1例膠體硒法HIV快速檢測試劑“漏檢”案例分析

李 霞，孫婷彥，周宗良，周宗俞

重慶市永川區疾病預防控制中心，重慶永川 402160

隨著時代的發展和科學技術的進步，艾滋病病毒抗體篩查技術日臻完善，如快速檢測法、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法、化學發光(CIA)法等?？焖贆z測法由于操作簡單、出結果所需時間短，且不需要特殊儀器等優勢被我國疾病預防控制中心和醫療機構廣泛應用[1]。在實際工作中仍發現快速檢測法有新的問題出現，需要認真對待和解決，現將永川區疾病預防控制中心艾滋病確證實驗室遇到的1例特殊案例報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 李某，女，69歲，漢族，農民，已婚，初中文憑。因病到某區人民醫院住院進行術前檢查時篩查出人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體有反應性，二次血樣被送到本中心進行確證實驗，初篩檢測結果見表1。

1.2確證實驗室所用試劑和儀器 HIV1+2抗體確證試劑盒(條帶免疫法)MIKROGEN，批號LHI061901，有效期至2021年5月；HIV P24抗原及抗體檢測試劑盒(膠體硒法) Alere HIV Combo (雅培公司)，批號06685K200C，有效期至20211005;HIV1/2抗體檢測試劑(乳膠法，博拓生物)， 批號 HIV19070010，有效期至2021年4月。Western blot實驗儀器為上海迅達XD236蛋白印跡儀。實驗室溫度為21 ℃，濕度61%，所有試劑從冰箱取出均在室溫條件下進行了平衡，并嚴格按照試劑說明書操作。加樣器按期進行校準，恒溫箱性能穩定。

表1 HIV初篩結果

2 確證實驗室檢測情況

2020年11月19日，艾滋病確證實驗室人員對該周渝西片區所有篩查實驗室送檢的HIV抗體初篩有反應性標本進行確證實驗。在對確證標本進行結果判定時，為了保證結果及送檢標本的準確性，會用快速檢測試劑對所有確證標本再進行一次復核，觀察結果能不能相互吻合[2]。此次筆者發現1例確證為陽性的標本用膠體硒法做出來為陰性，而用博拓生物的快速檢測試劑檢測顯示為有反應性。為什么膠體硒法的結果與醫院的幾次篩查結果、本中心的確證結果不一致，筆者首先考慮是不是送錯樣了，于是通知送檢醫院對患者進行重新抽血，并在溯源中發現李某2014年已在本中心艾滋病確證實驗室做過確證實驗并出具了HIV-1抗體陽性的報告，期間有服藥，并有CD4和病毒載量檢測結果。2020年11月26日，筆者對重新送檢的李某血樣和2020年11月19日的血樣再次進行了確證實驗，實驗結果與2020年11月19日實驗條帶一致，仍判讀為HIV-1抗體陽性，膠體硒法檢測同樣是陰性，博拓生物的快檢檢測條帶為有反應性。這個結果值得深思，確證陽性的標本為什么膠體硒法為陰性？試劑過期了？查看試劑包裝顯示在效期內。操作錯誤？為了驗證是否存在操作錯誤，從以往確證為陽性的標本里隨機篩選了30個標本，在同樣的溫濕度條件和操作臺上，新開封一袋同一批號膠體硒試劑進行檢測，同時也檢測了李某的標本，20～40 min內多次讀取結果，室溫條件下隨機篩選的30個陽性標本均顯示為有反應性，李某的標本依然是陰性，證明筆者沒有操作失誤，只能考慮試劑“漏檢”。立即向Alere試劑廠家反映具體情況，廠家建議重新再做檢測，并把試劑條置于37 ℃的恒溫箱等待20～40 min后觀察結果，30 min后觀測到試劑條顯示為有反應性，證明試劑沒有漏檢，只是需要特殊處理，這種情況在以前實驗過程中沒有遇到過。出現這種特殊情況，究其原因，查閱Alere膠體硒產品說明書時發現有一條檢驗方法局限性的說明，即一些服用抗反轉錄病毒藥物的已知HIV感染患者，使用快速檢測試劑盒進行檢測時出現了假陰性的結果[3-5]。李某的標本需要特殊處理才能顯示出陽性帶，可能與患者本身在服藥有關，這方面的研究由于本中心實驗室條件及筆者自身能力有限不做討論。

3 討 論

如果初篩時像李某這種特殊的標本最先用Alere膠體硒法檢測，而大部分實驗室使用快速檢測試劑條都沒有放恒溫箱的習慣，那么肯定存在漏檢。HIV初篩實驗的干擾條件越來越多，初篩實驗室一定要注意，避免患者在同一時段輾轉不同的醫療機構看病時由于各個醫療機構使用的HIV抗體初篩方法的不同而造成定性結果不同引起糾紛。且很多HIV感染者由于自身對HIV認知有限，即使在服藥也不會告知醫生，如果因服藥造成HIV抗體篩查時出現假陰性，那么醫院的醫生護士在對這部分患者進行治療時就存在很高的暴露風險。因此，在HIV抗體篩查過程中，為了盡可能避免漏檢，建議最好使用2種HIV抗體篩查法同時進行檢測[6]。