苯醚甲環唑和代森錳鋅復配對柑桔炭疽病菌的毒力及防治效果

韋 薇，覃義杰，和立連，何玉清，鄧明學

(1 柳州市惠農化工有限公司，廣西柳州，545616；2 廣西特色作物研究院，廣西桂林，541004)

柑桔炭疽病是柑桔生產上最常見的一種病害之一，主要為害葉、梢和果，也可為害主干、大枝和花，造成葉焦、枝枯、果落、樹皮爆裂及貯藏果實腐爛，影響樹勢和產量，嚴重時整株死亡，造成嚴重的經濟損失[1-2]。柑桔炭疽病的病菌(ColletotrichumgloeosporioidesPenz.)喜高溫高濕環境，生長最適溫度為21～28 ℃ ，具弱寄生性和潛伏侵染特性，即病菌入侵寄主后可處于休眠狀態而不顯癥，當寄主組織活力下降或衰退時表現癥狀。通常以甜橙、椪柑、蕉柑、溫州蜜柑、檸檬、紅桔、年桔等品種發病較重[1，3-4]。目前柑桔炭疽病已經成為世界性分布的真菌性病害，幾乎遍布于高溫多濕的熱帶和亞熱帶柑桔產區，如美國、巴西、阿根廷、西班牙、日本及中國，對柑桔生產影響較大[5-6]。在廣西，發生急性炭疽病嚴重為害的品種和時期如下：(1)金桔，9月下旬至10月上旬采前大量落果；(2)紐荷爾臍橙，采前落果、5月大量枯枝；(3)天草(又名象山紅)雜柑，5月大量枯枝、落果。目前炭疽病的防治主要以化學防治為主。殺菌劑的連續使用，會導致病原菌產生抗藥性從而降低防治效果。同時，農藥在果實中的殘留對人類健康和環境安全構成潛在威脅。據美國加利福尼亞的調查，抑霉唑連續在柑桔上使用5年以后，出現了抗抑霉唑菌株，在柑桔上長期使用苯丙咪唑類殺菌劑，使原本對其不敏感的柑桔炭疽病菌種急劇上升[7]。而農藥混配則具有擴大防治譜、降低成本、提高防治效果及延緩抗藥性產生等特點，因此利用現有農藥進行混配已成為目前農藥開發應用的一個重要方面[8]。苯醚甲環唑(difenoconazole)是三唑類廣譜殺菌劑[9]，在美洲和歐洲廣泛使用[10]，對子囊菌綱、擔子菌綱及某些種傳病原菌有持久的保護和治療作用。其是甾醇脫甲基化抑制劑，具有高效、廣譜、低毒、用量低的特點，內吸性極強，通過抑制麥角甾醇的生物合成，破壞細胞膜結構功能，達到殺菌目的[11]。代森錳鋅(mancozeb)屬低毒的保護性殺菌劑[12]，殺菌范圍廣，不易產生抗性，防治效果明顯優于其他同類殺菌劑。為了明確苯醚甲環唑和代森錳鋅復配對柑桔炭疽病的聯合毒力與最佳配比制劑的田間防治效果，進而為生產上柑桔樹炭疽病的防治提供參考，筆者開展了本試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試靶標：柑桔炭疽病菌采自湖南省園藝研究所柑桔園，由柳州市惠農化工有限公司生測室分離鑒定后保存株菌。

供試藥劑：95%苯醚甲環唑原藥，寧波三江益農化學有限公司生產；90%代森錳鋅原藥，山東濰坊潤豐化工股份科技有限公司生產；10%苯醚甲環唑水分散粒劑，柳州市惠農化工有限公司生產；80%代森錳鋅可濕性粉劑，江蘇龍燈化學有限公司生產；64%苯醚甲環唑·代森錳鋅可濕性粉劑，柳州市惠農化工有限公司生產；丙酮，成都市科隆化學品有限公司；吡咯，廣東翁江化學試劑有限公司；吐溫80，廣東翁江化學試劑有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 室內毒力測定

采用平皿法[13]進行藥劑的毒力測定。用電子天平稱取苯醚甲環唑和代森錳鋅原藥，分別用丙酮和吡咯溶解，用0.1%吐溫80水溶解稀釋，有機溶劑最終含量不超過2%，配比和濃度設置見表1。含藥平板的制備、空白對照的設置、病菌(菌餅)的接種、菌落直徑的調查及菌絲生長抑制率的計算均參考文獻[13]。每藥劑各濃度重復3次，接種后的平板置于(25±1) ℃恒溫培養箱中培養3 d。根據各單劑及各個混配的濃度對數值及對應的菌絲生長抑制率機率值做回歸分析，采用DPS 軟件求回歸方程y=bx+a、計算EC50、EC90及相關系數等。根據孫云沛法[14]計算混劑的共毒系數(CTC)(標準藥劑為苯醚甲環唑)，以此比較增效情況(CTC≥120為增效作用，CTC≤80為拮抗作用，80

表1 供試單劑及混劑的配比和濃度設置

1.2.2 田間防治試驗

1.2.2.1 試驗園條件 廣西：2018年4—6月在廣西靈川縣大境鄉登明村進行，品種為春甜桔，枳砧，樹齡9年生，株行距3.0 m×3.5 m，667 m2栽80株左右，平均株高1.75 m，冠幅1.70 m，果園已封行，樹勢旺盛，所有試驗小區的栽培條件一致。該園柑桔炭疽病發生比較嚴重，年用藥防治6～8次。砂壤土，pH值5.2，有機質含量中等。

重慶：2018年4—5月在中國農業科學院柑桔研究所試驗場進行，品種為沃柑，枳砧。果園平坦，光照條件好，長勢均勻，肥水管理一致，樹齡7～8年，株行距2.5 m×4 m，667 m2栽66株。壤土，pH值6.8，土壤肥力中等。試驗期間未施肥也未進行灌溉。

福建：2018年8—9月在福建省閩清縣梅溪鎮樟洋村進行，供試品種為雪柑，株行距3.0 m×4.0 m，樹勢中等，肥水管理水平中等，土壤肥力中等，歷年柑桔炭疽病發生嚴重，葉、果癥狀明顯。

1.2.2.2 試驗設計 10%苯醚甲環唑水分散粒劑1 000倍液，80%代森錳鋅可濕性粉劑600倍液，64%苯醚甲環唑·代森錳鋅可濕性粉劑(苯醚甲環唑和代森錳鋅1∶7復配)1 500、1 000和500倍液，清水對照，共6個處理。每個處理4次重復(每小區供試樹2株)，24個小區，隨機區組排列。在柑桔新梢抽發期發病前開始進行施藥，間隔10～15 d一次，共施3次。采用“MATABI”超綠16型背負式電動噴霧器噴霧，噴霧器工作壓力3巴(約3個大氣壓)，噴孔口徑1.0 mm，每分鐘噴水量0.5 L，噴霧直徑80～100 μm，噴幅1.0～1.2 m，每株樹噴灑藥液量1.0 kg，全株噴霧均勻。

1.2.2.3 調查方法 于第3次施藥后15 d調查防治效果，并對藥劑的安全性進行觀察。參考《農藥田間藥效試驗準則(二)》第102部分：殺菌劑防治柑桔瘡痂病(GB/T17980.102—2004)，并結合柑桔炭疽病癥狀特點，對柑桔樹炭疽病的發生情況進行分級調查[15]。每小區調查2株樹，每株樹按東、南、西、北、中5點取樣，每點分級調查2個當年生夏梢的全部葉片，2株共查20個梢，統計病情指數和計算防治效果。病害分級：0級：無病；1級：病斑相連面積占整個葉片面積的5%以下；3級：病斑相連面積占整個葉片面積的6%～10%；5級：病斑相連面積占整個葉片面積的11%～25%；7級：病斑相連面積占整個葉片面積的26%～50%；9級：病斑相連面積占整個葉片面積的51%以上。

2 結果與分析

2.1 室內毒力

在離體條件下，苯醚甲環唑和代森錳鋅對柑桔炭疽病菌有較好的室內活性，對菌絲生長的有效抑制中濃度(EC50)分別為0.583 2和1.224 3 mg/L。兩者9種配比的混劑，共毒系數介于98和151之間。其中，苯醚甲環唑∶代森錳鋅=1∶3、1∶1、3∶1、5∶1和7∶1等5種配比的混劑，共毒系數介于80到120之間，表現為相加作用；其余4個配比的混劑，共毒系數均大于120，表現為增效作用，尤其是苯醚甲環唑∶代森錳鋅=1∶7的共毒系數最大，為150.25，此配比選為防治柑桔炭疽病的最佳配比(見表2)。

表2 苯醚甲環唑和代森錳鋅不同配比復配對柑桔炭疽病聯合毒力測定結果

2.2 防治效果

在廣西，64%苯醚甲環唑·代森錳鋅可濕性粉劑427、640和1 280 mg/kg對柑桔炭疽病的防治效果均在92%以上，比較理想，并且相互間及與對照藥劑(10%苯醚甲環唑水分散粒劑100 mg/kg和80%代森錳鋅可濕性粉劑1 333 mg/kg)之間防治效果的差異均無顯著性(見表3)。

在重慶，64%苯醚甲環唑·代森錳鋅可濕性粉劑427～1 280 mg/kg的防治效果在82.92%～88.51%之間，有較好的防治效果，其中，1 280 mg/kg的防治效果優于對照藥劑的防治效果(接近80%)(見表3)。

在福建，64%苯醚甲環唑·代森錳鋅可濕性粉劑427～1 280 mg/kg的防治效果在81.52%～85.23%之間，效果良好，分別與對照藥劑相當(見表3)。

表3 64%苯醚甲環唑·代森錳鋅可濕性粉劑防治柑桔炭疽病田間試驗結果

據觀察，苯醚甲環唑、代森錳鋅單劑及復配劑田間施藥后，均未發現對柑桔樹生長及果實有不良影響，對捕食螨等有益生物也未產生不良影響，表明在柑桔樹上使用安全。同時還發現對柑桔樹脂病有兼治作用。

3 結論與討論

本研究室內毒力測定顯示，苯醚甲環唑與代森錳鋅對柑桔炭疽病菌均具有很高的抑菌活性，EC50值分別僅為0.583 2和1.224 3 mg/L，兩者不同比例復配對柑桔炭疽病菌表現為相加或增效作用，不存在拮抗作用，其中，苯醚甲環唑∶代森錳鋅=1∶7的共毒系數最大，為150.25。本研究中苯醚甲環唑與代森錳鋅復配的聯合作用類型，與朱衛剛等[16]研究結果一致，與胡茂林等[17]部分一致。說明苯醚甲環唑與不同藥劑復配可能出現不同類型的聯合作用。

在室內，苯醚甲環唑和代森錳鋅對柑桔炭疽病菌的抑菌活性都比較高，兩者相比，苯醚甲環唑的毒力指數比代森錳鋅要高出兩倍；但在田間，苯醚甲環唑的防治效果與代森錳鋅差不多。這可能與以下因素相關：一是柑桔炭疽病菌具有主要為害幼嫩枝條和果實而很難侵染老熟枝條的特性；二是試驗園炭疽病情壓力大，試驗主要調查藥劑對新梢的防治效果；三是代森錳鋅田間有效成分用藥量比苯醚甲環唑高很多。

本試驗表明，在田間，代森錳鋅對柑桔炭疽病具有良好的防治效果，最高達95.55%，苯醚甲環唑與代森錳鋅(1∶7)復配對柑桔炭疽病菌的防治效果最低在81%以上、最高達97.62%。苯醚甲環唑與代森錳鋅具有不同的作用機制，兩者復配對柑桔炭疽病菌未表現出拮抗作用，且代森錳鋅的價格遠低于苯醚甲環唑，兩者的復配既能充分利用苯醚甲環唑高抑菌活性和代森錳鋅廣譜性的特點，又能降低田間用藥成本，有利于延緩抗藥性產生，達到有效控制柑桔炭疽病為害的目的。供試濃度對柑桔安全，無藥害，殺菌譜廣，對柑桔樹脂病有兼治作用。兩者復配藥劑在防治柑桔炭疽病上具有較好的應用前景。