血清MMP-2、VEGF和IL-17在早期非小細胞肺癌診斷價值及相關關系

任寶恒 袁章安 周慶元

肺癌是患病率和病死率均高居首位的惡性腫瘤，其中最常見的為非小細胞肺癌(Non-small cell lung cancer, NSCLC)，其惡性程度高，研究與NSCLC有關的分子指標對患者治療及預后評估具有重要意義[1-2]。腫瘤的浸潤和轉移是腫瘤細胞和宿主細胞間復雜的作用的結果，而細胞黏附是其中重要的環節，其中細胞粘附分子是黏附功能的基礎，血管內皮細胞生長因子(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF)是一種特異性的血管內皮細胞刺激因子，影響NSCLC血管的形成，與有關的受體結合刺激血管內皮細胞的增殖，也可以促進血管內物質的滲出，為腫瘤的發生發展提供基質[3-4]。基質金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinase，MMP)中的MMP-2是機體中主要的Ⅳ型膠原降解酶，在腫瘤的形成過程中起重要作用[5-6]。IL-17是一種前炎性細胞因子，由Th17細胞分泌，具有很強的募集中性粒細胞、促進炎性因子釋放作用，通過與IL-17受體的結合，使下游基因表達細胞因子，且可通過TH17參與細胞免疫，IL-17與腫瘤的發生發展密切相關[7-8]。因此本研究對NSCLC患者血清MMP-2、VEGF、IL-17的水平進行檢測并分析其相關性，具體如下。

資料與方法

一、一般資料

以80例2016年12月-2019年11月就診于我院并確診的NSCLC患者為研究對象，所有患者于手術前均未進行過放、化療。按WHO組織學分類、分期標準，鱗癌46例，腺癌34例，高中分化41例，低分化39例，淋巴結轉移38例，無淋巴結轉移42例；根據TNM分期，Ⅰ～Ⅱ期51例，Ⅲ～Ⅳ期29例。

以上述NSCLC患者為研究組，另選取同期80例健康體檢者為對照組，兩組研究對象性別構成比和年齡比較無統計學差異(P>0.05)(見表1)，具有可比性。患者及家屬均充分了解研究內容并簽署知情同意書，本研究已獲得醫院倫理委員會的準許。

表1 一般資料

二、納入與排除標準

1 納入標準：

(1)通過纖維支氣管鏡活檢、經皮肺針吸活檢及術后經病理組織學等手段檢查后確診為NSCLC；(2)術前未進行過任何肺癌的特異性治療，如放化療、生物治療及靶向藥物治療等；(3)年齡范圍為18～80歲；(4)依從性好，能配合檢測者。

2 排除標準：

(1)進行過NSCLC系統治療者；(2)既往有其他惡性腫瘤病史者；(3)伴有嚴重其他器官功能障礙患者；(4)檢測前攝入高劑量利尿劑者。

三、研究方法

試驗方法：兩組研究對象均于采集前8～12 h內禁食禁水，清晨抽取肘靜脈血5 mL于非抗凝管，待凝固后予4 000 r/min高速離心分離5 min，取上層血清于Eppendorf管中，-80 ℃儲存備用。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定所有樣本的MMP-2、VEGF和IL-17水平，試劑盒均購自eBiosciences公司，嚴格按照說明書進行操作。

四、數據處理

結 果

一、兩組MMP-2、VEGF、IL-17水平比較

本研究對NSCLC患者和健康者血清MMP-2、VEGF及IL-17水平進行檢測比較，結果所示，研究組MMP-2、VEGF、IL-17水平均顯著高于對照組(P<0.05)(見表2)。

表2 兩組MMP-2、VEGF、IL-17水平比較

二、 MMP和VEGF與病理特征的關系

本研究對NSCLC患者不同病理特征(性別、年齡、病理類型、有無淋巴轉移和TNM分期)與MMP-2、VEGF水平的關系進行分析，不同性別和不同年齡階段NSCLC患者血清MMP-2和VEGF水平無明顯差異(P>0.05)，鱗癌和腺癌患者血清VEGF水平無顯著差異(P>0.05)，而鱗癌患者血清MMP-2水平顯著低于腺癌患者(P<0.05)，有淋巴結轉移患者MMP-2、VEGF水平均顯著高于無淋巴結轉移患者(P<0.05)，TNM分期為Ⅰ～Ⅱ患者血清MMP-2、VEGF水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ患者(P<0.05)，高、中分化程度患者血清MMP-2、VEGF水平顯著低于低分化程度患者(P<0.05)(見表3)。

表3 MMP和VEGF與病理特征的關系

三、IL-17與病理特征的關系

本研究對NSCLC患者不同病理特征(性別、年齡、病理類型、有無淋巴轉移和TNM分期)與血清IL-17水平的關系進行分析，不同性別、不同年齡階段和病理類型NSCLC患者血清IL-17水平無明顯差異(P>0.05)，有淋巴結轉移患者IL-17水平顯著高于無淋巴結轉移患者(P<0.05)，TNM分期為Ⅰ～Ⅱ患者血清IL-17水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ患者(P<0.05)，高、中分化程度患者血清IL-17水平顯著低于低分化程度患者(P<0.05)(見表4)。

表4 IL-17與病理特征的關系

四、MMP-2、VEGF與IL-17相關性

經Pearson相關性分析，NSCLC患者血清MMP-2和IL-17呈正相關關系(r=0.618,P<0.05)，VEGF與IL-17呈顯著正相關關系(r=0.548,P<0.05)。

討 論

非小細胞肺癌(NSCLC)是一種臨床常見的肺部惡性腫瘤，占所有肺癌的75%～80%，有很高的發病率和病死率，且近年來呈升高趨勢，嚴重影響患者生命安全。但是NSCLC早期發病隱匿、臨床體征不明顯，對及時有效的開展臨床治療有很大的影響，因此及早的診斷對降低NSCLC病死率至關重要[9]。目前的診斷方法主要有影像學、組織病理、臨床癥狀檢查等，但由于多數患者的早期臨床癥狀不明顯，臨床癥狀和影像學檢查對于微小病灶等的檢出效果較一般，病理學檢查為診斷金標準，但有一定創傷性，在早期診斷中具有局限性[10]。因此尋找NSCLC診斷的腫瘤標志物為目前的臨床研究的熱點。本研究對NSCLC患者和健康者血清MMP-2、VEGF及IL-17水平進行檢測比較，結果顯示研究組MMP-2、VEGF、IL-17水平均顯著高于對照組(P<0.05)，即NSCLC患者血清MMP-2、VEGF、IL-17水平顯著升高。

研究表明，MMP-2與NSCLC的浸潤和轉移密切相關，MMP-2由腫瘤細胞和間質細胞分泌，參與降解Ⅳ型膠原、纖維黏連蛋白等胞外基質成分[11-12]。NSCLC腫瘤細胞的持續性生長和轉移均有新生血管的形成，VEGF是腫瘤新生血管形成因素中最有效的促血管形成因子，可促進血管內皮細胞增殖，使血管通透性增加，使血管內皮細胞外基質降解，進而為血管生長及延伸提供基礎[13]。腫瘤進展和轉移均伴隨著VEGF的異常，VEGF在NSCLC患者血清和組織中呈高表達狀態[14]，與本研究結果一致。本研究進一步對NSCLC患者不同病理特征(性別、年齡、病理類型、有無淋巴轉移和TNM分期)與MMP-2、VEGF水平的關系進行分析，結果顯示，不同性別和不同年齡階段NSCLC患者血清MMP-2和VEGF水平無明顯差異(P>0.05)，鱗癌和腺癌患者血清VEGF水平無顯著差異(P>0.05)，而鱗癌患者血清MMP-2水平顯著低于腺癌患者(P<0.05)，有淋巴結轉移患者MMP-2、VEGF水平均顯著高于無淋巴結轉移患者(P<0.05)，TNM分期為Ⅰ～Ⅱ患者血清MMP-2、VEGF水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ患者(P<0.05)，高、中分化程度患者血清MMP-2、VEGF水平顯著低于低分化程度患者(P<0.05)。

IL-17與炎性反應和免疫活動有密切關系，有學者認為IL-17可能通過趨炎反應促進局部腫瘤的血管生成及侵襲轉移，IL-17也可誘導IL-6活化Stat3通路，使抗凋亡、促血管生成等基因的表達上調，促腫瘤發生發展[15]。本研究對NSCLC患者不同病理特征與血清IL-17水平的關系進行分析，結果表明不同性別、不同年齡階段和病理類型NSCLC患者血清IL-17水平無明顯差異(P>0.05)，有淋巴結轉移患者IL-17水平顯著高于無淋巴結轉移患者(P<0.05)，TNM分期為Ⅰ～Ⅱ患者血清IL-17水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ患者(P<0.05)，高、中分化程度患者血清IL-17水平顯著低于低分化程度患者(P<0.05)。經Pearson相關性分析，NSCLC患者血清MMP-2和VEGF均與IL-17呈顯著正相關關系(r=0.618、0.548, P均<0.05)。表明NSCLC患者的發病過程中MMP-2和VEGF均與IL-17具有顯著正協同作用，從而可能對該癌癥發病機制及治療靶標關聯網絡的深入探究具有重要意義。

綜上所述，NSCLC患者血清MMP-2、VEGF、IL-17的水平顯著升高，且MMP-2和VEGF均與IL-17呈顯著正相關關系，對NSCLC的早期確診和治療有一定的支持作用。