222株兒童血培養(yǎng)分離菌的臨床分布特點及藥敏結(jié)果分析

朱德永,袁 雕,陸興熱

云南省文山壯族苗族自治州人民醫(yī)院檢驗科，云南文山 663099

血流感染(BSI)是病原微生物入侵血液而導(dǎo)致的感染，是一種嚴重的全身感染性疾病，以兒童和老年人多見，且病死率高，為20%～60%[1]。有研究結(jié)果顯示，兒童和新生兒BSI的年發(fā)生率為70/10萬例，病死率高達20%[2]。兒童BSI病情進展迅速，早期合理有效的治療，可改善患兒轉(zhuǎn)歸。血培養(yǎng)報告時間較長，臨床醫(yī)生在得到細菌鑒定及藥敏報告前，需根據(jù)當(dāng)?shù)亓餍胁W(xué)特征使用抗菌藥物對患兒進行經(jīng)驗性治療。本文通過回顧性分析本院2018年1月1日至2020年9月30日出生1 d至13周歲兒童血培養(yǎng)分離的陽性菌株臨床分布特點及藥敏結(jié)果，為指導(dǎo)臨床合理用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1菌株來源 選擇本院2018年1月1日至2020年9月30日出生1 d至13周歲兒童血培養(yǎng)分離的222 株菌株為研究標本。納入標準:出生1 d至13周歲;有感染相關(guān)的臨床表現(xiàn)；血培養(yǎng)有明確的病原菌生長。

1.2儀器與試劑 Bact/Alert3D型全自動血培養(yǎng)儀和配套血培養(yǎng)瓶、Vitke2 Compact全自動細菌鑒定及藥敏系統(tǒng)；血平板、巧克力平板、MH平板、沙保羅平板、GN卡、GN334卡、GP卡、GP67卡、GP68卡、YST卡、血培養(yǎng)瓶、ATBTM FUNGUS3，以上儀器及試劑生產(chǎn)廠家均為梅里埃(上海)生物制品有限公司；藥敏紙片(購自杭州天和生物有限公司)；質(zhì)控菌株：金黃色葡萄球菌ATCC29213、鉛黃腸球菌ATCC700327、銅綠假單胞菌ATCC27853、產(chǎn)酸克雷伯菌ATCC700324。

1.3實驗方法 無菌操作抽取疑似BSI兒童靜脈血1～3 mL 注入血培養(yǎng)瓶中，立即送檢驗科微生物室置于Bact/Alert3D型全自動血培養(yǎng)儀37 ℃培養(yǎng)，血培養(yǎng)儀定時檢測血培養(yǎng)瓶中二氧化碳濃度，繪制生長曲線，并判斷有無細菌生長;儀器報告陽性時，取出報陽瓶，用無菌注射器取少量培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種血平板和巧克力平板分離病原菌，標本采集送檢和藥敏試驗均參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第4版)[3]要求進行,采用Vitke2 Compact全自動細菌鑒定及藥敏系統(tǒng)進行細菌鑒定及藥敏試驗。必要時采用紙片擴散法在MH培養(yǎng)基上對藥敏結(jié)果進行復(fù)核，藥敏試驗結(jié)果參照美國臨床和實驗室標準協(xié)會指南進行判讀[4]。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件及Whonet5.6軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料以頻數(shù)或率(%)表示。

2 結(jié) 果

2.1222株菌株患者的性別及年齡分布情況 222株菌株對應(yīng)的患者中男134例(60.36%),女88例(39.64%)；年齡以出生1 d至3歲(78.38%，174株)和4～6歲(10.36%，23株)為主,7～9歲占5.41%(12株)，10～13歲占5.86%(13株)。

2.2222株菌株患者科室分布情況 222株菌株中檢出最高的科室為新生兒科(34.23%)，其次為兒一科(24.48%)、兒二科(22.52%)。見表1。

表1 222株菌株患者科室分布情況

2.3222株菌株菌種分布情況 222株菌株檢出最高的為凝固酶陰性葡萄球菌(27.03%)，其次為大腸埃希菌(18.47%)、金黃色葡萄球菌14.86%)。見表2。

表2 222株菌株菌種分布情況

2.4葡萄球菌對常用抗菌藥物的耐藥率 耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌(MRCNS)檢出率為51.67%(31/60)，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)檢出率為27.27%(9/33)。凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素、苯唑西林、頭孢唑林、紅霉素、克林霉素耐藥率較高。金黃色葡萄球菌對青霉素的耐藥率為96.97%；未檢出對萬古霉素耐藥革蘭陽性球菌菌株。見表3。

表3 葡萄球菌對常用抗菌藥物的耐藥率(%)

2.5主要革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率 產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)大腸埃希菌檢出率為39.02%(16/41)，產(chǎn)ESBLs 肺炎克雷伯菌檢出率為54.55%(6/11)。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌對氨芐西林、頭孢唑林、哌拉西林、頭孢噻肟的耐藥率較高；沙門菌對第3、4代頭孢、喹諾酮類耐藥率均較低。見表4。

表4 主要革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率(%)

3 討 論

血培養(yǎng)陽性為臨床BSL病原學(xué)診斷的“金標準”，其藥敏結(jié)果也是有效治療BSL的重要依據(jù)，對存在疑似感染癥狀的兒童均應(yīng)進行血培養(yǎng)。參照相關(guān)專家共識，可疑感染患者出現(xiàn)以下任一指征時，可考慮采集血培養(yǎng)，包括產(chǎn)婦胎膜早破，產(chǎn)褥期腹膜炎，疑似絨毛膜羊膜炎，患兒體溫不穩(wěn)定，心率、呼吸加快，精神萎靡，糖不耐受，喂養(yǎng)不耐受，白細胞計數(shù)升高或降低，C反應(yīng)蛋白水平升高，血小板計數(shù)降低，降鈣素原水平升高等[5]。本研究結(jié)果顯示，本院222株菌株對應(yīng)的患者中出生1 d至3歲兒童占78.38%，低于楊延龍等[6]報道的89.25%，高于曹慧軍等[7]報道的69.23%。低齡兒童占比較高可能與收治的多為低齡出生患兒，本身免疫功能低下易感有關(guān)。引起本院兒童BSI前5位細菌為凝固酶陰性葡萄球菌(27.03%)、大腸埃希菌(18.47%)、金黃色葡萄球菌(14.86%)、肺炎鏈球菌(8.56%)、沙門菌屬(7.66%)。李斌等[8]研究表明，昆明地區(qū)兒童BSI感染細菌譜前5位為凝固酶陰性葡萄球菌(42.8%)、大腸埃希菌(14.4%)、金黃色葡萄球菌(5.4%)、肺炎克雷伯菌(5.3%)、沙門菌(4.6%),說明引起各地區(qū)兒童BSI的病原菌菌譜及其耐藥情況有差異性。

本研究結(jié)果顯示,本院兒童BSI以革蘭陽性球菌為主，占62.16%,低于國內(nèi)部分地區(qū)，如鄭州(72.80%)[9]、南寧(67.1%)[10]等報道。MRCNS為皮膚正常寄生菌，屬于條件致病菌，臨床送檢污染率較高，微生物室人員應(yīng)及時與臨床醫(yī)生溝通，全面了解患者臨床癥狀及病情發(fā)展，以便準確判斷該菌是否為致病菌，本研究MRCNS 的檢出率為51.67%。MRSA檢出率為 27.27%，與呂春蘭等[11]報道的27.60%相似。未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素耐藥的革蘭陽性球菌。

81株革蘭陰性菌中，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、沙門菌最為常見，其中產(chǎn)ESBLs的肺炎克雷伯菌占54.55%，產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌占39.02%。肺炎克雷伯菌對氨芐西林耐藥率>80.00%；大腸埃希菌對氨芐西林、哌拉西林耐藥率均>80.00%。對于較嚴重的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌感染可以考慮使用亞胺培南或美羅培南治療，同時,應(yīng)嚴格限制應(yīng)用此類抗菌藥物，避免耐碳青酶類抗菌藥物菌株的出現(xiàn)。沙門菌屬17 株，沙門菌屬對氨芐西林、哌拉西林耐藥率均在50.00%以上，臨床可以考慮兒童用藥安全的前提下使用。

本次報道中，檢出產(chǎn)單核李斯特菌2株(0.90%)。李斯特菌通常對青霉素、氨芐西林、美羅培南和復(fù)方磺胺甲噁唑敏感。復(fù)方磺胺甲噁唑不宜用于孕婦及新生兒，建議臨床使用青霉素、氨芐西林和美羅培南抗感染治療[12]。本次報道檢出近平滑假絲酵母菌1株(0.45%)，對于感染的新生兒，主要是拔除中心靜脈置管和系統(tǒng)的抗菌治療[13]。對于患有播散性念珠菌病的新生兒，推薦兩性霉素B每日1 mg/kg。血培養(yǎng)持續(xù)陽性者應(yīng)當(dāng)進行泌尿生殖道、肝臟、脾臟CT或超聲檢查。對于無明顯轉(zhuǎn)移并發(fā)癥的患者，建議治療時間持續(xù)到血培養(yǎng)轉(zhuǎn)為陰性且無相應(yīng)體征后2周[14]。

綜上所述，引起本院兒童BSI前5位細菌為凝固酶陰性葡萄球菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、沙門菌屬。本院兒童BSI病原菌分布廣，各菌株對抗菌藥物的耐藥率各有不同。臨床及微生物室應(yīng)進行及時有效溝通，盡早明確病原菌及藥敏結(jié)果，合理使用抗菌藥物。加強醫(yī)院感染防控措施，做好細菌耐藥性監(jiān)測，規(guī)范治療，避免耐藥的進一步加重。