免疫熒光法在陰道加德納菌檢測(cè)中的臨床應(yīng)用研究

杜麗偉

（深圳市羅湖醫(yī)院集團(tuán)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心/深圳市羅湖區(qū)婦幼保健院 檢驗(yàn)科，廣東 深圳 518019）

0 引言

加德納菌是一種革蘭氏染色陰性或具有變異的球菌樣小桿菌[1]。這種病原菌以原形為主適宜生存，溫度為35℃～37℃，而當(dāng)ph值降低至酸性后不利于這種病菌的生長(zhǎng)，在1954年被醫(yī)務(wù)人員分離，而在1955年被確認(rèn)這種病原菌與女性的細(xì)菌性陰道病有較為密切的關(guān)聯(lián)；加德納菌是導(dǎo)致女性發(fā)生細(xì)菌性陰道炎的主要病原菌之一，這種病菌的傳播類型與性接觸傳播有較為密切的關(guān)聯(lián)[2]，女性出現(xiàn)加德納菌感染后，不僅可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌性陰道炎，還有可能導(dǎo)致女性發(fā)生尿道炎和子宮頸炎等癥狀，如果妊娠期女性感染這種病癥，有可能導(dǎo)致胎膜早破和新生兒早產(chǎn)等不良妊娠結(jié)局。這種病原菌在對(duì)男性造成感染后，男性以無(wú)癥狀攜帶者為主。但在近年來(lái)的臨床報(bào)道中顯示[3]，加德納菌可能與男性的尿道感染和不孕不育有較為密切的關(guān)聯(lián)。這種病原菌在臨床上培養(yǎng)難度較大，所以在臨床研究中，針對(duì)加德納菌的快速檢測(cè)進(jìn)行了相應(yīng)的研究，為了快速診斷加德納菌感染，現(xiàn)在醫(yī)務(wù)人員認(rèn)為將直接免疫熒光檢測(cè)試劑應(yīng)用于加德納菌的檢測(cè)中，有助于明確患者的病情，對(duì)于患者后續(xù)治療工作的開展來(lái)說(shuō)有積極意義[4]。本次研究將我院收入的所有妊娠女性作為研究樣本，探究將免疫熒光法應(yīng)用于陰道加德納菌檢測(cè)中的效果，并分析我院中女性的加德納菌感染狀況。

1 資料與方法

1.1 一般資料。將我院2018年6月至2019年12月間收入的所有妊娠女性作為研究樣本，其中共包含916例妊娠女性，按照女性的妊娠狀況，將其分為病理組和正常妊娠組，單組內(nèi)樣本量均為458例，本次研究中所有女性均取其陰道分泌物，選擇直接免疫熒光技術(shù)，對(duì)其進(jìn)行觀察測(cè)定；在本次實(shí)驗(yàn)中，正常妊娠組女性年齡在21～34歲，平均（28.4±4.2）歲；病理組中女性年齡在22～35歲，平均（29.1±4.1）歲。病理組中女性包括先兆流產(chǎn)、稽留流產(chǎn)、難免流產(chǎn)以及不全流產(chǎn)等多種類型。納入標(biāo)準(zhǔn)：本次研究中所有產(chǎn)婦均為我院中接受健康體檢和產(chǎn)前篩查的產(chǎn)婦或由于流產(chǎn)而入院接受治療的產(chǎn)婦；所有產(chǎn)婦對(duì)本次實(shí)驗(yàn)均有良好認(rèn)知；產(chǎn)婦以及產(chǎn)婦家屬知曉產(chǎn)婦資料被調(diào)取可能性。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除缺乏正常認(rèn)知功能或器質(zhì)性病情嚴(yán)重的患者；排除合并高血壓以及甲狀腺功能亢進(jìn)患者；排除具有過(guò)敏史或用藥禁忌癥的患者。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)錄入Excel表格，由我院中相關(guān)數(shù)據(jù)分析人員進(jìn)行患者基本資料統(tǒng)計(jì)學(xué)分析確認(rèn)患者的基本資料具有良好可比性，可開展本次實(shí)驗(yàn)（P＞0.05）。

1.2 方法。首先采用無(wú)菌窺陰器將患者的陰道進(jìn)行擴(kuò)張，并且選擇無(wú)菌棉簽取女性的陰道分泌物，將其放置于無(wú)菌試管中送入檢查，在獲得樣本后，將無(wú)菌培養(yǎng)管中的分泌物標(biāo)本涂抹于玻片中央，對(duì)其進(jìn)行充分晾干后，應(yīng)用95%乙醇和無(wú)水乙醇進(jìn)行固定10分鐘。選擇移液器抽取5 uL應(yīng)到加德納菌免疫熒光試劑，將其均勻涂抹在玻片涂樣處，并且放置于37℃培育箱進(jìn)行培育30分鐘，采用去離子水或蒸餾水對(duì)玻片進(jìn)行多次沖洗后甩干等待玻片自然晾干，在晾干后在載玻片上滴加一滴鏡油，封裝玻片后，再滴加一滴鏡油，在100倍顯微鏡下尋找綠色熒光陰道加德納菌，在診斷過(guò)程中發(fā)現(xiàn)一個(gè)視野內(nèi)存在10個(gè)及以上典型加德納菌，則將患者視為陰道加德納菌感染。

1.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)女性的加德納菌檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，確認(rèn)不同組別的加德納菌感染狀況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。記錄本次實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的各項(xiàng)臨床數(shù)據(jù)，其中計(jì)量資料選擇T值進(jìn)行檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料選擇χ2進(jìn)行檢驗(yàn)，由統(tǒng)計(jì)學(xué)人員選擇SPSS 21.00 for windows進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，確認(rèn)結(jié)果與P值關(guān)系，若P＜0.05則說(shuō)明結(jié)果存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組女性的加德納菌感染狀況對(duì)比。在在本次研究結(jié)果中顯示正常妊娠組中的健康產(chǎn)婦的陰道加德納菌感染例數(shù)為69，而病理組中的產(chǎn)婦感染例數(shù)為71，兩組數(shù)據(jù)對(duì)比差異不顯著（P＞0.05），見表1。

表1 兩組女性的加德納菌感染狀況對(duì)比[n（%）]

2.2 所有加德納菌感染女性的年齡區(qū)間。而對(duì)所有加德納菌感染的產(chǎn)婦進(jìn)行年齡分析后發(fā)現(xiàn)加德納菌感染年齡的高發(fā)年齡段在19～30歲，占比在70.00%以上，與其他年齡段相比差異顯著（P＜0.05），見表2。

表2 所有加德納菌感染女性的年齡區(qū)間（n，%）

3 討論

加德納菌[5]是一種臨床上常見的病原菌類型，這種病原菌會(huì)對(duì)女性的生殖道和尿道造成一定的影響，女性出現(xiàn)的陰道感染和尿道感染與加德納菌均有較為密切的關(guān)聯(lián)。但值得注意的是，健康女性中的加德納菌檢出率也基本可以達(dá)到30%左右，可見單純的加德納菌感染[6]，并不能將其作為女性細(xì)菌性陰道炎的診斷，唯一標(biāo)準(zhǔn)，但如果女性陰道內(nèi)加德納菌和厭氧菌過(guò)度生長(zhǎng)，就會(huì)導(dǎo)致女性乳酸桿菌大量減少，引發(fā)女性的陰道出現(xiàn)微生態(tài)平衡失調(diào)，女性陰道分泌物性質(zhì)會(huì)發(fā)生改變，進(jìn)而更加容易導(dǎo)致患者出現(xiàn)相關(guān)病癥。加德納菌在目前臨床上被確認(rèn)為是細(xì)菌性陰道炎癥的重要病原菌，并且如果女性在妊娠期間感染這種病原菌，還有可能導(dǎo)致不潔流產(chǎn)以及術(shù)后感染等并發(fā)癥，所以在臨床上需要選擇一種安全高效的方式予以檢測(cè)[7]。

加德納菌對(duì)于營(yíng)養(yǎng)的要求較高[8]，選擇分離培養(yǎng)往往需要較長(zhǎng)的時(shí)間，而傳統(tǒng)的顯微鏡檢查又容易受到其他元素的影響，導(dǎo)致漏診或者誤診的情況。目前臨床上所選擇的單克隆抗體免疫熒光檢測(cè)法，在檢測(cè)時(shí)僅僅需要一個(gè)小時(shí)就能夠獲得良好的檢測(cè)效果，十分適合應(yīng)用于急診檢驗(yàn)，也便于批量檢測(cè)，并且這種檢測(cè)方式具有較高的靈敏度，可在臨床上進(jìn)行廣泛應(yīng)用。將簡(jiǎn)易方案中的熒光免疫檢測(cè)法應(yīng)用于患者的病情診斷中，能夠幫助醫(yī)務(wù)人員了解患者的具體病情。單克隆抗體為源于單個(gè)B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞分裂而產(chǎn)生的細(xì)胞系所分泌的抗體，僅能夠識(shí)別抗原分子上特定的抗原決定族不僅在抗體的特異性上較為統(tǒng)一，并且其親和力也具有一定的統(tǒng)一性，所以加德納抗體在病原菌的診斷中具有較高的特異性和臨床診斷準(zhǔn)確性。

綜上所述，將免疫熒光技術(shù)應(yīng)用于對(duì)于女性的妊娠來(lái)說(shuō)會(huì)產(chǎn)生良好的影響，而這種病癥的感染與年齡段有密切相關(guān)性，所以在臨床診療時(shí)，需要對(duì)高危女性進(jìn)行有效的診斷和治療，這樣才能有助于提升女性的妊娠質(zhì)量，保障女性的生理健康。