探討乙型肝炎性原發(fā)性肝癌患者乙肝病毒DNA載量與免疫功能的相關(guān)性分析

侯娟，葉峰山，邱素娟，宋育明

廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建廈門 361000

原發(fā)性肝癌為臨床常見惡性腫瘤之一，對中老年人生命安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅[1]。該疾病具有較高惡性程度，發(fā)病早期便可血行轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與肝內(nèi)轉(zhuǎn)移。該疾病出現(xiàn)的主要原因?yàn)楦鞣N原因造成的肝硬化，隨著病情發(fā)展，最終成為原發(fā)性肝癌[2-3]。我國具有較高乙型肝炎發(fā)病率，因其發(fā)病較為隱秘，導(dǎo)致對其重視度不高，最終極易發(fā)展成為原發(fā)性肝癌[4]。原發(fā)性肝癌發(fā)病過程中免疫具有重要作用，腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)免疫抑制，上調(diào)treg，產(chǎn)生腫瘤的免疫逃逸，造成預(yù)后不良。近年來已有研究顯示，原發(fā)性肝癌患者預(yù)后中，乙肝病毒DNA載量具有重要影響，例如會延遲術(shù)后康復(fù)[7]。除此之外，乙肝病毒DNA載量還可能將乙型肝炎患者的細(xì)胞功能紊亂程度加重。由此可推測，乙肝病毒DNA載量可能通過對乙型肝炎性原發(fā)性肝癌患者免疫功能低下進(jìn)行誘導(dǎo)，進(jìn)而對腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、生長進(jìn)行促進(jìn)，最終出現(xiàn)不良預(yù)后[8]。鑒于此，該研究主要針對免疫功能、乙肝病毒DNA載量之間的相關(guān)性進(jìn)行分析，將2015年7月—2018年9月在該院接受治療的160例乙型肝炎性原發(fā)性肝癌患者視為研究對象，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取在該院接受治療的160例乙型肝炎性原發(fā)性肝癌患者視為研究對象，歸為甲組，納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者知情同意，并經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)；②經(jīng)病理確診為原發(fā)性肝癌。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并肝膽系統(tǒng)其他重大病變者；②合并免疫功能不全者；③入組前行分子生物、手術(shù)以及化療等特殊治療者；④入組3個月內(nèi)采用免疫調(diào)節(jié)劑進(jìn)行治療者；⑤存在嚴(yán)重全身感染或局部感染者；⑥合并嚴(yán)重肺腦心腎等重要臟器功能損傷者；⑦肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)者；⑧合并其他惡性腫瘤者。患者年齡35～69歲，平均（53.19±2.08）歲；男108例，女52例；合并高血壓、高血脂、糖尿病的患者分別有8例、16例、4例。再選取同時期該院160名健康體檢者為研究對象，歸為乙組，年齡36～70歲，平均（53.06±2.02）歲；男96名，女64名；合并高血壓、高血脂、糖尿病的患者分別有10例、20例、6例。兩組資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

采用流式細(xì)胞儀對兩組研究對象T細(xì)胞亞群進(jìn)行測定，測定指標(biāo)包括CD8+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+；兩組研究對象乙肝病毒DNA載量均采用熒光定量PCR法測定；與此同時，測定兩組研究對象相關(guān)腫瘤直徑與TNM分期。

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩組研究對象CD8+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+測定值差異，分析乙肝病毒DNA載量與CD8+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+之間的相關(guān)性；同時對比不同腫瘤TNM分期患者的乙肝病毒DNA載量。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料用（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組免疫功能指標(biāo)比較

與乙組比較，甲組CD8+細(xì)胞含量更高，CD4+細(xì)胞含量、CD4+/CD8+更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組免疫功能指標(biāo)比較(±s)

表1 兩組免疫功能指標(biāo)比較(±s)

組別CD4+細(xì)胞（%）CD8+細(xì)胞（%） CD4+/CD8+甲組（n=160）乙組（n=160）t值P值28.15±6.15 42.96±4.19 25.174＜0.001 31.09±7.11 25.48±9.59 5.944＜0.001 0.91±0.86 1.69±0.44 10.213＜0.001

2.2 乙肝病毒DNA載量與免疫功能相關(guān)性分析

患者乙肝病毒DNA載量平均測定值為（5.84±1.42）×103IU/mL，與CD8+細(xì)胞呈正相關(guān)性，與CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+呈負(fù)相關(guān)性（P＜0.05），見表2。

表2 乙肝病毒DNA載量與免疫功能相關(guān)性分析

2.3 甲組不同TNM分期患者乙肝病毒DNA載量分析

甲組160例患者中，TNM分期為Ⅱ期、Ⅲ期的患者分別有76例、84例，Ⅲ期患者乙肝病毒DNA載量明顯高于Ⅱ期患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 甲組不同TNM分期患者乙肝病毒DNA載量分析[(±s)，×103 IU/mL]

表3 甲組不同TNM分期患者乙肝病毒DNA載量分析[(±s)，×103 IU/mL]

腫瘤TNM分期乙肝病毒DNA載量Ⅱ期（n=76）Ⅲ期（n=84）t值P值5.42±0.28 6.19±0.68 9.190＜0.001

3 討論

原發(fā)性肝癌對患者生命安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅，通常是在感染乙肝病毒后，引發(fā)肝炎，長期慢性肝炎引發(fā)肝硬化，最終進(jìn)展為肝癌[9-10]。近年來的臨床研究顯示，乙肝病毒DNA載量會明顯影響原發(fā)性肝癌患者的術(shù)后康復(fù)效果，同時還和疾病進(jìn)展、TNM分期存在相關(guān)性[11-12]。鑒于此，為了對乙型肝炎性原發(fā)性肝癌病情進(jìn)展過程中乙肝病毒DNA載量影響的作用機(jī)制進(jìn)行探究，該研究Pearson相關(guān)性分析顯示，乙肝病毒DNA載量，與CD8+細(xì)胞呈正相關(guān)性，與CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+呈負(fù)相關(guān)性（P＜0.05）；隨著腫瘤TNM分期提高，乙肝病毒DNA載量也明顯提高（P＜0.05），提示乙型肝炎性原發(fā)性肝癌患者乙肝病毒DNA載量與免疫功能、腫瘤TNM分期之間存在一定相關(guān)性。乙型肝炎病原體為乙型肝炎病毒，此病毒歸為嗜肝DNA病毒科，包括兩個屬，即禽嗜肝DNA病毒屬與正嗜肝DNA病毒屬，其中正嗜肝DNA病毒屬是導(dǎo)致人體感染乙型肝炎病毒的重要原因[13-14]。現(xiàn)階段，乙型肝炎已經(jīng)發(fā)展成為一個世界性公共衛(wèi)生問題，雖然乙肝疫苗能在一定程度上控制病情，但該疾病的發(fā)病率依舊居高不下，乙型肝炎是引發(fā)原發(fā)性肝癌的重要原因。通常情況下，乙型肝炎病毒不會直接損傷肝細(xì)胞，主要經(jīng)肝表面乙型肝炎病毒進(jìn)行免疫應(yīng)答，進(jìn)而使得肝臟長時期處于慢性炎癥狀態(tài)。臨床用來判斷乙肝病毒活躍性與復(fù)制性的金標(biāo)準(zhǔn)為乙肝病毒DNA載量，現(xiàn)階段，臨床主要將其用來對乙肝病毒傳染程度與數(shù)量進(jìn)行判斷。CD4+T細(xì)胞屬于輔助性T細(xì)胞，主要分泌細(xì)胞因子，進(jìn)而對機(jī)體抗腫瘤反應(yīng)進(jìn)行調(diào)節(jié)，CD8+T細(xì)胞則屬于抑制性T細(xì)胞，同樣為機(jī)體內(nèi)部細(xì)胞毒性效應(yīng)T細(xì)胞。一般而言，機(jī)體通過對外周血中CD4+/CD8+比值相對平衡進(jìn)行調(diào)節(jié)來維持機(jī)體的正常免疫功能。該研究中，甲組CD8+細(xì)胞含量為（31.09±7.11）%，高于乙組，CD4+細(xì)胞含量、CD4+/CD8+分別為（28.15±6.15）%、（0.91±0.86），低于甲組（P＜0.05），提示乙型肝炎性原發(fā)性肝癌患者機(jī)體免疫功能低下，細(xì)胞免疫處于失衡狀態(tài)。相關(guān)學(xué)者的研究也顯示，HCC組CD8+細(xì)胞含量為（25.45±4.17）%，高于對照組，CD4+細(xì)胞含量、CD4+/CD8+分別為（28.05±6.21）%、（0.97±0.35），低于對照組（P＜0.05），這與該研究結(jié)果具有高度一致性[14]。究其原因，這可能是因?yàn)橐倚透窝仔栽l(fā)性肝癌發(fā)生發(fā)展過程中，有大量免疫抑制因子產(chǎn)生。一方面，免疫抑制因子可通過干擾效應(yīng)T淋巴細(xì)胞進(jìn)而發(fā)揮作用，降低外周血中CD4+細(xì)胞含量，提高CD8+細(xì)胞含量，進(jìn)而損傷T淋巴細(xì)胞免疫功能。另一方面，免疫抑制因子可將T淋巴細(xì)胞活性廣泛性殺傷，再加上受到腫瘤抗原刺激，會激活T淋巴細(xì)胞免疫抑制細(xì)胞前體，使得免疫抑制因子大量分泌，并形成一種惡性循環(huán)，進(jìn)而對細(xì)胞免疫功能進(jìn)行抑制。乙肝病毒DNA載量，與CD8+細(xì)胞呈正相關(guān)性，與CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+呈負(fù)相關(guān)性，提示乙肝病毒數(shù)量越多，CD8+細(xì)胞含量越高，CD4+細(xì)胞含量、CD4+/CD8+越低。因此，乙肝病毒DNA載量與免疫功能低下之間存在一定相關(guān)性。

綜上所述，乙型肝炎性原發(fā)性肝癌患者乙肝病毒DNA載量與免疫功能、腫瘤TNM分期之間存在一定相關(guān)性。