生活飲用水微生物檢驗方式及評價標準研究

李愛英

（泰安市泰山景區疾病控制中心，山東 泰安 271000）

0 引言

目前社會廣泛關注的民生問題之一為生活飲水衛生問題。水是人體不可缺少的物質之一，水可發揮持續細胞形態、加速機體廢物排泄、調節組織細胞液等作用。隨著飲水和飲食，把水中的各種元素通過消化道吸收入人體的各個器官。而被污染的水體含有農藥、多氯聯苯、多環芳烴、汞、鉻、鉛、砷、放射性元素、致病細菌等有害物質，它們被確認對健康不利，具有致癌、致畸、致突變作用或有毒性[1-2]。這些物質可以通過飲用水和食物鏈等途徑進入人體，并在人體積累，造成危害。本文對生活飲用水微生物檢驗方法與評價標準進行全面分析，現總結如下。

1 生活飲用水微生物檢驗的基本概述

在生活飲用水中，“微生物檢驗”在使用過程中，檢驗對象主要是飲用水中的微生物種類和含量，即將檢測數據與國家飲用水衛生標準化要求相比對，由此就飲用水是否符合飲用標準作出精準判斷。飲用水作為人體新陳代謝不可或缺的重要物質之一，具有促進血液循環、加速新陳代謝、快速排泄體內廢物以及調節組織細胞液等功能，但隨著工業化建設進程的不斷推進，飲用水供水區域環境的日益惡劣化在滋生各種病菌的同時，致病病原體進入人體的概率在明顯增加，長此以往在危害人體生命安全的同時也不利于國家可持續發展目標的實現，為此將“微生物檢驗”方式合理化運用于生活飲用水衛生檢測中，對促進國民健康發展具有重要意義[3-4]。

2 生活飲用水微生物檢驗資料和方法剖析

2.1 一般資料。在生活飲用水微生物檢驗時，為保證檢驗數據的精準化，檢驗機構工作人員需將選取的生活飲用水樣本進行等分操作，后在嚴格遵照實驗室相關操作標準化要求下，先后通過不同的微生物檢驗方式對樣本進行全面檢測。檢驗工作結束后，工作人員需以《生活飲用水標準檢驗方法水樣采集與保存》中的相關數據為參照，系統化剖析和評價檢驗結果[5]。

2.2 檢驗方式

（1）濾膜法：作為微生物檢驗中一種常用方式，濾膜法主要用以檢驗水源中總大腸菌群，為確保檢驗工作的規范化開展，在正式檢驗前工作人員需準備好如下檢驗儀器，即——載玻片、錐形瓶、濾器、顯微鏡、0.45μm孔徑濾膜、試管、冰箱、天平、刻度吸管、抽濾設備、鑷子、平皿、恒溫培養箱。經調查當前濾膜法在檢驗時，為保證檢驗工作的高效化開展，檢驗工作人員需做好如下工作，即分別為水樣滅菌、水樣過濾和水樣培養。在水樣滅菌中，常用的兩種滅菌方式主要是濾器滅菌、濾膜滅菌，具體來講前者主要是指將濾膜放置到燒杯后加入蒸餾水，之后進行煮沸操作，并在煮沸三次后進行滅菌處理，需注意的是通常來講兩次煮沸之后檢驗工作人員需進行換水操作，并在嚴格控制滅菌時長（15 min）的同時使用試劑清理燒杯內的殘留物，至于濾器滅菌，則具體是指點燃酒精棉球火焰滅菌作業；在水樣過濾中，過濾操作流程主要是“用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣處—將濾膜粗糙面朝上貼到滅菌濾床—固定濾器—加入100 mL水樣本—打開濾器閥門—在-0.5大氣壓下進行抽濾”；在水樣培養時，檢驗工作人員需明確在完成水樣過濾后到取下濾器前，工作人員需先抽氣五秒后再管好閥門取下濾器，之后通過用無菌鑷子夾取滅菌濾膜邊緣處置于品紅亞硫酸鈉培養基上，需注意的是此時朝上的面是還存留細菌的面，且需要保證濾膜與培養基的完美切合，最后將倒置的培養皿放在37℃恒溫培養箱中進行培養（24±2）h[6-7]。

（2）多管發酵法：除濾膜法外，在生活飲用水細菌含量檢測過程中，常用的微生物檢驗方式還包括多管發酵法，通常來講這種方式則主要用于總大腸菌群的測定。在正式檢驗前工作人員需準備好如下檢驗儀器，即—刻度吸管、錐形瓶、顯微鏡、平皿、載玻片、天平、小導管、中試管、恒溫培養箱[8-9]。

就目前來看在進行檢驗時，為保證檢驗結果的精準度和數據的準確性，檢驗工作人員需嚴格按照實驗室相關操作標準化要求，由此為后期相關部門的戰略調整提供了重要參考。在實施多管發酵法時，檢驗工作人員需嚴格按照如下操作流程，即：取10 mL水樣加入10 mL雙料乳糖蛋白胨培養液中，將1 mL水樣分別置于10 mL單料乳糖蛋白胨培養液和9 mL無菌生理鹽水（保證兩者混合的均勻性）中，混勻后吸取1 mL（相當于0.1 mL水樣）加入10 mL單料乳糖蛋白胨培養液中，并接種處理不同稀釋度；在進行檢驗時，通常來講稀釋程度需根據檢驗樣本的污染度進行適當調整，即通常來講對于<1 mL的水樣本，為保證檢驗數據的準確性，工作人員需保證稀釋工作的規范化開展，即通過給予10倍稀釋，而后隨機選擇1 mL進行接種；接種完成后，將接種結束后的樣本置于恒溫培養箱中培養24 h后取出，再依據試管有無出現產氣產酸現象就大腸菌群陰性和陽性做出判斷，即若無產氣產酸現象則表示大腸菌群為陰性，反之為陽性；對于檢測出大腸菌群為陽性的試管，在后續操作時工作人員需將其放置在伊紅美藍瓊脂板上進行轉種，待轉種工作結束后將其放在37℃恒溫培養箱中進行培養，并實時觀察菌落形態；將紫黑色合并金屬光澤或無金屬關澤與淡紫紅色，中心部位顏色較深的菌落進行染色，并通過鏡檢進行證實；染色完畢后，若證實為革蘭氏陰性無芽孢桿菌，則需要置入乳糖蛋白胨中進行培養，隨后將接種管置于恒溫培養箱中進行培養，培養過后若出現產酸產氣的現象，則表明大腸桿菌群為陽性[10-11]。

2.3 評定標準。在研究過程中，工作人員需系統化記錄檢驗數據（飲用水中大腸桿菌、雜菌、耐熱大腸菌群與大腸埃希菌等微生物的檢出率），并以《生活飲用水標準檢驗方法》、《生活飲用水衛生標準》為依據，對生活飲用水衛生狀況作出合理化判斷。

2.4 統計學分析。本次研究數據分析的工具為SPSS 20.0統計軟件包，計量資料以“（±s）”表示，展開t檢驗；計數資料以“%”表示，行χ2檢驗；若兩組對比差異有統計學意義，則表現為P<0.05。

3 結果分析

通過表1分析可知，在檢驗過程中，觀察組采用多管發酵法檢驗，其中20例為雜菌檢，檢出率占總量的80%；22例為大腸桿菌，檢出率占總量的88%；23 例為大腸埃希菌，檢出率占總量的92%；21例為耐熱大腸桿菌，檢出率占總量的84%。

表1 兩組水樣微生物檢出率比對表[n（%）]

在對照組中采用濾膜法檢驗，其中18例為雜菌檢，檢出率占總量的72%；19例為大腸桿菌，檢出率占總量的76%；17例為大腸埃希菌，檢出率占總量的68%；16例為耐熱大腸菌群，檢測率占總量的64%。通過分析可知對照組中微生物檢出量少于觀察組，比較后兩組差異具有統計學意義（P<0.05）。

綜合而言，經濟快速化發展在改善人們物質生活水平的同時，飲用水衛生不達標現象的普遍化，在增加各種疾病發病率的同時也不利于區域穩定性格局的構建，嚴重阻礙了國家的可持續發展。作為民生問題中的重點關注對象，近年來飲用水衛生也受到了各界的高度關注，提高水資源質量和安全性逐漸成為了推動區域可持續發展，保障周邊民眾生命財產安全的重要保障，為此將“微生物檢驗”方式合理化應用于飲用水衛生檢測中現已迫在眉睫。