鹽水法接合柱凝集法應用于ABO疑難血型檢測中臨床價值分析

王品

在輸血之前,對紅細胞ABO 血型進行準確鑒定,是保障患者用血安全的最重要前提。作為輸血相容性檢測最重要環節之一,只有ABO 血型正定型(紅細胞定型)與反定型(血清定型)一致,才能確定ABO 血型［1］。但值得注意的是,采用柱凝集法進行單一ABO血型檢測時,經常出現血型正反定型不一致的情況,尤其是進行疑難血型檢測時,難以獲取良好檢測結果［2］。因此,應積極尋找更合理、有效檢測方法,為臨床提供準確檢測結果,改善患者預后質量。本文選擇本院2018 年1 月～2020 年1 月所收治ABO 疑難血型患者8 例為研究對象,以評估鹽水法接合柱凝集法價值?，F將詳細情況報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2018 年1 月～2020 年1 月所收治ABO 疑難血型患者8 例為研究對象,均為ABO血型檢測正反定型不一致者,并全部對其血液進行對比性試驗檢測。

1.2 設備與試劑 設備：恒溫箱、離心機；試劑：生理鹽水、A、B 細胞試劑、標準抗-A、抗-B 血清(南京華欣藥業生物工程有限公司)；其他：ABO 血液正反定性反應卡、Liss/coombs 結合反應卡(瑞士達美亞公司)。

1.3 方法 獲取ABO 血型正反定型不一致樣本8 例,均予以鹽水法接合柱凝集法：將患者50 μl 的2%紅細胞液與50 μl 抗-A 及抗-B 標準血清進行混合反應,并置于37℃環境內反應15 min。將反應液充分反應結合后,放在Liss/coombs 卡上置于37℃恒溫箱內反應15 min,離心處理10 min,判斷結果。另外,將50 μl 血漿與ABO 試劑A、B 細胞液50 μl 進行反應,并將其反應液轉移至Liss/coombs 卡,置于37℃恒溫箱內反應15 min,離心處理10 min,觀察結果。最后,對不同稀釋濃度抗-A 及抗-B 標準血清進行檢測。

1.4 觀察指標 比較三種檢測方法抗原減弱或抗體減低結果、血清連續倍比稀釋結果。

2 結果

2.1 三種檢測方法抗原減弱或抗體減低結果比較8 例樣本均確證為ABO 抗原減弱或抗體減低,經混合法測定,完全符合血型鑒定結果,且鹽水法與柱凝集法檢測結果存在明顯差異。見表1。

表1 三種方法檢測抗原減弱或抗體減低結果比較

2.2 三種檢測方法血清連續倍比稀釋結果比較 在稀釋至64 倍時,三種檢測結果出現較大差異,混合法檢測靈敏度明顯高于鹽水法和柱凝集法。見表2。

表2 三種檢測方法血清連續倍比稀釋結果比較

3 討論

精確進行血型鑒定、確保輸血安全,一直是臨床工作的重中之重,對保護患者生命安全、提升患者臨床表現均具有積極意義。但值得注意的是,在進行血型測定過程中,通過單一方法檢測會經常出現正反定型不一致的疑難血型,可在一定程度提升輸血風險,甚至是威脅患者生命健康［3,4］。因此,應積極尋找更高效、結合式檢測方法,既可以準確判斷血型,又不會加重患者負擔。在臨床上,雖ABO 血型檢測方法眾多,例如,鹽水法、柱凝集法,但是,單一檢測方法均無法獲取理想檢測效果。相關研究指出［5,6］,柱凝集法僅可實現單一檢測目的,柱凝集法的血型反應卡與交叉配血反應卡多只能實現各自單一目的,缺乏聯合與拓展應用能力,不論是進行方式改變或完善,仍存在一定比例正反定型不一致比例。另外,柱凝集法是利用紅細胞抗原和相應抗體結合,經離心處理后,凝集紅細胞懸浮在凝膠表面或中層呈陽性反應,但未與抗體結合的紅細胞則沉淀于凝膠底部呈陰性反應［7-10］。相關研究指出［11］,柱凝集法雖在免疫球蛋白G(IgG)抗體檢測方面具有肯定價值,但是在對ABO 血型檢測方面,則與鹽水試管法檢測無明顯差異。而在進行單一鹽水法檢測時,將陰性反應液結合到Liss/Coombs 卡上進行抗球蛋白試驗,可顯示陰性反應。說明采用單一柱凝集法對ABO 血型測定具有一定靈敏度,但無法確定抗原減弱或抗體減低患者ABO 血型。相關研究指出［12,13］,在進行ABO 疑難血型進行檢測過程中,出現正反定型不一致主要是與血液中抗原和抗體減弱有關。本組研究結果顯示,8 例樣本均確證為ABO 抗原減弱或抗體減低,經混合法測定,完全符合血型鑒定結果,且與兩種單一方法存在明顯差異。說明混合法在抗原和抗體減弱時均可完全進行血型鑒定,具有較高應用價值。

本研究所采用混合法是一種拓展性的檢驗方式,通過將鹽水法反應陽性反應液接合至Liss/Coombs 卡上進行抗球蛋白試驗,可顯著提升檢測敏感性［14,15］。本組研究結果顯示,在稀釋至64 倍時,三種檢測結果出現較大差異,混合法檢測靈敏度明顯高于鹽水法和柱凝集法。提示混合法靈敏度高且效率更高。

綜上所述,鹽水法接合柱凝集法對抗原減弱或抗體減低ABO 疑難血型患者進行血型鑒定,效果理想且靈敏度高,值得推廣應用。但值得注意的是,本次研究所收集樣本數量偏少,所得出結論可能與真實情況有所差異,應在加大樣本后作進一步研究討論。