溶血三項聯合血清總膽紅素檢測對新生兒溶血病早期診斷的臨床價值

江藍玉，方莉敏，朱瑜，雙鷗

江西省上饒市人民醫院輸血科 （江西上饒 334000）

新生兒溶血病（hemolytic disease of newborn，HDN）是指由于母嬰血型不合導致的同族免疫性溶血疾病[1]。該病臨床表現為水腫、黃疸、貧血或肝脾腫大等，倘若診斷治療不及時，可能會誘發新生兒膽紅素腦病、膽汁黏稠綜合征，嚴重者甚至引發呼吸、循環系統衰竭等，嚴重危害新生兒的生命安全[2]。現階段，臨床上針對HDN 的診斷通常采用溶血三項檢測。近年來，相關研究表明，血清總膽紅素水平對診斷HDN 具有重要價值，但有關溶血三項聯合血清總膽紅素檢測對HDN 診斷有效性的研究成果卻并不多見[3]。本研究探討溶血三項聯合血清總膽紅素檢測對HDN 早期診斷的臨床價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年3月至2020年5月我院接收的100例HDN 患兒，其中男62例，女38例；產婦血型均為O 型RhD 陽性；患兒血型，B 型32例，A 型41例，O 型27例；患兒日齡2 h 至18 d，平均（6.5+1.5）d。患兒均出現水腫、黃疸、貧血或肝脾腫大等臨床癥狀，并排除先天性肝、膽系統疾病。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，患兒家屬均簽署知情同意書。

1.2 方法

（1）溶血三項檢測：應用抗人球蛋白檢測卡（天津德祥生物技術有限公司）、人ABO 血型正/反定型和Rh（D）血型檢測卡（天津德祥生物技術有限公司）、專用檢測卡離心機（杭州奧盛儀器有限公司，型號TD2-12）和37℃試劑卡孵育器（天津德祥生物技術有限公司，型號K37-24）進行溶血三項檢測，于清晨抽取患兒3 ml 靜脈血，依次進行直抗試驗、游離試驗和釋放試驗，所有操作均嚴格按照相關儀器和試劑使用說明書進行。（2）分組方法：根據溶血三項檢測結果將患兒分為A、B、C、D 4組，其中A組為直抗試驗（+）、游離試驗（-）、釋放試驗（+），B 組為直抗試驗（+）、游離試驗（+）、釋放試驗（+），C 組為直抗試驗（-）、游離試驗（-）、釋放試驗（+），D 組為直抗試驗（-）、游離試驗（+）、釋放試驗（+）。（3）血清總膽紅素檢測：應用全自動生化分析儀（西門子，型號ADVIA2400）采用常規生化法測定4組的血清總膽紅素水平（正常值參考范圍為1.71～17.1 mmol/L）。（4）治療方法：根據患兒具體病情給予差異化治療，如丙種球蛋白靜脈注射、藍光光療等。

1.3 觀察指標

（1）比較溶血三項聯合血清總膽紅素檢測和溶血三項單獨檢測對HDN 的早期診斷情況。（2）比較4組治療前后的血清總膽紅素水平。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 聯合檢測和溶血三項單獨檢測對HDN 的早期診斷情況

聯合檢測對HDN 的早期檢出率為97%（97/100），高于溶血三項單獨檢測的85%（85/100），差異有統計學意義（χ2=5.945，P＜0.05）。溶血三項單獨檢測對HDN 的檢出情況見表1。

表1 溶血三項單獨檢測對HDN 的檢出情況

2.2 4組血清總膽紅素水平比較

治療前，4組血清總膽紅素水平比較，差異無統計學意義（F=1.39，P＞0.05）；治療后，4組的血清總膽紅素水平均低于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 4組血清總膽紅素水平比較（mmol/L，±s）

表2 4組血清總膽紅素水平比較（mmol/L，±s）

組別 例數 治療前 治療后 t P A 8 251.12±66.05 181.82±35.05 0.03 ＜0.05 B 10 264.06±85.71 192.13±65.07 2.63 ＜0.05 C 26 243.93±85.45 184.31±42.17 3.56 ＜0.05 D 41 252.33±84.29 184.72±47.89 4.81 ＜0.05

3 討論

在妊娠過程中，胎兒的胎盤血管通過單層合體細胞與血竇間隔，伴隨妊娠周期的增長，單層合體細胞的間隙不斷增大，血細胞逐漸從血管滲透至產婦循環系統，倘若母嬰血型不合，胎兒的紅細胞可激活母體免疫系統，并產生IgG 抗體，若IgG 抗體進入胎兒體內，可形成HDN[4-5]。目前，ABO 血型不合是我國最普遍的HDN 類型，但大多數由于ABO 血型不合導致的HDN 癥狀較輕，僅有超過6%的患兒表現出明顯的溶血癥狀[6-7]。

目前，溶血三項檢測是臨床公認的診斷HDN 的有效方法，分為直抗試驗、游離試驗、釋放試驗3種[8-9]。直抗試驗和釋放試驗能對患兒紅細胞結合血型抗體進行檢測，具有準確度和靈敏度高的特點，可作為診斷HDN 的重要指標。游離試驗主要對患兒血清中的母體血型抗體進行檢測，若結果呈陽性，提示新生兒血液中有母體帶的IgG 抗－A（B），這種物質會對新生兒紅細胞產生致敏效應，導致新生兒紅細胞免疫性破壞，并引發嚴重后果。張少豐等[10]的研究認為，游離試驗結果能夠作為診斷HDN 的一項參考指標，但并非確診依據。盡管溶血三項檢測對診斷HDN 具有較強的參考價值，但近年來的相關研究也顯示其檢測結果存在假陰性。郭秋等[11]的研究發現，溶血三項檢測結果容易受檢測操作規范性、血液抽取時間、血液存放環境等因素的影響，導致出現假陰性。肖成等[12]的研究也證實，若血液標本保存時間過長、檢測中晃動劇烈、保存環境溫度過高或偏低，均會影響實驗室檢測結果的準確性。其他研究也得出相似結果[13-14]。因此，溶血三項單獨檢測作為HDN 的診斷依據仍存在一定缺陷。

膽紅素是人體血液循環過程中，由衰老的紅細胞在骨髓、脾臟、肝臟等器官的單核吞噬細胞系統中，經破壞分解形成的產物，分為間接膽紅素和直接膽紅素。健康人體的膽紅素占總膽紅素的80%～85%，其余15%～20%來自骨髓中無效造血的血紅蛋白和含有亞鐵血紅素的C 血紅蛋白物質[15]。臨床研究表明，直接膽紅素在HDN 診斷中具有重要的參考價值。楊冬梅和李志堅[16]的研究發現，HDN 患兒的血清總膽紅素水平會在短時間內呈快速上升態勢，并顯著高于正常水平，提示血清總膽紅素可作為診斷HDN 的關鍵性指標。楊軍等[17]的研究證實，臍帶血總膽紅素水平檢測對診斷早期HDN 具有顯著價值，且可作為評估HDN 嚴重程度的依據，對患兒的預后評估也具有指導作用。但近年來也有研究認為血清總膽紅素診斷HDN 受到多方面因素的影響，其準確度和靈敏度有待進一步證實。尹明偉等[18]的研究發現，患兒的日齡、母嬰血型類型均可能影響血清總膽紅素的檢測結果，日齡越小的患兒采用血清總膽紅素檢測診斷HDN 的準確度越高。綜合上述研究成果可得出結論，單一血清總膽紅素檢測作為HDN 的診斷依據也存在缺陷。

本研究在既往研究的基礎上采用溶血三項聯合血清總膽紅素檢測診斷HDN，探討聯合檢測的早期診斷價值。結果顯示，聯合檢測對HDN 的早期檢出率高于溶血三項單獨檢測，4組治療后血清總膽紅素水平均低于治療前。

綜上所述，溶血三項聯合血清總膽紅素檢測能夠顯著提升HDN 的早期檢出率。