絕經后宮腔積液患者血清PKM2和CDCA5檢測對子宮內膜癌的診斷價值

賀 英，王 靜，薛乾隆，馬 會

河北北方學院附屬第一醫院:1.婦科;2.急診科，河北張家口 075000

子宮內膜癌是近年來女性最為常見的生殖系統腫瘤之一，有研究指出，子宮內膜癌的臨床發病率占女性所有惡性腫瘤中的8%左右，并位于生殖器官惡性腫瘤第二位[1]。流行病學研究顯示，近年來我國子宮內膜癌的臨床發病率逐年呈現明顯的上升趨勢，在西方發達國家，隨著普遍開展宮頸癌篩查等工作，雖然宮頸癌的發病率得到有效控制，但子宮內膜癌已逐漸成為最常見的惡性婦科腫瘤[2-3]。一般情況下，絕經后婦女是子宮內膜癌的高發人群，臨床多表現為絕經后陰道流血等癥狀，采用超聲檢查常提示宮腔占位或子宮內膜增厚[4]。臨床中常采用細胞學檢查、超聲等手段對子宮內膜癌進行鑒別和診斷。此外，有研究指出，糖類抗原(CA)125等血清學腫瘤標志物進行檢測可有效鑒別診斷子宮內膜癌[5]，但CA125在臨床應用中仍缺乏靈敏度、特異度，且陽性率較低。目前研究認為，能量代謝、物質代謝與腫瘤的生物學特性密切相關[6]。丙酮酸激酶M2型(PKM2)參與腫瘤代謝調控，并與多種腫瘤的發生和發展密切相關。有研究指出，細胞分裂周期相關蛋白5(CDCA5)在黑色素瘤、胃癌、乳腺癌、口腔鱗狀細胞癌等多種惡性腫瘤中呈高表達狀態，且與患者預后質量密切相關[7]。但PKM2和CDCA5在鑒別診斷絕經后宮腔積液和子宮內膜癌中的應用仍鮮有報道，因此本文選擇本院收治的絕經后宮腔積液和子宮內膜癌患者作為研究對象，分析絕經后宮腔積液患者血清PKM2和CDCA5檢測對子宮內膜癌的診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年2月至2019年12月本院收治的150例絕經后宮腔積液患者作為研究對象，且以宮腔鏡子宮內膜活檢術后石蠟切片病理報告作為金標準，分為宮腔積液組和子宮內膜癌組。宮腔積液組共83例，平均(60.38±2.94)歲，平均體質量指數(BMI)為(24.37±0.51)kg/m2，平均絕經年齡為(49.83±1.03)歲，平均絕經時間為(10.55±1.72)年，子宮內膜癌組共67例，平均(60.43±30.13)歲，平均BMI(24.26±0.63)kg/m2，平均絕經年齡為(50.01±1.03)歲，平均絕經時間為(10.42±2.03)年。選擇同期在本院進行體檢的50例體檢健康者作為對照組，平均(60.11±3.28)歲，平均BMI(24.11±0.73)kg/m2，平均絕經年齡為(50.18±1.32)歲，平均絕經時間為(10.63±1.67)年，各組受試者一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經本院醫學倫理委員會批準。

1.2方法 采集所有受試者清晨外周空腹靜脈血3～5 mL，靜置10 min后使用低溫離心機以3 000 r/min速度離心處理10 min后吸取血清，置于-4 ℃冰箱中保存。依據標準操作規程對檢測儀器進行操作，參照PKM2酶聯免疫吸附法試劑盒(杭州聯科生物科技有限公司)和CDCA5酶聯免疫吸附法試劑盒(杭州聯科生物科技有限公司)說明書和檢測儀器標準操作流程進行操作，檢測受試者血清中PKM2和CDCA5水平。

2 結 果

2.1各組患者血中PKM2和CDCA5水平檢測結果 子宮內膜癌組患者血中PKM2和CDCA5水平均明顯高于對照組和宮腔積液組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 各組患者血中PKM2和CDCA5水平檢測結果

2.2不同病理特征患者血中PKM2和CDCA5水平檢測結果 不同臨床分期、分化程度、肌層浸潤患者血中PKM2與CDCA5水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)，其中不同臨床分期患者中Ⅲ/Ⅳ期患者血中PKM2和CDCA5水平最高，臨床Ⅰ期患者血中PKM2和CDCA5水平最低，不同分化程度患者中，低分化程度患者血中PKM2和CDCA5水平最高，高分化程度患者血中PKM2和CDCA5水平最低，肌層浸潤>1/2患者血中PKM2和CDCA5水平明顯高于肌層浸潤≤1/2患者，有淋巴結轉移患者與無淋巴結轉移患者血中PKM2和CDCA5水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同病理特征患者血中PKM2和CDCA5水平檢測結果

2.3患者血中PKM2和CDCA5水平與病理特征的關系 子宮內膜癌患者血中PKM2和CDCA5水平是影響患者臨床分期、分化程度、肌層浸潤的獨立危險因素，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 患者血中PKM2和CDCA5水平與病理特征的關系

2.4患者血中PKM2和CDCA5水平鑒別診斷子宮內膜癌的價值 PKM2聯合CDCA5鑒別診斷子宮內膜癌的靈敏度、特異度及AUC均明顯高于PKM2或CDCA5的單獨應用，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4和圖1。

表4 患者血中PKM2和CDCA5水平鑒別診斷子宮內膜癌的價值[n(%)]

圖1 ROC曲線

3 討 論

子宮內膜癌是臨床中較為常見的發生于子宮內膜的上皮性惡性腫瘤，也是對女性生命安全造成嚴重威脅的女性生殖道惡性腫瘤[8]。目前，導致子宮內膜癌發生和發展的病因尚未明確，其可能與糖尿病、不孕不育、肥胖、激素替代治療、生活飲食習慣等多種因素均存在密切關系[9]。近年來，子宮內膜癌發病率呈逐年升高趨勢，目前，臨床中主要依靠刮宮取病變組織行診斷性病理活檢，但刮宮術在臨床中屬于盲目性操作，且刮宮為有創檢查，會對部分患者造成身心傷害，并不適用于常規體檢和篩查[10]。盡管近年來子宮內膜癌的治療和診斷取得一定進展，但其病死率和發病率仍較高，尋找準確有效評估子宮內膜癌的生物標志物對改善患者預后質量和生存質量具有重要意義[11]。血清腫瘤標志物的應用和檢測可有效輔助子宮內膜癌的早期發現、鑒別診斷，并可有效分析評估子宮內膜癌治療效果并監測復發情況，具有操作方便、創傷小等優點，已成為近年來臨床研究的熱點[12]。

近年來，惡性腫瘤的腫瘤細胞代謝已逐漸成為新的研究熱點，有學者指出，過度增殖是腫瘤細胞的重要特征，而在過度增殖過程中腫瘤細胞的能量代謝會產生明顯改變[13]。在腫瘤細胞的氧供應充足情況下，腫瘤細胞糖酵解途徑依然異常活躍，且糖酵解也是腫瘤細胞產能的重要途徑，上述情況也被稱為瓦伯格效應。丙酮酸激酶是細胞內重要的代謝調控酶，也是糖酵解途徑中重要限速酶，有研究指出腫瘤細胞中M1是PK酶的剪接異構體，PK酶為M2同工型[14]。一般情況下，嬰兒期PKM2活躍異常，在細胞快速生長時PKM2表達水平異常升高，但最終會被關閉，但PKM2會在腫瘤細胞中轉化和啟動。有研究指出，PKM2是腫瘤能量代謝轉換標志物，在包括肺癌、肝癌、腎癌等多種腫瘤中均處于異常高表達狀態，當PKM2形成二聚體后瓦伯格效應會大量激活，促進腫瘤增殖和生長，因而PKM2可能成為治療腫瘤新的靶標之一[15]。有學者指出，腫瘤細胞的惡性增殖在腫瘤的發生和演進過程中扮演重要角色，而PKM2又可有效調節惡性增殖細胞信號通路[16]。既往有研究結果證實，子宮內膜癌病理分級、手術分期與患者血清中PKM2水平密切相關，其可作為對子宮內膜癌進行輔助診斷的生物標志物之一[17]。此外，有研究結果顯示[18]，子宮內膜癌分期、病變程度與血清中PKM2水平呈正相關關系。

一般情況下，腫瘤細胞周期的異常改變可能與細胞分裂發生故障密切相關，且腫瘤細胞周期異常改變多引起腫瘤細胞增殖不受控制。有研究結果表明，在腫瘤的發生和發展過程中許多細胞周期相關基因均被異常調控，而細胞周期相關基因可作為對腫瘤進行治療的潛在藥物靶點[19]。CDCA5是細胞內十分重要的分裂周期相關蛋白，其可有效促進姐妹染色單體結合，并在姐妹染色單體準確分離的過程中起到關鍵角色，CDCA5還可有效維持基因組的完整性，并調節細胞周期相關轉錄因子和蛋白的活性，促進腫瘤細胞增殖和參與腫瘤細胞的凋亡調控。有研究結果顯示，在肺癌組織中CDCA5水平處于異常高表達狀態，且CDCA5過表達與非小細胞肺癌預后不良密切相關[20]。有研究發現[21]，在DNA 修復中CDCA5起到十分重要的調控作用，且CDCA5過度表達可作為預測患者不良預后的重要因素。既往研究結果顯示，CDCA5表達量升高在早期肝癌組織中呈現明顯的異常升高趨勢，且抑制CDCA5基因可有效降低肝癌細胞活力[22]。此外，CDCA5可作為潛在的治療腫瘤的靶點，并可作為評估和判斷惡性腫瘤診斷與預后的重要生物標志物。

本研究結果顯示，相較于絕經后宮腔積液組患者，子宮內膜癌組患者血中PKM2和CDCA5水平均明顯升高，且不同臨床分期、分化程度、肌層浸潤患者血中PKM2和CDCA5水平存在明顯差異，其中Ⅲ/Ⅳ期患者、低分化程度患者、肌層浸潤>1/2患者血中PKM2和CDCA5水平明顯偏高，采用Logistic回歸模型分析發現，子宮內膜癌患者血中PKM2和CDCA5水平是影響患者臨床分期、分化程度、肌層浸潤的獨立危險因素。分析血中PKM2和CDCA5水平在鑒別診斷子宮內膜癌中的價值結果顯示，PKM2聯合CDCA5鑒別診斷子宮內膜癌的靈敏度、特異度及AUC均明顯高于PKM2或CDCA5的單獨應用，且PKM2聯合CDCA5鑒別診斷的子宮內膜癌的靈敏度、特異度均高于90%，且AUC大于0.9。結果提示通過聯合檢測患者血中PKM2和CDCA5可有效反映患者病變程度，并反映患者臨床分期、分化程度、肌層浸潤等病理特征，并可綜合反映患者體內細胞增殖、凋亡及細胞活躍程度，可從多角度反映患者體內狀態，進而可為鑒別診斷子宮內膜癌提供數據支持。

子宮內膜癌患者血清PKM2和CDCA5水平明顯高于宮腔積液患者，且PKM2和CDCA5聯合應用可明顯提高鑒別診斷子宮內膜癌臨床應用價值。但本研究并未對患者進行長期追蹤研究，有待后續進一步分析患者血中PKM2和CDCA5水平與患者預后質量的關系。