不加防腐劑尿液保存方法對(duì)24 h尿蛋白定量測(cè)定的影響

鄺婉儀，楊麗媛，李梅愛(ài)，劉海英

（廣州市婦女兒童醫(yī)療中心，廣東 廣州 510120）

0 引言

24 h尿蛋白定量測(cè)定是評(píng)估腎功能的重要指標(biāo)，用于診斷、治療及評(píng)估腎臟疾病及預(yù)后效果[1]。在進(jìn)行尿蛋白定量檢測(cè)時(shí)，尿蛋白定性陽(yáng)性或每日尿蛋白定量＞150 mg/24尿，即為蛋白尿，對(duì)預(yù)測(cè)疾病預(yù)后、效果觀察有重要意義[2]。因此準(zhǔn)確測(cè)定其結(jié)果，正確留取尿液標(biāo)本及保存，是質(zhì)量控制、病情監(jiān)測(cè)的第一步。尿液樣本保存常分為冷藏法及化學(xué)防腐劑法，一般認(rèn)為尿液長(zhǎng)時(shí)間保存會(huì)繁殖大量細(xì)菌，影響尿蛋白定量檢測(cè)結(jié)果。因此一般在尿液添加防腐劑，于尿液表面形成一層保護(hù)膜，阻斷尿液接觸空氣，達(dá)到防腐效果，提高尿蛋白定量檢測(cè)準(zhǔn)確性[3]。但甲苯應(yīng)用有一定腐蝕性，且有生物毒害作用，使其防腐劑添加存在爭(zhēng)議性。因此，本研究就探討不加防腐劑尿液保存法對(duì)24 h尿蛋白定量測(cè)定結(jié)果的影響，旨為尿液標(biāo)本保存提供參考，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料。研究符合本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批標(biāo)準(zhǔn)，審核通過(guò)。收集2019年2月至2019年3月新鮮清晨尿液標(biāo)本，按照當(dāng)日尿常規(guī)蛋白定性結(jié)果，蛋白陰性、弱陽(yáng)性、+、++、+++、++++各留取20份標(biāo)本，共120份，每份標(biāo)本分六支，三支為不添加甲苯，另三支添加甲苯，先即刻檢測(cè)，兩組檢測(cè)完后分別置于4℃、25℃和37℃環(huán)境中放置24小時(shí)再檢測(cè)一次尿蛋白，分析兩組尿液標(biāo)本24 h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果。樣本來(lái)源：男69例，女51例；年齡2～12歲，平均（6.91±1.52）歲。留取中段尿液；因是兒童，標(biāo)本無(wú)經(jīng)血、精液、白帶等雜質(zhì)混入。

1.2 檢測(cè)方法。按照當(dāng)日尿常規(guī)蛋白定性結(jié)果，蛋白陰性、弱陽(yáng)性、+、++、+++、++++各留取20份標(biāo)本，共120份，每份標(biāo)本分六支，三支為不添加甲苯，另三支添加甲苯，先即刻檢測(cè)，兩組檢測(cè)完后分別置于4℃、25℃和37℃環(huán)境中放置24小時(shí)再檢測(cè)一次尿蛋白，分析兩組尿液標(biāo)本24 h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果。所有儀器校準(zhǔn)通過(guò)，室內(nèi)質(zhì)控符合標(biāo)準(zhǔn)，尿液離心處理，留取上清液，采用比色法在日立7600全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)尿蛋白定量。

1.3 觀察指標(biāo)。①比較防腐劑組、無(wú)防腐劑組即刻尿蛋白定量檢測(cè)結(jié)果；②對(duì)比防腐劑組、無(wú)防腐劑組在冷藏（4℃）、室溫（25℃）、37℃時(shí)24 h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。因每組尿蛋白含量不屬于正態(tài)分布，使用非參數(shù)檢驗(yàn)的軼和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較防腐劑組、無(wú)防腐劑組即刻尿蛋白定量檢測(cè)結(jié)果。防腐劑組尿蛋白定量與無(wú)防腐劑組尿蛋白定量檢測(cè)值比較；差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 比較防腐劑組、無(wú)防腐劑組即刻尿蛋白定量檢測(cè)結(jié)果（±s，g/L）

表1 比較防腐劑組、無(wú)防腐劑組即刻尿蛋白定量檢測(cè)結(jié)果（±s，g/L）

組別 份數(shù) 尿蛋白定量防腐劑組 60 1.48±0.62無(wú)防腐劑組 60 1.49±0.65 t-0.145 P-0.886

2.2 對(duì)比防腐劑組、無(wú)防腐劑組在4、25、37℃時(shí)24 h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果。在4、25、37℃環(huán)境下，防腐劑組、無(wú)防腐劑組24 h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 對(duì)比防腐劑組、無(wú)防腐劑組在4、25、37℃時(shí)24h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果（±s，g/L）

表2 對(duì)比防腐劑組、無(wú)防腐劑組在4、25、37℃時(shí)24h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果（±s，g/L）

注：以上所有均與添加甲苯室溫24小時(shí)后的尿蛋白含量進(jìn)行比較。

蛋白定性溫度 陰性（n=20） 弱陽(yáng)性（n=20） +（n=20） ++（n=20） +++（n=20） ++++（n=20）4℃無(wú)甲苯0.08±0.01 Z=-0.340 P=0.734 0.13±0.03 Z=-0.393 P=0.694 0.47±0.06 Z=-0.284 P=0.776 0.86±0.08 Z=-0.081 P=0.935 1.65±0.07 Z=-0.122 P=0.903 1.80±0.08 Z=-0.189 P=0.850 25℃無(wú)甲苯0.07±0.01 Z=-0.014 P=0.989 0.14±0.02 Z=-0.122 P=0.903 0.48±0.05 Z=-0.162 P=0.871 0.88±0.07 Z=-0.419 P=0.675 1.66±0.07 Z=-0.027 P=0.978 1.81±0.09 Z=-0.027 P=0.978 37℃無(wú)甲苯0.08±0.02 Z=-0.679 P=0.497±0.15±0.01 Z=-0.108 P=0.914 0.49±0.03 Z=-0.447 P=0.655 0.89±0.08 Z=-0.352 P=0.725 1.68±0.09 Z=-0.027 P=0.978 1.82±0.08 Z=-0.271 P=0.787

3 討論

24 h尿蛋白定量是反映每天排泄的尿蛋白量，是診斷腎臟病變、評(píng)估病情治療效果及預(yù)后的重要指標(biāo)。通常臨床在保存尿液時(shí)，常采用甲苯保存，于尿液表面形成一層保護(hù)膜，起到防腐作用。甲苯作為常用的防腐劑，在尿液上層形成一層油滴樣薄膜，不溶于水，在檢測(cè)時(shí)會(huì)和尿液一起取樣，用生化分析儀分析樣本時(shí)，會(huì)使樣本檢測(cè)結(jié)果降低，且容易堵塞樣品針；同時(shí)甲苯屬于致癌物質(zhì)，氣味刺鼻，對(duì)人有明顯的危害，并非是一種理想的防腐劑，其用量難以控制[4-5]。因此是否在檢測(cè)24 h尿蛋白定量時(shí)無(wú)需添加防腐劑，并能確保檢測(cè)樣本結(jié)果的準(zhǔn)確性成為臨床研究熱點(diǎn)。本組研究中，防腐劑組尿蛋白定量即刻檢測(cè)結(jié)果與無(wú)防腐劑組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在4℃、25℃、37℃環(huán)境下，防腐劑組、無(wú)防腐劑組24h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，尿液標(biāo)本無(wú)論是否添加防腐劑，對(duì)24 h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果并無(wú)顯著影響。不同保存環(huán)境對(duì)尿蛋白定量檢測(cè)結(jié)果也無(wú)明顯差異，但在25℃、37℃保存時(shí)，尿液標(biāo)本結(jié)果波動(dòng)較4℃較為明顯，可并無(wú)顯著差異，故在4℃條件時(shí)，無(wú)防腐劑尿液檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定性優(yōu)于25℃、37℃的保存條件。

由于24 h尿液標(biāo)本留取時(shí)間長(zhǎng)，在收集、保存過(guò)程中，環(huán)境溫度改變會(huì)影響尿液標(biāo)本細(xì)菌的繁殖、代謝，因此影響尿液標(biāo)本質(zhì)量[6]。本組研究中，尿液標(biāo)本保存24 h后，4℃、25℃、37℃環(huán)境下無(wú)防腐劑組及防腐劑組標(biāo)本尿蛋白定量的檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯差異（P＞0.05），在尿液標(biāo)本未添加防腐劑時(shí)，可在4℃環(huán)境下保存占優(yōu)，蛋白定量檢測(cè)結(jié)果基本不受影響。且在黃燕青[7]研究指出，在常溫或低溫條件下，是否加入甲苯對(duì)24 h尿蛋白檢測(cè)結(jié)果無(wú)影響。故結(jié)合本次研究肯定了不添加防腐劑的作用價(jià)值。

綜上所述，24 h尿蛋白定量檢測(cè)時(shí)，可不加入防腐劑，考慮到甲苯作為危險(xiǎn)品發(fā)放給病人使用存在安全隱患，而不使用甲苯做防腐劑對(duì)病人尿蛋白結(jié)果無(wú)影響[8]。確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，安全、可靠，操作簡(jiǎn)單，值得推廣應(yīng)用。