隴中損傷膠囊對老年性骨質疏松性椎體壓縮骨折患者Wnt/β-catenin 信號通路的影響?

葉丙霖，李淑玲，王想福，孫鳳歧，李晨旭，范有福，陳偉國

1 甘肅省中醫藥研究院，甘肅 蘭州 730050；2 甘肅省中醫院

骨質疏松癥是骨的細微組織遭到破壞、骨量及骨強度均減弱的全身性、系統性骨代謝疾病［1］，骨質疏松性椎體壓縮骨折（osteoporotic vertebral compression fracture，OVCFs）是其最常見的并發癥之一，嚴重影響老年人的生活質量。因此，防治骨質疏松及其并發癥已成為當今醫學防控研究的熱點。據研究，Wnt/β-catenin 信號通路是調節細胞生長、分化及死亡的經典信號通路［2］，可影響骨形成及骨平衡［3］。研究發現，βcatenin 蛋白其在成骨細胞完成分化的過程中具有重要作用［4-5］。對于OVCFs 的治療，臨床上除了運用常規經皮椎體后凸成形術（percutaneous kyphoplasty，PKP）治療外，更重要的是要積極抗骨質疏松治療。研究發現，損傷膠囊具有抗骨質疏松的作用，對于緩解OVCFs 患者腰背疼痛及維持或提高骨密度具有一定的作用，但其機制尚不明確［6-8］。筆者將以Wnt/β-catenin 為通路，檢測損傷膠囊治療OVCFs后，患者血清β-catenin蛋白表達水平變化及骨轉換指標β-CTX、T-PINP 在治療前后的變化，觀察其對Wnt/β-catenin 信號通路β-catenin蛋白的調控及對OVCFs的臨床療效。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2018 年9 月至2020 年6 月甘肅省中醫院脊柱微創骨科收治的60 例老年性骨質疏松性椎體壓縮骨折患者，按照隨機數字表法分為觀察組和對照組，每組30例。觀察組中男8例，女22 例；年齡61～88 歲，平均年齡（68.50±5.48）歲；平均病程（6.42±1.23）年。對照組中男11例，女19例；年齡61～88歲，平均年齡（68.77±5.18）歲；平均病程（6.59±2.15）年。兩組患者性別、年齡等臨床資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 西醫診斷標準參照《原發性骨質疏松癥診療指南》［9］擬訂：1）腰背部疼痛，活動受限，骨折節段棘突壓痛及叩擊痛（+）。2）影像學檢查：X 線顯示脊椎后凸畸形、椎體骨皮質變薄，骨小梁稀疏，病變節段椎體呈雙凹形或楔形改變；MRI、CT 確診病變椎體為單個椎體新鮮壓縮性骨折。3）雙能X線檢測骨密度：T≤-2.5［10］。

1.3 中醫辨證標準參照《骨質疏松癥（骨痿）中醫診療方案》《中藥新藥臨床研究指導原則（試行）》［11］及《中醫藥防治原發性骨質疏松癥專家共識（2015）》［12］中的相關標準。

1.4 納入標準納入：1）符合西醫診斷標準及中醫辨證標準者；2）年齡≥60 歲者；3）無藥物過敏史者；4）知情同意并簽署知情同意書者；5）本研究方案經甘肅省中醫院醫學倫理委員會批準。

1.5 排除標準排除：1）其他非骨質疏松疾病造成椎體骨折者；2）其他代謝性疾病所致骨質疏松者；3）有精神病病史或肝、腎功能不全者；4）有嚴重精神疾病，依從性差，不能判斷療效者；5）未按要求隨訪者。

1.6 治療方法

1.6.1 對照組 1）行單側穿刺行經皮椎體后凸成形術治療。患者取俯臥位，使椎體處于拉伸狀態，C 臂透視下定位病椎后進行穿刺點標記、穿刺路線規劃。術區常規消毒鋪巾，利多卡因局部浸潤麻醉。在標記點用穿刺針穿刺，沿椎弓根穿入病椎，穿刺至病椎前中1/3 時拔出針芯，沿穿刺針放置套筒，從工作套筒置入螺旋推進器，鉆一至椎體前緣2～3 mm 的骨隧道，取出螺旋推進器，再沿骨隧道將可擴張球囊置入，然后將造影劑推注至球囊內，透視下觀察椎體恢復高度，可擴張球囊加壓至上下終板或者椎體高度恢復。依次抽出造影劑、取出球囊、調制骨水泥（拉絲期時）緩慢注入，骨水泥達到椎體后緣1/4 時停止推注，透視下觀察骨水泥分布，分布滿意并完全凝固后拔出穿刺裝置。縫合切口，整理器械，觀察生命體征。2）術后予常規抗感染對癥處理，臥床24 h后，鼓勵患者在佩戴腰圍的情況下下床活動。給予患者碳酸鈣D3 顆粒（商品名：朗迪，北京振東康遠制藥有限公司，國藥準字H20090334，規格：500 mg/袋），500 mg/次，口服，每日2次；阿法骨化醇軟膠囊（天津青松華藥醫藥有限公司，國藥準字JYHB1900967，規格：0.5 μg/粒），0.5 μg/次，口服，每日1 次。連續服用12周。

1.6.2 觀察組 在對照組治療的基礎上加服隴中損傷膠囊（甘肅省中醫院骨傷科中藥注冊制劑，甘藥制字Z04000841，生產批號：161045，規格：0.5 g/粒），2.0 g/次，口服，每日3次。3周為1個療程，每個療程結束后間隔1周再服用，總療程為12周。

1.7 觀察指標

1.7.1 VAS 評分、骨密度值 觀察兩組治療前后視覺模擬疼痛評分（visual analogue score，VAS）評分，分值范圍為0～10，分值越高，疼痛越明顯。采用雙能X 線骨密度測量兩組患者股骨骨密度值。正常范圍為+1～-1 mg/cm3。

1.7.2 血清蛋白水平 采用酶聯免疫分析法檢測治療前后血清血清β-鏈蛋白（β-catenin protein，β-catenin）及β-Ⅰ型膠原羧基端肽（βcarboxyterminal propeptide of type I procollagen，β-CTX）、總Ⅰ型膠原氨基端延長肽（total type 1 collagen n-terminal elongation peptide，T-PINP）水平。

1.7.3 不良反應 記錄兩組治療期間不良反應，包括藥物吸收而引起的器官功能損害。

1.8 統計學方法采用SPSS 24.0統計學軟件進行數據分析，計量資料以表示，采用t檢驗，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般情況 所有患者均由同一手術醫師完成手術，手術前后未出現并發癥。術后X 線顯示傷椎高度恢復滿意，脊柱后凸矯形良好。患者術后復查血常規、肝腎功能，未見異常變化。

2.2 VAS 評分及骨密度值VAS評分，兩組治療前比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；治療3 天及12 周時與同組治療前比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；治療3天時，兩組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；治療12周時，觀察組低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。骨密度值，兩組治療前比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；治療3 天時與同組治療前比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；治療12 周時，與同組治療前比較，差異有統計學意義（P＜0.05），且觀察組與對照組比較，差異也有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組治療前后VAS評分及骨密度比較（）

表1 兩組治療前后VAS評分及骨密度比較（）

注：與同組治療前比較，△表示P＜0.05，與對照組治療后比較，▲表示P＜0.05

2.3 血清蛋白水平治療前血清β-catenin、β-CTX 及T-PINP 水平兩組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。治療12 周后，觀察組血清β-catenin水平較治療前明顯增高（P＜0.05），對照組較前無明顯變化（P＞0.05），觀察組高于對照組（P＜0.05）；治療12周后，兩組血清β-CTX表達量均降低，與治療前比較，差異有統計學意義（P＜0.05），兩組間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。血清TPINP表達量，治療前后組內比較及治療第12周組間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 兩組治療前后血清β-catenin、β-CTX及T-PINP水平比較（）

表2 兩組治療前后血清β-catenin、β-CTX及T-PINP水平比較（）

注：與同組治療前比較，△表示P＜0.05，#表示P＞0.05；與對照組治療后比較，▲表示P＜0.05，*表示P＞0.05

3 討論

中醫學將OVCFs 歸屬“骨痿”“骨痹”等范疇。《素問·痹論篇》曰：“骨痹不已，復感于邪，內舍于腎……腎痹者，善脹，民以代踵，脊以代頭。”《素問·上古天真論篇》曰：“女子七歲，腎氣盛……四七，筋骨健……丈夫八歲，腎氣實……八八則齒發去。”《素問·長刺節論篇》曰：“病在骨，骨重不可舉，骨髓酸痛”。說明腎為先天之本，腎主骨生髓，腎精虧虛則骨骼失養，不榮則痛，從而會出現骨骼疼痛、肢體痿軟無力等癥狀。同時，OVCFs 系骨折，定伴有血瘀證候，經脈瘀阻，血脈不暢，骨骼無以濡養，不通則痛。因此OVCFs 的病機多以腎虛為本，血瘀為標。故中醫藥治療OVCFs 多以補肝腎、壯筋骨為主，輔以活血化瘀為治療原則［13］。

相關研究表明，骨質疏松的發病與Wnt 信號通路水平表達低下有密切關系［14］，Wnt 信號通路在骨小梁形成的調控及骨量的調節上可以起到直接作用［15］，Wnt 信號改善骨形成的機制是通過刺激成骨細胞發育，從而起到調節成骨細胞生成、分化及功能的作用［16］。Wnt 信號通路中調控骨代謝最重要分子之一是β-catenin，β-catenin 表達的改變對骨骼中調節成骨形成與破骨形成具有重要影響［17］，當然，β-catenin 的過度表達或完全缺失也會強烈干擾此信號系統［18-20］。因此，Wnt/βcatenin 信號通路在骨質疏松的發病中發揮了重要作用。

損傷膠囊由三七粉、制乳沒、煅自然銅、龍骨、土鱉蟲、麝香等藥物組成［21］。方中制乳沒、三七粉行氣活血；土鱉蟲破血逐瘀、續筋接骨；煅自然銅散瘀止痛、接骨療傷。諸藥合用，共奏接骨療傷、活血化瘀、補腎強骨之功。研究表明，損傷膠囊治療骨質疏松性骨折引起的的腰背酸困、下肢痿軟無力具有較好的療效［6-8］。相關細胞學研究發現，損傷膠囊在防治OVCFs 方面具有重要意義［22］。而相關研究發現，β-catenin 在骨質疏松患者血清中的表達顯著低于骨密度正常的人群［23］。本研究結果表明，經治療后觀察組VAS 評分明顯降低，骨密度值明顯增加，患者疼痛癥狀緩解，觀察組患者血清β-catenin 明顯提高。由此可見，損傷膠囊在抗骨質疏松的治療方面可能與提高β-catenin水平、影響Wnt/β-catenin 信號通路相關。具體機理有待進一步探討。

綜上所述，在對OVCFs 患者行PKP 手術后，在抗骨質疏松治療基礎上聯合使用損傷膠囊，能夠較好地改善患者因骨質疏松引起的臨床疼痛，增高骨密度，并且能影響Wnt/β-catenin 信號通路中β-catenin蛋白和β-CTX的表達量。