細(xì)菌性腹瀉患兒糞便標(biāo)本病原微生物分布情況及耐藥性分析

黃英英

撫州市臨川區(qū)人民醫(yī)院，江西 撫州 344000

細(xì)菌性腹瀉疾病作為一種臨床上常見的消化系統(tǒng)疾病，高發(fā)于1～12 周歲的兒童群體［1］。由于兒童群體的消化系統(tǒng)及神經(jīng)調(diào)節(jié)機(jī)能仍然處于發(fā)育不完善、不健全的狀態(tài)，如果受到一定程度的刺激，則極易產(chǎn)生細(xì)菌性腹瀉情況［2］。如果細(xì)菌性腹瀉癥狀未得到及時(shí)且有效的治療，則可能持續(xù)加重病情，對(duì)患兒的生長發(fā)育及生命安全產(chǎn)生極大的威脅［3］。目前，應(yīng)用抗菌藥物是一種有效的治療方式，但因抗菌藥物濫用，病原菌的耐藥性持續(xù)提高，進(jìn)而影響藥物治療的臨床效果［4］。因此，研究分析細(xì)菌性腹瀉患兒糞便標(biāo)本病原微生物分布情況及耐藥性成為改善臨床治療效果的關(guān)鍵［5］。本研究分析了細(xì)菌性腹瀉患兒糞便標(biāo)本病原微生物分布情況及耐藥性，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年1 月至2020 年1 月?lián)嶂菔信R川區(qū)人民醫(yī)院收治的84 例細(xì)菌性腹瀉患兒，其中男42例，女42 例；年齡（6.5±1.0）歲，年齡范圍1～12歲。參與本次研究檢驗(yàn)人員6 名，男2 名，女4 名；年齡（37.0±1.2）歲，年齡范圍24～50 歲；檢驗(yàn)工作年限（14.5±1.1）年，年限范圍5～24 年；受教育程度為：2 例大專，4 例本科，過程中人員均無變動(dòng)，且在培訓(xùn)考核中的成績均合格。上述患者及檢驗(yàn)人員的一般資料具有可比性（P＞0.05），且本研究符合醫(yī)學(xué)倫理原則要求。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)［6］

（1）全部患兒均符合臨床上對(duì)細(xì)菌性腹瀉癥狀的診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）臨床資料完整；（3）年齡范圍1～12 周歲；（4）患兒近親屬均知情且同意參與本次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)［7］：（1）存在心、肝、腎等重要器官疾病者；（2）由其他原因引發(fā)的腹瀉患兒；（3）存在全身性感染性疾病者；（4）存在意識(shí)、精神障礙者；（5）中途退出者。

1.3 方法

1.3.1 病原菌培養(yǎng)及鑒定 在患兒入院后第二天凌晨采集其新鮮糞便，將樣本送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)室則直接利用涂片染色鏡檢的方式，分別接種麥康凱培養(yǎng)基、SS 培養(yǎng)基，將其放入35 ℃的恒溫箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，其培養(yǎng)時(shí)長為：24～48 h，如有需要?jiǎng)t可以對(duì)哥倫比亞血培養(yǎng)基進(jìn)行轉(zhuǎn)種，觀察培養(yǎng)基病原菌的具體生長情況，并將具體情況詳細(xì)記錄，同時(shí)應(yīng)用生化反應(yīng)檢驗(yàn)存在的可疑菌落，隨后應(yīng)用血清凝集試驗(yàn)、生化反應(yīng)兩種方式對(duì)病原菌實(shí)施歸納分類。

1.3.2 儀器和試劑 細(xì)菌鑒定儀（生產(chǎn)廠家：法國梅里埃生物公司，型號(hào)：HX-21），藥敏紙片（生產(chǎn)廠家：英國Oxoid 公司）。隨后運(yùn)用ESBLs 法應(yīng)用頭孢噻肟/克拉維酸、頭孢他啶/克拉維酸紙片對(duì)病原菌進(jìn)行有效檢測(cè)，其中陽性標(biāo)準(zhǔn)為：抑菌圈增大值超過5 mm。而應(yīng)用苯唑西林紙片對(duì)耐甲氧西林葡萄球菌進(jìn)行檢測(cè)［8］。

1.3.3 質(zhì)控菌株 由衛(wèi)健委臨床檢驗(yàn)中心提供菌株，其中主要包括：大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603 和腸球菌ATCC29212 以及金黃色葡萄球菌ATCC25923 等多種類型菌株，最后結(jié)果判讀則嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)的紙片擴(kuò)散法實(shí)施［9-10］。

1.3.4 觀察指標(biāo)（1）觀察細(xì)菌性腹瀉病原菌的分布特點(diǎn)。其中包括：革蘭陰性桿菌（G-）、革蘭陽性球菌（G+）等病原菌類型。其中G-包括金黃色葡萄球菌，而G+則包括沙門菌屬、致病大腸埃希菌、志賀菌屬和弧菌屬菌種和氣單胞菌和鄰單胞菌等菌種。（2）G-、G+對(duì)抗生素的耐藥性檢測(cè)情況。藥物敏感性判定標(biāo)準(zhǔn)一般遵循美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)制定標(biāo)準(zhǔn)，將其分為：敏感（S）、中介（I）和耐藥（R）三個(gè)等級(jí)。其中耐藥率為中介率與耐藥率之和［11-12］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其中計(jì)數(shù)資料采用例（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用表示，行t檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病原菌的分布情況

本研究中84 例患者中檢出118 株病原菌，其中G-類菌株為90 株（76.3%），而G+類菌株為28株（23.7%），見表1。

表1 糞便標(biāo)本病原微生物分布情況（）

表1 糞便標(biāo)本病原微生物分布情況（）

2.2 G-的抗菌藥物耐藥性

沙門菌屬、致病大腸埃希菌和志賀菌屬均對(duì)頭孢曲松、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥物的耐藥性較低，抗菌耐藥性均未超過20%，見表2。

表2 G-的抗菌藥敏性［例（%）］

2.3 G+的抗菌藥物耐藥性

金黃色葡萄球菌對(duì)阿奇霉素、利奈唑胺和苯唑西林等抗菌藥物的耐藥性較低，未超過25.0%，而金黃色葡萄球菌對(duì)萬古霉素、莫西沙星的耐藥性均為0%，見表3。

表3 G+（金黃色葡萄球菌）的抗生素耐藥性

3 討論

細(xì)菌性腹瀉作為一種常發(fā)生于兒科的消化系統(tǒng)疾病，抗菌藥物治療已成為目前治療該疾病的有效且簡單治療方式，其具有顯著效果［13］。但由于細(xì)菌性腹瀉癥狀具有發(fā)病急的特點(diǎn)，糞便培養(yǎng)出病原菌且開展藥敏試驗(yàn)的整個(gè)過程需耗用7 d，因此，細(xì)菌性腹瀉患兒在臨床治療過程中普遍應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)性抗菌藥物［14-15］。因此，每隔一段時(shí)間應(yīng)該研究分析且通報(bào)細(xì)菌性腹瀉疾病的具體病原菌構(gòu)成及耐藥性情況，為提高臨床治療效果提供重要的參考依據(jù)［16-17］。

大量實(shí)踐研究和臨床資料表明，革蘭陰性桿菌是引發(fā)兒童細(xì)菌性腹瀉癥狀的最主要病原菌，并且其耐藥率隨著臨床抗菌藥物的應(yīng)用持續(xù)增加。因此，有效預(yù)防感染、合理應(yīng)用抗菌藥物成為臨床治療兒童細(xì)菌性腹瀉癥狀的關(guān)鍵［18-19］。因此，在實(shí)施抗菌藥物治療前應(yīng)該對(duì)患者樣本進(jìn)行病原微生物分布情況及耐藥性分析，依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果分析可以為臨床醫(yī)生在治療期間選用合理的抗菌藥物，制定落實(shí)有效且準(zhǔn)確的抗感染治療方式提供重要的參考依據(jù)，從而實(shí)現(xiàn)有效控制、改善細(xì)菌性腹瀉癥狀的目的［20-21］。

由本研究結(jié)果顯示，84 例患者中檢出118 株病原菌，其中G-類菌株為90 株（76.3%），而G+類菌株為28 株（23.7%），說明患兒糞便病原微生物分為G-類菌株與G+類菌株兩類，而G-類菌株是引發(fā)兒童細(xì)菌性腹瀉癥狀的最主要病原菌。其中以金黃色葡萄球菌為代表的G+類菌株在糞便病原微生物檢驗(yàn)結(jié)果中占有較小的比例。G-類菌株作為主要的病原菌種類，沙門菌屬、致病大腸埃希菌、志賀菌屬、弧菌屬菌種、氣單胞菌和鄰單胞菌的占有率 分 別 為25.4%、22.0%、16.9%、8.5% 和3.5%，為隨后分析菌株耐藥性提供重要的基礎(chǔ)資料。而對(duì)于耐藥性方面而言，檢驗(yàn)過程中應(yīng)該嚴(yán)格依據(jù)國家抗菌藥物管理?xiàng)l例實(shí)施病原微生物的耐藥性分析，在臨床抗菌藥物治療過程中應(yīng)該優(yōu)先選取耐藥性低于30%的抗菌藥物，隨后可以將上述抗菌藥物種類進(jìn)行總結(jié)和記錄，并將形成的病原譜作為經(jīng)驗(yàn)性抗菌藥物應(yīng)用，且定期發(fā)布［22］。如檢測(cè)結(jié)果顯示，抗菌藥物對(duì)上述病原菌中的某一種菌株具有高于50%的耐藥率，則應(yīng)該在經(jīng)驗(yàn)性抗菌藥物范圍內(nèi)排除此藥物。而對(duì)于具有30%～50%耐藥性的抗菌藥物而言，則應(yīng)該依據(jù)患者體質(zhì)、病原菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇具有針對(duì)性的抗菌藥物［23］。研究結(jié)果顯示，沙門菌屬、致病大腸埃希菌和志賀菌屬均對(duì)頭孢曲松、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥物的耐藥性較低，抗菌耐藥性均未超過20%，且金黃色葡萄球菌對(duì)阿奇霉素、利奈唑胺和苯唑西林等抗菌藥物的耐藥性較低，未超過25.0%，而金黃色葡萄球菌對(duì)萬古霉素、莫西沙星的耐藥性均為0，說明應(yīng)用上述耐藥性低于30%的抗菌藥物對(duì)細(xì)菌性腹瀉患兒進(jìn)行治療可以明顯提高細(xì)菌性腹瀉患兒治療的有效性。值得注意的是，在選取耐藥性低的抗菌藥物時(shí)，還應(yīng)依據(jù)患兒的不良反應(yīng)耐受性選取更適宜機(jī)體的藥物，同時(shí)盡可能選擇安全性較高的頭孢類藥物［24］。

綜上所述，革蘭陰性菌為兒童細(xì)菌性腹瀉癥狀的主要病原菌，臨床治療過程中可以依據(jù)耐藥性試驗(yàn)結(jié)果選擇有效的抗菌藥物，持續(xù)增強(qiáng)臨床治療效果的同時(shí)降低耐藥菌發(fā)生可能性，進(jìn)而有效改善患兒的預(yù)后情況，促進(jìn)患兒的康復(fù)。