膜炎中的診斷價值

劉亞軍 霍婧一

1.黑龍江省傳染病防治院檢驗科 黑龍江 哈爾濱 1505002.黑龍省傳染病防治院檢驗科病理室,黑龍江 哈爾濱 150500

結(jié)核性胸膜炎較多出現(xiàn)于初發(fā)結(jié)核病，至少1/4結(jié)核病病例以肺外結(jié)核病作為首發(fā)癥狀，其中以結(jié)核性胸膜炎最為常見[1]。大約4%結(jié)核病病例會存在胸腔積液情況。當(dāng)機(jī)體伴有結(jié)核性胸膜炎時，抗原會形成遲發(fā)型超敏反應(yīng)，進(jìn)而造成胸膜炎癥，并導(dǎo)致胸膜血管通透性的上升，進(jìn)而引起回流障礙而產(chǎn)生胸腔積液[2]。胸腔積液中富含多種因子，因此這為采用生化指標(biāo)檢測診斷結(jié)核性胸膜炎提供了新的方向。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性總結(jié)我院2019年 5月～2020年5月收治的133例胸膜炎患者的臨床資料，根據(jù)檢測結(jié)果的差異，將其分為結(jié)核性胸膜炎(觀察組，共69 例)以及非結(jié)核性胸膜炎(對照組，共64例)。觀察組男39例，女 30例；年齡:22～81歲，平均年齡：52.96±3.78歲。對照組男35例，女 29例；年齡:25～80歲，平均年齡：53.47±3.51歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)穿刺活檢確診者；(2)未發(fā)現(xiàn)血性胸水者；(3)未發(fā)現(xiàn)精神功能障礙者。兩組一般資料差異不顯著(P>0.05)。

1.2方法 兩組均給予ADA與T-SPOT.TB診斷。(1)ADA 檢測：選擇全自動生化分析儀(生產(chǎn)單位：日本日立；型號：7600)采用速率法實施測定。(2)T-SPOT.TB 檢測：采集5 ml 外周血并給予相應(yīng)抗凝措施，重懸細(xì)胞，并取50μl培養(yǎng)基放入96 孔板(對照)，50 μl分枝桿菌放入孔板(刺激原)，將適量細(xì)胞懸液置于孔中，經(jīng)培養(yǎng)后選擇PBS 液清洗孔板，然后置入磷酸酶后培養(yǎng)，后選擇PBS 液清洗孔板，將顯色底物置入孔內(nèi)，大約十分鐘后結(jié)束反應(yīng)。

1.3觀察指標(biāo) (1)ADA水平：當(dāng)其濃度ADA 值不小于40 U/L時，則表明結(jié)果為陽性；(2)T-SPOT.TB結(jié)果①滿足以下任一條件則表明結(jié)果為陽性：檢測孔斑點數(shù)目為對照孔兩倍， 且對照孔不小于六個；②檢測孔斑點數(shù)目-對照孔≥六，且對照孔數(shù)目小于五個；(3)檢測準(zhǔn)確性、特異性等指標(biāo)。

1.4統(tǒng)計分析 應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件，計量資料比較采用t檢驗，計量資料采用χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1兩組 ADA濃度分析 觀察組ADA(50.63±3.47 U/L)水平顯著高于對照組(12.81±1.05U/L)，差異顯著(P<0.05)。

2.2兩組檢測結(jié)果分析 兩種指標(biāo)聯(lián)合檢測陽性率為98.55%(68/69)，T-SPOT.TB為91.3%(63/69)、 ADA為71.01%(49/69)，觀察組中，兩種指標(biāo)聯(lián)合檢測陽性率顯著優(yōu)于單一檢測指標(biāo)(P<0.05)。

2.3評估指標(biāo)比較研究 觀察組中，兩種指標(biāo)聯(lián)合檢測準(zhǔn)確性以及特異性等均顯著優(yōu)于單一檢測指標(biāo)(P<0.05)。見表1。

表1 評估指標(biāo)比較研究

3 討 論

結(jié)核性胸膜炎具有病情進(jìn)展快、傳染性強(qiáng)等特點[3]。其主要以全身中毒表現(xiàn)以及胸腔積液而引起的局部癥狀為特征。所以積極診斷結(jié)核性胸膜炎意義重大。針刺胸膜活檢是臨床中檢查結(jié)核性胸膜炎的“金標(biāo)準(zhǔn)”，具有準(zhǔn)確率高等優(yōu)點，然而其仍存在創(chuàng)傷性、細(xì)菌培養(yǎng)周期長等缺點，因此在臨床中應(yīng)用受到較大的限制。臨床表現(xiàn)、X線及超聲等方式是診斷結(jié)核性胸膜炎的常規(guī)方案，但如今大量臨床數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，其檢測效果仍未達(dá)到人們的預(yù)期。ADA 與機(jī)體免疫能力存在緊密的關(guān)系，其在淋巴細(xì)胞中含量較高。這主要是因T 淋巴細(xì)胞參與了體內(nèi)的免疫反應(yīng)，進(jìn)而引起生長增殖，并提高了CD+4T 細(xì)胞的選擇性，最終造成ADA水平的上升。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組ADA 水平明顯高于對照組。目前,我國臨床往往以 ADA大于40U/L進(jìn)而評估，雖然該方法特異度較為理想，但是容易導(dǎo)致漏診現(xiàn)象。近幾年，γ干擾素釋放試驗 ( IGRAs) 在臨床中應(yīng)用愈加廣泛，其工作原理主要是機(jī)體被結(jié)核桿菌初次入侵后，會導(dǎo)致細(xì)胞免疫反應(yīng)，當(dāng)機(jī)體被再次感染時，記憶T細(xì)胞會經(jīng)過活化轉(zhuǎn)變?yōu)樾?yīng) T 細(xì)胞，最終會產(chǎn)生一系列多種因子如γ干擾素。如今，T-SPOT. TB試驗在臨床中越來越廣，其能夠刺激單個核細(xì)胞形成γ干擾素，然后利用酶聯(lián)免疫斑點法計算T 細(xì)胞數(shù)量。該試驗主要是兩種抗原針對不同表位反應(yīng)，從而大大提高了該手段的靈敏性以及特異性。臨床醫(yī)師在鑒別診斷結(jié)核性胸膜炎的過程中，應(yīng)注意分辨以下疾病：(1)細(xì)菌性肺炎：對于結(jié)核性胸膜炎急性期病例來說，體溫上升、胸痛以及咳嗽等是其主要表現(xiàn)，X線呈現(xiàn)為高密度均勻陰影，因此容易被醫(yī)師誤診。(2)類肺炎性胸腔積液：較多出現(xiàn)于伴有肺部病變的患者，其積液量常常較少，且于病變方位一致。(3)惡性胸腔積液：肺癌等疾病患者往往會出現(xiàn)胸腔積液，醫(yī)師應(yīng)注意提高警惕與其區(qū)別。此外，結(jié)核性胸膜炎還應(yīng)與類風(fēng)濕性胸膜炎等疾病進(jìn)行分辨，以免誤診。總之，T-SPOT.TB聯(lián)合ADA能夠有效診斷結(jié)核性胸膜炎，降低了漏誤診率，有利于為下一步診治提供科學(xué)的信息，值得推廣應(yīng)用。