名醫夏惠明教授平推法干預慢性腰肌損傷兔模型的研究

楊麗秋 夏惠明 龍鑫 汪昂 岳陽 楊宇 楊陽 楊永蘭

摘要：目的 明確夏教授辨證運用平推法作用于慢性腰肌損傷的兔動物模型后，柔和及滲透是手法的重要因素，為臨床推廣夏教授平推法的辨證學術經驗打下基礎。方法 取日本大耳白兔70只，隨機分為不用手法對照組、作用時間長手法組、作用時間短手法組、頻率快手法組、頻率慢手法組、手下有壓力組、手下無壓力組，每組10只，采用人工固定家兔加桑枝擊打腰部肌肉造模，經過周期治療對比，測定兔血清中免疫功能、血液流變學，處死后腰肌病理切片，觀察鏡下肌肉組織的變化，后進行統計學分析。結果 有壓力且作用時間長的平推法能提高慢性腰肌損傷的免疫力水平（P<0.05）;其余平推法組無顯著性差異（P>0.05）。結論 夏惠明教授平推法能提高慢性腰肌損傷的免疫力水平，改善血流變學，在治療慢性腰肌損傷手法的選擇有較高的臨床應用價值。

關鍵詞：慢性腰肌損傷;推拿療法;免疫功能

中圖分類號：R244.1?? 文獻標志碼：B?? 文章編號：1007-2349（2021）07-0076-04

Research on Professor Xia Huiming's Flat Push Method on Intervention of theRabbit Model of Chronic Lumbar Muscle Injury

YANG Li-qiu， XIA Hui-ming， LONG Xin， WANG Ang， YUE Yang， YANG Yu， YANG Yang， YANG Yong-lan

（Yunnan Hospital of Traditional Chinese Medicine， Kunming 650021， China）

【Abstract】Objective： To make sure that the softness and penetration were important factors of the method after Professor Xia Huiming's flat push method was used to treat the rabbit animal model of chronic lumbar muscle injury and to lay a foundation for the clinical application of Professor Xia's dialectical academic experience of the method. Methods： 70 Japanese white rabbits were randomly divided into non-manipulation control group， long-acting time manipulation group， short-acting time manipulation group， fast frequency manipulation group， slow frequency manipulation group， pressure group and no pressure group， 10 rabbits each group. The artificially fixed rabbits and mulberry sticks were used to hit the waist muscles to create a model. After periodic treatment and comparison， the immune function and hemorheology in the rabbit serum were measured. The rats were sacrificed to make the pathological sections of the psoas muscles and the muscle tissues changes were observed under the microscope and then the statistical analysis was made. Results： The flat push method with pressure and long acting time can raise the immunity level of chronic psoas muscle injury （P<0.05）. There is no significant difference in the other flat push groups （P>0.05）. Conclusion： Professor Xia Huiming's flat push method can raise the immunity level of chronic psoas muscle injury and improve blood rheology and has higher clinical application value in the choice of treatment for chronic psoas muscle injury.

【Key words】Chronic Psoas Muscle Injury; Massage Therapy; Immune Function

慢性腰肌損傷是臨床見疾病，是由于經常的反復的積累性輕微損傷（勞損）可引起肌肉附著點、骨膜、韌帶等組織的充血，水腫滲液纖維組織增生和粘連等病理改變刺激和壓迫神經末稍導致腰部的慢性疾病。在臨床中證實，推拿治療慢性腰肌損傷療效明確有效，它是作為首選的治療方案。本研究慢性腰肌損傷的兔動物模型，改良軟組織損傷兔模型（參照kami，周忠群等機械沖擊挫傷的造模方法用重錘整體打擊重量為2.9 kg，重復擊打目標骨骼肌，造成目標肌急性鈍挫傷）[1-2]以桑枝擊打腰部肌肉造模慢性腰肌損傷模型兔，經過周期治療后，以IgA、IgM、IgE、C反應蛋白、腰肌病理切片為檢測指標，明確夏教授辨證運用平推法作用于慢性腰肌損傷的兔動物模型后，柔和及滲透是手法的重要因素，從分子水平探討平推法治療慢性腰肌損傷的作用機理。

1 材料與方法

1.1 動物 健康成年白兔70只，體重（2.2±0.3）kg，雌雄不限，重量分布均一（由動物云南中醫學院實驗動物中心提供），動物實驗飼養環境：室溫，自然光照，自由飲水，喂養標準飼料料（云南中醫藥大學實驗動物中心提供）。

1.2 實驗試劑 4%多聚甲醛固定液;伊紅染色液;中性樹膠檢測試劑盒（索萊寶公司，生產編號：P1110，G1105，G8590）。檸檬酸鹽緩沖液（中杉金橋，生產編號：ZLI-9065）。IgA、IgM、IgE、C反應蛋白ELISA試劑盒（江蘇酶標生物科技有限公司，生產編號：MB-3935B，MB-3939B，MB-3938B，MB-3837B）。

1.3 實驗分組與造模 改良慢性腰肌損傷白兔模型，將實驗動物分為7組，分別為不用手法對照組、作用時間長手法組、作用時間短手法組、頻率快手法組、頻率慢手法組、手下有壓力組、手下無壓力組每組10只兔。

1.4 造模方法 按照以上分組將白兔稱重編號后，用3%的戊巴比妥鈉1 ml/kg靜脈注射麻醉。白兔俯臥位。背腰部剃毛，人工固定實驗動物，將其脊柱置于平臺上，桑枝擊打腰部肌內。作用于脊柱兩側50次，開放環境下飼養，15 d后形成慢性牧組織損傷模型。標準見參考文獻[2]進行造模并取材，病理切片：肉眼觀組織無腫脹，有少量淤血消失和少量炎性滲出，病理學提示肌纖維斷裂，存在纖維增生，證明肌肉組織有損傷，并且進入了慢性瘢痕增生修復期，說明造模成功。

1.5 實驗方法 作用時間長手法組：平推法操作15 min;作用時間短手法組：平推法操作5 min;頻率快手法組：操作頻率300次/min，操作10 min;頻率慢手法組：操作頻率100次/min，操作10 min;手下有壓力組：操作時壓住皮下有凹陷用力推，操作10 min;手下無壓力組：操作時手輕放皮上輕推，操作10 min。6組均為每天操作1次，手法維作周期10 d。對照組治療方法：不做手法治療，僅給飼料正常喂養。

1.6 取材和指標檢測 血清采集：采空腹靜脈血6 mL注入含EDTA二鈉采血管中，4℃混勻，3000 r/min，離心10 min，分離血漿，分裝于2～3個試管，-2℃保存，測定前將樣本置于室溫中復融，再次4C3000 r/ min，離心5 min，取上清測定。用 1 ∶125 單位抗凝。取肝素抗凝的全血 0.8 mL于全自動血液流變儀上測定全血黏度的高切、中切、低切值，紅細胞壓積。將剩余的全血離心（2500 rpm 離心 10 min，離心分離血清及血漿，-20℃保存備用），取 0.8mL 血漿于全自動血液流變儀上測定血漿黏度;ELISA檢測IgA、IgM、IgE、C反應蛋白相關指標的蛋白表達情況，試劑盒按照說明書操作進行檢測;病理制作取材：將各實驗組白兔分別在治療后 10 d采用空氣栓塞法處死動物，無菌操作下解剖分離腰部肌肉組織，肉眼觀察肌肉形態，生理鹽水清洗后立即投入冷凍的固定液中，4 ℃固定12～24 h后;在0.2 mol磷酸緩沖液中充分漂洗，經常規的脫水、透明、浸蠟、包埋、連續切片、貼片、烤片后，HE染色石蠟切片，蘇木精-伊紅染色，顯微鏡下觀察病理變化。

1.7 統計學方法 應用SPSS25.0統計學軟件進行統計，計量資料用t檢驗，計數資料用卡方檢驗，實驗結果中的數值表示以均數±標準差（x±s）表示，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ELISA檢測結果 見表1。

2.2 病理組織結果 經HE染色后，鏡下可見正常組：可見肌纖維排列緊密、規律，肌纖維膜中肌細胞核相對均勻排列，肌膜較完整，無壞死、出血及炎細胞浸潤。不用手法對照組：可見肌纖維大量斷裂，間寬，萎縮，肌細胞形狀、大小不規則，損傷部位出現新生肌纖維且直徑小，炎細胞浸潤，可見新生毛細血管。作用時間長手法組：可見肌纖維排列紊亂，斷裂，間隙增寬，新生毛細血管，部分炎細胞浸潤。作用時間短手法組：可見肌纖維部分斷裂，排列不規則，少量纖維組織增生。頻率快手法組：可見新生毛細血管、肌纖維，部分斷裂及炎細胞。頻率慢手法組：可見鈣化及少量出血，肌纖維間隔增寬、斷裂，肌纖維及毛細血管增生，炎細胞。手下有壓力組：可見肌纖維斷裂，排列不規則，炎細胞浸潤。手下無壓力組：可見肌纖維斷裂，間隔增寬，出血及毛細血管新生，炎細胞浸潤。見圖1。

2.3 血流動力學指標檢測結果 見表2。

3 討論

慢性腰肌勞屬于中醫“痹癥”“腰痛”“筋傷”等范疇。《素問·宣明五氣篇》說：“久視傷血，久臥傷氣，久坐傷肉，久立傷骨，久行傷筋，是謂五勞所傷。”說明勞逸失常，會導致肉筋骨的損傷。腰部經常的反復的積累性輕微損傷（勞損），使腰部肉筋骨損傷，日久形成慢性腰肌勞損。《醫宗金鑒·正骨心法要旨》中說：“因跌撲閃失……氣血郁滯，為腫為痛，宜用按摩法。按其經絡，以通郁閉之氣，摩其壅聚，以散瘀結之腫，其患可愈。”說明推拿具有舒經通絡，散瘀止痛，可治療慢性腰肌勞損。

手法基本要求有五點，持久、有力、均勻、柔和，以達到深透的目的，夏教授特別強調手法的柔和性，柔和、深透是推拿手法治病的關鍵。夏教授認為柔和是指輕巧之力，并不是指力量弱，通過均勻有節律之操作，將手法技巧與力量完美結合，體現“輕而不浮，重而不滯”的道理，最終達到深透的目的，“柔中帶剛，剛柔相濟”直達病所。夏老師的平推法很講究，操作者腕關節，肘關節，肩關節都應該放松，用身體腰部發力，并不是操作者于患者體表直接施于壓力，壓力不等同于滲透力，如果故意增加壓力，關節就都不會放松，作用力集中于表皮，那么滲透力就很小了。在《素問·調經論》中說：“血氣者，喜溫而惡寒，寒則泣而不能流，溫則消而去之。”夏老師認為平推法的熱量滲透，順應血氣的特性，能使氣血復歸于平衡從而達到治病目的。平推法是夏教授的特色手法，體現了夏教授手法的學術思想。平推法關鍵在于熱量的滲透，而滲透與否，主要在于施術者腕關節及上臂的放松操作[3]。

在本研究中手法治療后，發現作用時間長對C-反應蛋白明顯變化，病理切片提示有新生毛細血管，促進肌肉修復，有壓力治療組對IgA及C-反應蛋白有明顯變化，無壓力更有助于肌肉修復，說明柔和深透是平推法產生療效的重要因素;而頻率的快慢在治療中對免疫功能無明顯差異;手法治療均對血流變都有明顯改善，作用時間長短無明顯區別;頻率快可更快改變血流變學。進一步說明夏教授的平推法對慢性腰肌勞損有治療作用，為臨床推廣運用夏惠明教授平推法提供了客觀的依據。

參考文獻：

[1]Kami K，Masuhara M，Kashiba H，et a1.Changes of vinculin and extracellular matrix components following blunt trauma to rat skeletal muscle[J].Med Sci Spots Exerc，1993，25（4）：832-840.

[2]周忠群，盧振和，高崇榮.射頻熱凝治療兔慢性軟組織損傷的實驗研究[J].中國疼痛醫學雜志.2008，14（5）：298-301.

[3]楊麗秋.夏惠明老師關于腰椎側彎調整三步法的經驗總結[J].云南中醫中藥雜志.2013，9（34）：7-8.

（收稿日期：2021-03-20）

基金項目：云南省內設廳級項目（2017NS147）

第一作者簡介：楊麗秋（1976-），女，副主任醫師，研究方向：中醫推拿。