細菌性腹瀉患兒糞便標本病原微生物分布情況及耐藥性分析

黃英英

撫州市臨川區人民醫院，江西 撫州 344000

細菌性腹瀉疾病作為一種臨床上常見的消化系統疾病，高發于1～12 周歲的兒童群體［1］。由于兒童群體的消化系統及神經調節機能仍然處于發育不完善、不健全的狀態，如果受到一定程度的刺激，則極易產生細菌性腹瀉情況［2］。如果細菌性腹瀉癥狀未得到及時且有效的治療，則可能持續加重病情，對患兒的生長發育及生命安全產生極大的威脅［3］。目前，應用抗菌藥物是一種有效的治療方式，但因抗菌藥物濫用，病原菌的耐藥性持續提高，進而影響藥物治療的臨床效果［4］。因此，研究分析細菌性腹瀉患兒糞便標本病原微生物分布情況及耐藥性成為改善臨床治療效果的關鍵［5］。本研究分析了細菌性腹瀉患兒糞便標本病原微生物分布情況及耐藥性，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年1 月至2020 年1 月撫州市臨川區人民醫院收治的84 例細菌性腹瀉患兒，其中男42例，女42 例；年齡（6.5±1.0）歲，年齡范圍1～12歲。參與本次研究檢驗人員6 名，男2 名，女4 名；年齡（37.0±1.2）歲，年齡范圍24～50 歲；檢驗工作年限（14.5±1.1）年，年限范圍5～24 年；受教育程度為：2 例大專，4 例本科，過程中人員均無變動，且在培訓考核中的成績均合格。上述患者及檢驗人員的一般資料具有可比性（P＞0.05），且本研究符合醫學倫理原則要求。

1.2 納入標準［6］

（1）全部患兒均符合臨床上對細菌性腹瀉癥狀的診斷標準；（2）臨床資料完整；（3）年齡范圍1～12 周歲；（4）患兒近親屬均知情且同意參與本次研究。排除標準［7］：（1）存在心、肝、腎等重要器官疾病者；（2）由其他原因引發的腹瀉患兒；（3）存在全身性感染性疾病者；（4）存在意識、精神障礙者；（5）中途退出者。

1.3 方法

1.3.1 病原菌培養及鑒定 在患兒入院后第二天凌晨采集其新鮮糞便，將樣本送至實驗室進行檢測，實驗室則直接利用涂片染色鏡檢的方式，分別接種麥康凱培養基、SS 培養基，將其放入35 ℃的恒溫箱內進行培養，其培養時長為：24～48 h，如有需要則可以對哥倫比亞血培養基進行轉種，觀察培養基病原菌的具體生長情況，并將具體情況詳細記錄，同時應用生化反應檢驗存在的可疑菌落，隨后應用血清凝集試驗、生化反應兩種方式對病原菌實施歸納分類。

1.3.2 儀器和試劑 細菌鑒定儀（生產廠家：法國梅里埃生物公司，型號：HX-21），藥敏紙片（生產廠家：英國Oxoid 公司）。隨后運用ESBLs 法應用頭孢噻肟/克拉維酸、頭孢他啶/克拉維酸紙片對病原菌進行有效檢測，其中陽性標準為：抑菌圈增大值超過5 mm。而應用苯唑西林紙片對耐甲氧西林葡萄球菌進行檢測［8］。

1.3.3 質控菌株 由衛健委臨床檢驗中心提供菌株，其中主要包括：大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603 和腸球菌ATCC29212 以及金黃色葡萄球菌ATCC25923 等多種類型菌株，最后結果判讀則嚴格按照標準的紙片擴散法實施［9-10］。

1.3.4 觀察指標（1）觀察細菌性腹瀉病原菌的分布特點。其中包括：革蘭陰性桿菌（G-）、革蘭陽性球菌（G+）等病原菌類型。其中G-包括金黃色葡萄球菌，而G+則包括沙門菌屬、致病大腸埃希菌、志賀菌屬和弧菌屬菌種和氣單胞菌和鄰單胞菌等菌種。（2）G-、G+對抗生素的耐藥性檢測情況。藥物敏感性判定標準一般遵循美國臨床實驗室標準委員會制定標準，將其分為：敏感（S）、中介（I）和耐藥（R）三個等級。其中耐藥率為中介率與耐藥率之和［11-12］。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0 進行統計，其中計數資料采用例（%）表示，行χ2檢驗，計量資料采用表示，行t檢驗，P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病原菌的分布情況

本研究中84 例患者中檢出118 株病原菌，其中G-類菌株為90 株（76.3%），而G+類菌株為28株（23.7%），見表1。

表1 糞便標本病原微生物分布情況（）

表1 糞便標本病原微生物分布情況（）

2.2 G-的抗菌藥物耐藥性

沙門菌屬、致病大腸埃希菌和志賀菌屬均對頭孢曲松、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥物的耐藥性較低，抗菌耐藥性均未超過20%，見表2。

表2 G-的抗菌藥敏性［例（%）］

2.3 G+的抗菌藥物耐藥性

金黃色葡萄球菌對阿奇霉素、利奈唑胺和苯唑西林等抗菌藥物的耐藥性較低，未超過25.0%，而金黃色葡萄球菌對萬古霉素、莫西沙星的耐藥性均為0%，見表3。

表3 G+（金黃色葡萄球菌）的抗生素耐藥性

3 討論

細菌性腹瀉作為一種常發生于兒科的消化系統疾病，抗菌藥物治療已成為目前治療該疾病的有效且簡單治療方式，其具有顯著效果［13］。但由于細菌性腹瀉癥狀具有發病急的特點，糞便培養出病原菌且開展藥敏試驗的整個過程需耗用7 d，因此，細菌性腹瀉患兒在臨床治療過程中普遍應用經驗性抗菌藥物［14-15］。因此，每隔一段時間應該研究分析且通報細菌性腹瀉疾病的具體病原菌構成及耐藥性情況，為提高臨床治療效果提供重要的參考依據［16-17］。

大量實踐研究和臨床資料表明，革蘭陰性桿菌是引發兒童細菌性腹瀉癥狀的最主要病原菌，并且其耐藥率隨著臨床抗菌藥物的應用持續增加。因此，有效預防感染、合理應用抗菌藥物成為臨床治療兒童細菌性腹瀉癥狀的關鍵［18-19］。因此，在實施抗菌藥物治療前應該對患者樣本進行病原微生物分布情況及耐藥性分析，依據試驗結果分析可以為臨床醫生在治療期間選用合理的抗菌藥物，制定落實有效且準確的抗感染治療方式提供重要的參考依據，從而實現有效控制、改善細菌性腹瀉癥狀的目的［20-21］。

由本研究結果顯示，84 例患者中檢出118 株病原菌，其中G-類菌株為90 株（76.3%），而G+類菌株為28 株（23.7%），說明患兒糞便病原微生物分為G-類菌株與G+類菌株兩類，而G-類菌株是引發兒童細菌性腹瀉癥狀的最主要病原菌。其中以金黃色葡萄球菌為代表的G+類菌株在糞便病原微生物檢驗結果中占有較小的比例。G-類菌株作為主要的病原菌種類，沙門菌屬、致病大腸埃希菌、志賀菌屬、弧菌屬菌種、氣單胞菌和鄰單胞菌的占有率 分 別 為25.4%、22.0%、16.9%、8.5% 和3.5%，為隨后分析菌株耐藥性提供重要的基礎資料。而對于耐藥性方面而言，檢驗過程中應該嚴格依據國家抗菌藥物管理條例實施病原微生物的耐藥性分析，在臨床抗菌藥物治療過程中應該優先選取耐藥性低于30%的抗菌藥物，隨后可以將上述抗菌藥物種類進行總結和記錄，并將形成的病原譜作為經驗性抗菌藥物應用，且定期發布［22］。如檢測結果顯示，抗菌藥物對上述病原菌中的某一種菌株具有高于50%的耐藥率，則應該在經驗性抗菌藥物范圍內排除此藥物。而對于具有30%～50%耐藥性的抗菌藥物而言，則應該依據患者體質、病原菌的藥敏試驗結果選擇具有針對性的抗菌藥物［23］。研究結果顯示，沙門菌屬、致病大腸埃希菌和志賀菌屬均對頭孢曲松、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦等抗菌藥物的耐藥性較低，抗菌耐藥性均未超過20%，且金黃色葡萄球菌對阿奇霉素、利奈唑胺和苯唑西林等抗菌藥物的耐藥性較低，未超過25.0%，而金黃色葡萄球菌對萬古霉素、莫西沙星的耐藥性均為0，說明應用上述耐藥性低于30%的抗菌藥物對細菌性腹瀉患兒進行治療可以明顯提高細菌性腹瀉患兒治療的有效性。值得注意的是，在選取耐藥性低的抗菌藥物時，還應依據患兒的不良反應耐受性選取更適宜機體的藥物，同時盡可能選擇安全性較高的頭孢類藥物［24］。

綜上所述，革蘭陰性菌為兒童細菌性腹瀉癥狀的主要病原菌，臨床治療過程中可以依據耐藥性試驗結果選擇有效的抗菌藥物，持續增強臨床治療效果的同時降低耐藥菌發生可能性，進而有效改善患兒的預后情況，促進患兒的康復。