嬰幼兒米粉類輔食中亞硝酸鹽測定方法的優(yōu)化

同瑞婷，宋 悅，蘭 萌

（陜西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，陜西西安 710048）

0 引言

隨著生活水平的不斷提高，食品安全也引起人們的重視，尤其是嬰幼兒的食品健康問題。米粉及營養(yǎng)面條作為6 個(gè)月以上嬰幼兒的主要輔食之一，主要以谷物、小麥為原料，而亞硝酸鹽又廣泛存在于環(huán)境中，因此谷物小麥在生產(chǎn)加工過程中難免會被污染而帶入亞硝酸鹽，亞硝酸鹽具有較強(qiáng)的致癌性，國標(biāo)GB 2762—2017 中指出嬰幼兒輔食中亞硝酸鹽的限量指標(biāo)為2.0 mg/kg[1]，因此準(zhǔn)確檢測米粉中亞硝酸鹽的含量至關(guān)重要。

國標(biāo)GB 5009.33—2016 中米粉的檢測方法因?yàn)槠淝疤幚頊囟冗^高使米粉中的淀粉糊化，從而導(dǎo)致過濾速度極慢，濾液不澄清。超聲提取具有機(jī)械、空化、熱等物理特性，能夠在不改變物質(zhì)化學(xué)性質(zhì)和結(jié)構(gòu)的前提下利用超聲波的振動(dòng)作用使物質(zhì)里的化學(xué)成分溶解于溶劑中[2]，試驗(yàn)采用室溫超聲提取法替代國標(biāo)中加熱煮沸提取過程，該方法在不使淀粉糊化的前提下，能夠有效地提取亞硝酸鹽，過濾速度快而且濾液澄清，回收率高，從而提高了米粉中亞硝酸鹽的檢測效率和準(zhǔn)確度。該方法相較于酶解法[3-4]縮短了時(shí)間、降低了試驗(yàn)成本。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

電子天平、紫外分光光度計(jì)、水浴鍋和鼓風(fēng)干燥箱。硼砂、亞鐵氰化鉀、乙酸鋅、鹽酸、對氨基苯磺酸、鹽酸萘乙二胺及一級實(shí)驗(yàn)室用水。

1.2 樣品

市售的5 種不同組成成分的米粉，分別用A，B，C，D，E 表示，其主要配料依次為大米、小米、混合果蔬、小麥粉型米粉和脫脂乳粉型米粉。

1.3 試驗(yàn)過程

準(zhǔn)確稱取10.0 g 米粉于250 mL 錐形瓶中，加入飽和硼砂溶液12.5 mL 和60 ℃熱水約150 mL，室溫條件下無加熱超聲振蕩15 min，取出，加入沉淀劑亞鐵氰化鉀和乙酸鋅溶液各5 mL 后轉(zhuǎn)移至200 mL容量瓶中定容至刻度，搖勻靜置30 min 后過濾，棄掉初濾液后濾液備用。測定過程按照GB 5009.33—2016 第二法分光光度法中12.3 進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

按照國標(biāo)GB 5009.33—2016 準(zhǔn)確移取一定量的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)使用液于50 mL 比色管中，加入質(zhì)量濃度為4 g/L 對氨基苯磺酸2 mL，混勻靜置3~5 min后，再各加入2 g/L 的鹽酸萘乙二胺溶液，加水至50 mL 刻度線，混勻后靜置15 min，于波長538 nm處測其吸光度并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時(shí)，做空白試驗(yàn)，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R2=0.999 5，線性良好，符合試驗(yàn)要求。

亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。

2.2 國標(biāo)法和超聲法測定5 種不同種類的米粉中亞硝酸鹽含量

5 種米粉中亞硝酸鹽含量的結(jié)果對比見表1。

表1 5 種米粉中亞硝酸鹽含量的結(jié)果對比/ mg·g-1

由表1 可知，國標(biāo)法測得的結(jié)果偏低，原因可能是淀粉糊化嚴(yán)重會導(dǎo)致亞硝酸鹽不能有效被提取出來，超聲法濾液澄清，能夠有效將亞硝酸鹽提取至濾液中，檢測結(jié)果準(zhǔn)確。

2.3 濾液透光率（T） 和過濾時(shí)間（t）

國標(biāo)法和超聲法所得濾液透光率和過濾時(shí)間比較見表2。

表2 國標(biāo)法和超聲法所得濾液透光率和過濾時(shí)間比較

由表2 可知，國標(biāo)法所需的過濾時(shí)間基本在1 h左右，明顯長于超聲法，說明國標(biāo)法在前處理過程中采用的沸水浴加熱使淀粉糊化嚴(yán)重，導(dǎo)致樣液黏度變大、過濾困難。超聲法得到的濾液透光率明顯高于國標(biāo)法，透光率基本接近于100%，說明物理作用的超聲法沒有破壞淀粉結(jié)構(gòu)，淀粉沒有被糊化，干擾因素少，有利于試驗(yàn)的進(jìn)一步測定。

2.4 加標(biāo)回收試驗(yàn)

分別對 5 種米粉做 10，30，60 μg 的 3 個(gè)水平加標(biāo)試驗(yàn)，每個(gè)水平試驗(yàn)進(jìn)行6 組平行試驗(yàn)測定，最后計(jì)算加標(biāo)回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差值RSD。經(jīng)試驗(yàn)數(shù)據(jù)驗(yàn)證回收率分布在93.5%~100.9%。說明超聲法提取亞硝酸鹽效果好，滿足定量試驗(yàn)測定要求。

5 種米粉三水平的加標(biāo)回收試驗(yàn)見表3。

表3 5 種米粉三水平的加標(biāo)回收試驗(yàn)

3 結(jié)論

針對嬰幼兒米粉類輔食在亞硝酸鹽檢測過程中出現(xiàn)的不易過濾、過濾時(shí)間長、濾液渾濁等問題，通過室溫超聲提取法進(jìn)行前處理提取過程，經(jīng)驗(yàn)證，方法回收率主要分布在93.5%~100.9%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差主要分布在1.35%~2.51%。試驗(yàn)過程操作簡單，能夠在短時(shí)間內(nèi)獲得澄清的濾液，試驗(yàn)成本低、結(jié)果準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性穩(wěn)定，可以滿足嬰幼兒輔食類食品中亞硝酸鹽檢測的質(zhì)控要求。