原發性帕金森病患者血漿同型半胱氨酸水平分析

李變芳，韓奕勃，曲婧，劉濟源，禹紅梅，王軍

（中國醫科大學附屬第一醫院 1.神經外科；2.神經內科，沈陽 110001）

同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）是蛋氨酸代謝有關的含硫氨基酸，即蛋氨酸脫甲基產生的中間產物，在體內不能合成。當體內蛋氨酸代謝產生障礙時，過量Hcy在血漿中積聚，可導致高同型半胱氨酸血癥（hyperhomocysteinemia，HHcy）［1］。既往研究表明HHcy與神經系統缺血性疾病密切相關，如腦動脈硬化等，而近年來的研究［2-3］表明，這種與缺血性腦血管病密切相關的危險因子也與許多神經系統退行性疾病有關，如有研究［4-5］顯示導致HHcy相似的遺傳因素與帕金森?。≒arkinson disease，PD）易感性也可能相關。因此，本研究擬分析原發性PD、缺血性腦血管病與腦膜瘤患者的血漿Hcy水平，并與正常成人進行比較，同時探討原發性PD患者血漿Hcy水平與其血漿維生素B12和葉酸水平的關系，以及不同病程PD患者血漿中三者的水平及相關性，為深入探討Hcy在PD發病中的作用和機制提供依據。

1 材料與方法

1.1 臨床資料及分組

1.1.1 PD組：選擇2017年8月至2019年12月于中國醫科大學附屬第一醫院行腦深部電刺激術（deep brain stimulate，DBS）前的原發 性PD患 者42例，男23例，女19例，平均年齡（62.48±7.29）歲，再根據病程分為≤5年組（11例）和＞5年組（31例）。納入標準：符合國際帕金森與運動障礙協會診斷標準及中國PD DBS療法專家組的DBS療法適應證［6-7］；左旋多巴類藥物治療曾有較好療效，療效已顯著下降或出現嚴重的異動癥，影響患者生活質量。排除標準：腦卒中、顱腦損傷、藥物等引起的PD綜合征；多系統萎縮、黑質紋狀體變性等帕金森疊加綜合征；肝腎損傷功能衰退等疾??；癡呆或患有嚴重的精神疾病。

1.1.2 缺血性腦血管病組：選擇同期就診的缺血性腦血管病患者58例，男33例，女25例，平均年齡（65.21±8.99）歲，其中，頸動脈狹窄40例，椎動脈狹窄10例，合并狹窄及其他類型動脈狹窄8例。所有患者符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2014》標準［8］。

1.1.3 腦膜瘤組：選擇同期于我院神經外科手術且病理證實的腦膜瘤患者43例，男11例，女32例，平均年齡（55.39±9.06）歲。所有患者均符合2016年WHO中樞神經系統腫瘤分類診斷標準［9］。

1.1.4 正常對照組：選取高靜等［10］的1項大樣本健康成人血清Hcy水平分析研究，該研究共納入體檢健康者124例，男52例，女72例，平均年齡（64.24±7.41）歲。

1.2 方法

實驗室檢查前禁食與禁藥12 h，采集清晨外周靜脈血5 mL至含EDTA的真空管中，4 000 r/min離心分離血清血漿。采用高效液相色譜-熒光法測定血漿Hcy水平。采用免疫測定法測定血清維生素B12和葉酸水平。Hcy、維生素B12、葉酸正常值參考范圍分別為5～15 μmol/L、145.00～637.00 pmol/L、8.83～60.80 nmol/L。

1.3 統計學分析

采用SPSS 25.0軟件行統計學分析，計數資料以率（%）或相對數構成比（%）表示，采用χ2檢驗比較；各組數據進行正態性檢驗，符合正態分布的計量資料均采用t檢驗比較，數據用表示；根據變量正態分布情況，采用Pearson相關分析。采取雙尾檢驗，P＜ 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料比較

PD組、缺血性腦血管病組與正常對照組性別、年齡均無統計學差異（P＞ 0.05），具有可比性；腦膜瘤組年齡與正常對照組無顯著差異，該組性別與正常對照有顯著差異，這與腦膜瘤好發于女性有關，見表1。

2.2 PD組、缺血性腦血管病組和腦膜瘤組血漿Hcy水平比較

PD組與缺血性腦血管病組血漿Hcy水平均顯著高于腦膜瘤組及正常對照組，差異有統計學意義（P＜ 0.05）。PD組與缺血性腦血管病組HHcy陽性率均顯著高于正常對照組及腦膜瘤組，差異有統計學意義（P＜ 0.05），而腦膜瘤組HHcy陽性率與對照組無統計學差異（P＞ 0.05），與組間血漿Hcy水平比較情況相似。進一步比較發現，PD組HHcy陽性率顯著高于缺血性腦血管病組，差異有統計學意義（P＜0.01），見表1。

表1 4組臨床資料比較Tab.1 Comparison of clinical data between case group and control group

2.3 PD組血漿Hcy與維生素B12、葉酸水平的相關性

Pearson相關分析顯示，PD組血漿維生素B12和葉酸水平與Hcy水平均呈顯著負相關（r=-0.390，P＜ 0.01；r=-0.450，P＜ 0.01）。

2.4 PD組血漿Hcy、葉酸水平與病程的關系

PD組中，病程＞5年組血漿Hcy水平顯著高于病程≤5年組，差異有統計學意義（P＜ 0.01），病程＞5年組血漿葉酸水平明顯低于病程≤5年組，差異有統計學意義（P＜ 0.01），見表2。表明PD患者血漿Hcy水平可能與病程有關，病程越長，Hcy水平越高。而病程＞5年組與≤5年組血漿維生素B12水平無統計學差異（P＞ 0.05）。提示PD患者HHcy可能與其血漿低葉酸水平有關。

表2 不同病程PD患者血漿Hcy、維生素B12、葉酸水平（）Tab.2 Plasma Hcy，vitamin B12，and folic acid levels in patients with PD at different stages（）

表2 不同病程PD患者血漿Hcy、維生素B12、葉酸水平（）Tab.2 Plasma Hcy，vitamin B12，and folic acid levels in patients with PD at different stages（）

2.5 不同PD病程組血漿Hcy與葉酸水平的相關性

Pearson 相關分析顯示，PD病程≤5年組血漿Hcy與葉酸水平無明顯相關性（r=-0.557，P＞ 0.05），PD病程＞5年組血漿Hcy與葉酸水平則呈顯著負相關（r=-0.472，P＜ 0.01）。

3 討論

HHcy最早被發現與動脈粥樣硬化性心血管疾病密切相關，繼而發現其是缺血性腦血管病危險因素之一，可能的相關機制是通過導致血管內皮細胞損傷，誘導炎癥反應，促發低密度脂蛋白過氧化等，加劇了腦血管局部動脈粥樣硬化栓塞形成，致使腦血管發生缺血性改變［11］。本研究發現，缺血性腦血管病組血漿Hcy水平明顯高于正常對照組，這與眾多研究結果相同。有研究［3］表明，Hcy除了在缺血性腦血管病中發揮重要作用，可能還與PD發展有關。PD是一種導致60歲以上老年人行動障礙的常見病，黑質多巴胺能神經元進行性減少是其主要病理改變［12］。本研究發現PD組與缺血性腦血管病組患者的血漿Hcy水平及HHcy陽性率均明顯高于正常對照組與腦膜瘤組，且PD組血漿Hcy水平與HHcy陽性率均明顯高于缺血性腦血管病組。本研究還發現，腦膜瘤病組患者血漿Hcy水平及HHcy陽性率與正常對照組無統計學差異，相當于PD組的陰性對照，這與既往研究［4-5］腦膜瘤與PD存在導致HHcy的相似遺傳因素的結論不符，這可能與導致HHcy相關的遺傳基因存在單核苷酸基因多態性等機制有關。目前HHcy在原發性PD發病中的作用及機制尚未清楚，可能與其導致缺血性腦血管病發生的機制存在一定相似性。相關研究提示HHcy促進PD發展的可能機制為：（1）加快動脈粥樣硬化形成［13］；（2）促發氧化應激反應，損傷黑質多巴胺能神經元［14］；（3）誘導神經元凋亡［15］；（4）促進有突起的酪氨酸羥化酶陽性神經元細胞凋亡，抑制神經傳導功能［16］。

本研究還進一步探討了PD組血漿Hcy水平與PD病程、維生素B12、葉酸的關系。以往關于血漿Hcy水平與PD病程的研究不多，認為其與病程無關［17］。本研究發現，PD病程＞5年的PD組患者血漿Hcy水平明顯高于病程≤5年組，差異有統計學意義（P＜0.01），提示血漿Hcy水平可能與PD病程有關，隨著病程延長，血漿Hcy水平逐漸升高。大量研究［18］表明，維生素B12與葉酸是Hcy代謝循環重要的輔助因子，兩者是決定血漿Hcy水平的主要因素，缺乏時會出現循環障礙，導致HHcy發生。推測病程＞5年PD患者組血漿Hcy水平高于病程≤5年組的原因可能與隨著PD病程延長維生素缺乏程度加重有關。本研究結果顯示，PD組血漿Hcy水平與維生素B12、葉酸水平均呈明顯負相關（r=-0.390，P＜ 0.01；r=-0.450，P＜ 0.01），血漿Hcy水平與葉酸水平的負相關性更強。不同PD病程組血漿維生素B12、葉酸水平比較，發現病程＞5年PD組患者葉酸水平明顯低于病程≤5年組，Hcy水平比較結果與之相反，與相關性分析結果一致，而血漿維生素B12水平不同病程組無顯著差異，證實了上述推測，進一步提示葉酸缺乏可能是導致長病程PD患者發生HHcy的主要因素。DOS SANTOS等［19］研究證實，健康對照組血漿Hcy水平升高主要由維生素B12水平決定，而葉酸缺乏是PD患者血漿Hcy水平升高的決定因素，與本研究結果一致。結合本研究結果中病程＞5年的PD組患者血漿Hcy水平與葉酸水平負相關性較≤5年組更強（r=-0.472，P＜ 0.01 vsr=-0.557，P＞ 0.05），更證實了葉酸缺乏是導致PD患者發生HHcy的原因之一。此外，研究［20-21］顯示，葉酸缺乏可致HHcy，可能增強多巴胺神經元對鐵等其他神經毒性損傷的敏感性，從而導致多巴胺神經元損傷或死亡。本研究中，原發性PD長病程患者較短病程患者血漿葉酸水平低，Hcy水平高，提示隨著PD病程延長，HHcy加重，可能加劇多巴胺能神經元進行性減少，從而加快疾病進程，導致PD患者多種臨床癥狀的發展。

本研究選取的腦膜瘤組患者由于其自身發病特點，女性發病率高于男性，與正常對照組存在差異，其與PD組的疾病譜相差較大，但二者的易感性因素中存在導致HHcy的相似遺傳因素。PD組均來自經神經內科評定符合DBS手術適應證的患者，大多為PD中晚期患者，其早期血漿Hcy、葉酸與維生素B12等數據無法完整獲取，且未能獲得影響患者血漿Hcy水平的左旋多巴類藥物服用數據，樣本量相對較少，可能對本研究結果有一定的影響。

綜上所述，本研究發現，HHcy在不同神經系統疾病中的作用存在差異，與腦膜瘤關系較小，與PD和缺血性腦血管病則密切相關，HHcy可能是二者的危險因素。原發性PD患者血漿Hcy水平較腦膜瘤患者和正常對照人群顯著升高。PD患者Hcy水平與血漿維生素B12、葉酸水平呈明顯負相關。PD患者Hcy水平可能與PD病程有關，即病程越長，Hcy水平越高，這可能與葉酸進行性缺乏有關，HHcy可能是PD患者多種臨床癥狀發展的因素之一。因此，原發性PD患者應定期檢測血漿中Hcy、維生素B12和葉酸水平，保證維生素，尤其是葉酸的攝入，避免由于攝入不足引起HHcy，從而加速PD的進程。