不同產地、采收期、種植條件對覆盆子有效成分含量的影響研究

付彩群，黃道明，鄭露盼，張曉云，毛坤軍，周燕霞

1.上饒市食品藥品檢驗檢測中心，江西 上饒 334000；2.九江市食品藥品檢驗所，江西 九江 332000；3.江西醫學高等專科學校，江西 上饒 334099

覆盆子為薔薇科植物華東覆盆子Rubus chingiiHu 的干燥果實，收載于2020 年版《中國藥典》，別名掌葉覆盆子。夏初果實由綠變綠黃時采收，除去梗、葉，置沸水中略燙或略蒸，取出，干燥。其性味甘、酸、溫，具有益腎固精縮、養肝明目之功效，主要用于遺精滑精、遺尿尿頻、目暗昏花［1］。目前，國內外對覆盆子的研究主要集中在資源調查、偽品鑒別、成分分離、質量控制及藥理作用等方面［2-11］，未見對不同產地、采收期、種植條件下的成分差異研究。研究表明，中藥藥材質量的好壞既與藥材本身品種來源、遺傳變異相關，也受氣候土壤、光照水分等地理因素影響，還與生產產地、采收加工等因素相關［12-19］。本研究按照《中國藥典》2015 年版一部規定，對不同產地、采收期和種植條件的覆盆子中鞣花酸、山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量進行研究，為覆盆子藥材的采收加工以及資源開發利用提供依據。

1 材料與方法

1.1 儀器

Waters 2695 高效液相色譜儀；Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 色譜柱；sartorius BS-124S 電子天平；電熱恒溫水浴鍋。

1.2 試劑

鞣花酸對照品（批號為111959-201602，含量以89.3%計，購自中國藥品生物制品檢定所），山柰酚-3-0-蕓香糖苷（批號為112007-201602，含量以 90.8% 計，購自中國藥品生物制品檢定所）。所用試劑均為分析純，實驗用水均為去離子水。

1.3 藥材

不同采摘期、不同種植條件的覆盆子均為2018年至2020 年在江西德興覆盆子種植基地采摘，其他產地的覆盆子藥材購買于各市場，經上饒市食品藥品檢驗檢測中心黃道明副主任藥師鑒定為薔薇科植物華東覆盆子Rubus chingiiHu 的干燥果實。具體產地及批次見表1。

表1 覆盆子藥材產地及批號

2 方法與結果

2.1 標準品溶液的制備

2.1.1 鞣花酸標準品溶液的制備 取鞣花酸對照品11.50 mg，精密稱定，至50 mL 容量瓶中，加70%甲醇溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密吸取1 mL 溶液至50 mL 容量瓶中，加70%甲醇溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.1.2 山柰酚-3-0-蕓香糖苷標準品溶液的制備 取山柰酚-3-O-蕓香糖苷對照品9.63 mg，精密稱定，至100 mL容量瓶中，加甲醇溶解，稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.2 供試品溶液的制備

按照《中國藥典》（2015 年版）一部覆盆子品種項下鞣花酸、山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量測定方法的樣品制備方法制備樣品。

2.3 色譜條件與系統適用性試驗

2.3.1 鞣花酸 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.2%磷酸溶液（15∶85）為流動相；檢測波長為254 nm。理論板數按鞣花酸峰計算應不低于3 000。色譜圖見圖1。

圖1 HPLC色譜圖：A鞣花酸對照品，B覆盆子供試品

2.3.2 山柰酚-3-0-蕓香糖苷 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.2%磷酸溶液（15∶85）為流動相；檢測波長為344 nm。理論板數按山柰酚-3-O-蕓香糖苷峰計算應不低于3 000。色譜圖見圖2。

圖2 HPLC色譜圖：A.山柰酚-3-0-蕓香糖苷對照品，B.覆盆子供試品

2.4 含量測定結果

2.4.1 不同產地的含量測定結果 按照上述HPLC 含量測定方法，對不同產地覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷進行含量測定，結果見表2。

表2 不同產地之間的含量結果

2.4.2 不同采收期的含量測定結果 按照上述HPLC含量測定方法，對不同采收期覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷進行含量測定，結果見表3。

表3 不同采收期的含量結果

2.4.3 不同種植條件的含量測定結果 按照上述HPLC含量測定方法，對不同種植條件覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷進行含量測定，結果見表4。

表4 不同種植條件的含量結果

3 討論

3.1 不同產地對有效成分的影響

從表2 可以看出，不同產地的覆盆子中鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量差異較大，浙江產的鞣花酸含量均高于江西產，表明產地對藥材質量有顯著影響。

3.2 不同采收期對有效成分的影響

從表3 可以看出，覆盆子青果的鞣花酸含量和山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量均比黃果更高，說明不同采收期的藥材質量也有差異，故應盡量控制覆盆子采收時間，避免覆盆子因成熟而含量下降。

3.3 不同種植條件對有效成分的影響

從表4 可以看出，不同種植條件下覆盆子中有效成分含量差異不大，但背陽的覆盆子中鞣花酸含量均高于向陽，而向陽條件下的山柰酚-3-0-蕓香糖苷含量會更高。這可能是因為光照能促進果實中糖分的積累，從而使酸性物質減少。

4 小結

藥材質量的優劣除與藥材品種、品質密切相關外，其有效成分在體內的形成和積累與產地、種植條件以及采收期等均相關。本研究參照《中國藥典》中覆盆子的質量控制方法，對不同產地、采收期、種植條件下覆盆子有效成分鞣花酸和山柰酚-3-0-蕓香糖苷的含量進行測定，初步闡明了不同產地、采收期、種植條件下有效成分的含量差異，為覆盆子臨床藥用的選擇，推動覆盆子的種植規范化、產業化和質量評價提供科學依據，為覆盆子資源的進一步開發利用奠定了基礎。