北京地區健康成年女性血清尿酸參考區間的建立與驗證

郭慧娟，鞏瑤瑤，唐今揚，陳 勛

尿酸（uric acid,UA）是嘌呤代謝的終產物，主要是細胞代謝分解的核酸和其他嘌呤類化合物以及食物中的嘌呤經酶的作用分解而產生。尿酸水平的高低取決于尿酸產生和排泄之間的動態平衡，在尿酸增多和排泄減少時，均可導致血中尿酸濃度增高[1]。若患者的血尿酸濃度過高，尿酸則以尿酸結晶的形式沉積在患者人體組織內，在腎臟、軟骨、關節中沉積，繼而引發相關組織異物炎性反應。早期臨床應用中，尿酸對高尿酸血癥、痛風、高血壓、冠心病及缺血性腦卒中等疾病的診斷、治療、康復檢測具有較高的臨床價值[2-3]。研究表明，女性進入青春期，血尿酸值升高不明顯，而絕經后，因雌激素水平明顯降低，減少了腎臟對尿酸的排泄，所以其水平相應升高[4]。在臨床工作中，統計女性尿酸數據發現，健康女性不同年齡段的尿酸值往往有較大差別，直接采用試劑廠商提供的女性單一參考范圍（142～339 μmol/L）并不恰當，根據單一尿酸參考范圍很多健康女性甚至被列入“高尿酸”人群；目前較少看到根據女性年齡分層建立尿酸參考區間的報導，迫切需要根據年齡分層建立的新的尿酸參考區間，對臨床提供參考依據。

1 對象與方法

1.1 對象 收集2019年1月—10月在北京中國中醫科學院進行健康體檢者女性，研究對象均排除心腦血管疾病、高血壓、肝功異常、高血糖及血脂異常人群、痛風及腎病患者。檢測數據按照WS/ T402-2012《臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》[5]剔除離群值，符合要求的共10373例。根據年齡分層：＜25、＜35、＜45、＜55、＜65、＜75歲及75歲。

1.2 儀器與試劑 Roche cobas 8000全自動生化分析儀及羅氏原裝配套試劑（批號37456301）（羅氏公司，德國），檢測線性范圍為（11.9～1 487.0）μmol/L。室內質控品為伯樂(BIO-RAD)的Multiqual質控品（伯樂公司，美國）。尿酸室間質評結果達到衛生部臨床檢驗中心的質量要求。

1.3 標本采集 抽取空腹靜脈血于紅黃抗凝干燥管中，3 000 rpm離心10 min，分離血清后檢測尿酸水平，剔除溶血、脂血、黃疸標本并重新采集符合要求的標本。尿酸檢測操作步驟嚴格參照儀器及試劑說明書，所有標本均當天檢測。

1.4 統計學處理 應用SPSS 21.0軟件對數據進行統計分析。首先對各組尿酸數據進行正態性檢驗，組間整體比較用方差分析，整體有差別時的組間兩兩比較采用最小乘積差法（LSD）。尿酸參考區間的初步建立采用非參數方法計算95%(P2.5～P97.5)。驗證參考區間采用參照WS/T402-2012《臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》[5]和CLSI C28-A3[6]推薦方法，采用Dixon 法對數據進行離群值檢驗，將檢測結果按大小排序后計算極差（R），并分布計算最大值和最小值與其相鄰數值之差（D），若D/R1/3，則將最大值或最小值視作離群值剔除，將余下數據重復上述步驟，直至剔除全部離群值。來驗證參考區間。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 參考區間的建立 ＜2 5歲(435例)尿酸為（241.74±69.73）μmol/L，＜35歲(633例)尿酸為（245.33±66.98）μmol/L，＜45歲(914例)尿酸為（244.28±63.10）μmol/L，3組組間比較差異均無統計學意義（F=0.393，P=0.675）。將此3組合并為＜45歲組，將其原有的7組劃分為5組，血尿酸值在每個年齡組均符合正態分布。＜45歲與各組比較，差異均有統計學意義，＜55歲與＜65歲，＜65歲與75歲；＜75與75歲這3組比較差異均有統計學意義（P＜0.05）（表1）。

表1 5個年齡組健康成年女性血清尿酸水平

2.2 參考區間的驗證 另收集2019年10月—11月在西苑醫院體檢中心健康體檢者標本，按照建立參考區間的篩選標準，在每個年齡組各收集20例標本，5組共100例標本，檢測數據按照 WS/ T402-2012《臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》[5]剔除離群值，這些標本中無離群值，標本未剔除。將血尿酸值與參考區間進行比較,血尿酸值均在所建立的參考區間范圍內，符合檢測結果90%以上在建立的參考區間范圍內,驗證結果符合相關規定要求。

3 討論

參考區間的正確制定對臨床診斷和預后判斷非常重要[7]。國際臨床化學和檢驗醫學聯合會[8]和WS/ T 402-2012《臨床實驗室檢驗項目參考區間的制定》[5]皆推薦實驗室應建立符合本地區的參考區間。多年來我國大部分檢驗項目參考區間主要引用或參照國外人群資料[9]。由于人群、生活習慣、生活地區、經濟發展的不同，使用這些參考區間可能會有一定的偏差[10]。本實驗室女性血尿酸參考區間引用羅氏尿酸檢測試劑說明書，在臨床工作中發現此參考區間并不適合本實驗室，所以應建立本實驗室本地區女性的參考區間。

本研究結果顯示，＜45歲組與另外4組差異均有統計學意義，并且不論是均值還是97.5%位數均低于另外4組。＜55歲與＜65歲，＜65歲與75歲，＜75歲與75歲比較差異皆有統計學意義，并且隨著每組年齡的增加，組別的97.5%位數也在增加。

本研究發現，＜45歲的3個年齡組血尿酸差異無統計學意義；＜45歲的女性尿酸值要低于其他組，且差異有統計學意義。在＜45歲時，女性卵巢分泌雌二醇功能良好，雌二醇能抑制尿酸的吸收和促進尿酸的排泄，所以在青春期，血尿酸值升高不明顯；隨著年齡的增加，卵巢功能下降，雌激素分泌不足，直接影響血尿酸的水平，使尿酸的水平升高[8]。婦女45歲左右卵泡全部耗盡，雌二醇明顯減少，卵巢功能逐漸減退[11]。王勇強等[12]與Ichikawa等[13]研究中發現雌二醇與血尿酸水平呈負相關，雌二醇對高尿酸有重要的保護作用。雌二醇水平越高，越能促進腎臟尿酸排泄，從而維持機體尿酸水平穩定[14]。雌二醇可能通過抑制尿酸重吸收蛋白的表達和促進尿酸分泌蛋白的表達來降低血尿酸[15]。張立晶等[16]認為年齡是女性尿酸升高的獨立相關因素。

本研究顯示按年齡分層后，＞45歲的每組尿酸值97.5%位數均增加。楊倩春[17]在研究中發現如果以15歲為年齡段分層，年齡70歲高尿酸率高于年齡段55～69。王素平等[18]按年齡組45～49歲，50～59歲，60～69歲，70～79歲和80～96歲分層抽樣研究，發現隨著年齡的增加高尿酸的比例也在增加，與本研究基本一致。原因可能是因為＞45歲后，女性陸續進入絕經期，雌激素顯著下降，雖腎上腺皮質也可以分泌少量的雌激素，但是隨著年齡的增加，身體各個器官的功能也有所下降，所以腎上腺皮質分泌的雌激素也逐漸減少，由于缺少雌激素的抑制作用，導致血尿酸的升高。

綜上所述，女性尿酸參考區間應根據年齡分層建立不同的參考區間。在進行參考區間的建立及驗證后，應按照國際標準化組織（ISO）15189文件[19]的要求，定期邀請臨床醫生進行臨床評審，以進一步確保所建立參考區間的可靠性。