循環miR-26b水平變化與高血壓患者左心室肥厚及心功能的相關性

范景如，陳子清，黃欽生，梁瑞士，唐元久，郭舜奇

汕頭市中心醫院(中山大學附屬汕頭醫院)急診科綜合病區，廣東 汕頭515031

近年來，常見慢性病的發病率均呈現出上升趨勢，高血壓就是其中之一[1]。高血壓的臨床癥狀主要表現為動脈血壓持續升高，對患者的心功能和心臟結構造成不良影響。高血壓是左心室肥厚的常見病因，長期高血壓可使得心臟左心室負荷增加，造成靶器官損害，最終導致心臟的慢性適應性改變(左心室肥厚)，其主要表現為心肌纖維的增加[2-3]。有研究顯示，微小miRNAs在心功能中發揮著重要作用[4-5]，但臨床上關于循環miR-26b水平與高血壓患者左心室肥厚以及左心室功能關系的研究和報道還不多見，本文對此展開研究，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2019年12月至2020年12月汕頭市中心醫院診治的226例高血壓患者的臨床資料。納入標準：①符合《中國高血壓防治指南》[6](2018年修訂版)中的高血壓診斷標準者；②在未服用降壓藥物的情況下，非同日三次測量血壓，舒張壓≥90 mmHg，和/或收縮壓≥140 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)者；③原發性高血壓者；④依從性較高者；⑤臨床資料完整者。排除標準：①同時患有嚴重的肺、肝、腎等系統疾病者；②合并糖尿病者；③有吸煙或飲酒史者；④同時患有先天性心臟畸形、心臟瓣膜病或心力衰竭等心臟病者；⑤1年內進行過外科手術者；⑥繼發性高血壓者；⑦合并腦出血、眼底病變等高血壓并發癥者。用2-ΔΔCt法計算miR-26b的相對表達量，并以miR-26b的中位表達水平為標準分組，計算結果顯示，相對表達量為4.55~16.89，分組界值為7.58。根據患者循環miR-26b的相對表達量分為miR-26b高水平組(n=110)和miR-26b低水平組(n=116)。兩組患者的基線資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性，見表1。本研究經醫院醫學倫理委員會審核批準。

表1 兩組患者的基線資料比較(±s)

表1 兩組患者的基線資料比較(±s)

注：舒張壓(DBP)、收縮壓(SBP)、身體質量指數(BMI)、總膽固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、高敏C反應蛋白(hs-CRP)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、三酰甘油(TG)、尿酸(UA)。

基線資料 高水平組(n=110)低水平組(n=116)t/χ2值P值男/女(例)60/5064/520.0090.924年齡(歲)64.32±7.5663.64±7.440.6810.496 DBP(mmHg)92.76±8.1793.48±8.200.6610.509 SBP(mmHg)150.09±13.66148.95±13.580.6290.530 BMI(kg/cm2)24.90±3.3625.32±3.320.9450.346 TC(mmol/L)5.34±0.605.41±0.620.8610.390 FPG(mmol/L)5.61±0.565.58±0.550.4060.685 hs-CRP(mg/L)11.94±5.2512.29±5.340.4970.620 HbA1c(%)5.24±0.665.18±0.640.6930.489 UA(μmol/L)391.83±40.08387.42±39.880.8290.408 TG(mmol/L)2.42±0.572.40±0.580.2610.794

1.2 觀察指標與檢測方法

1.2.1 超聲參數 儀器選用彩色超聲儀(大為醫療江蘇有限公司，型號DW-F8)，探頭頻率設置為2.5~3.5 MHz。對所有患者的室間隔厚度(VST)、左心室舒張末期內徑(LVEDD)、左心室后壁厚度(LVPWT)、左心室射血分數(LVEF)、二尖瓣舒張早期血液流速峰值(E值)以及舒張晚期流速峰值(A值)進行測量。測量三個心動周期，并取平均值作為最終結果。比較兩組患者的超聲參數，包括VST、LVEDD、LVPWT、LVEF、LVMI以及左心室肥厚(LVH)病例數。參數計算：根據Devereux公 式 計 算 ，LVM=1.04[(LVEDD+IVST+LVPWT)3-LVEDD3]-13.6；左心室質量指數(LVMI)=LVM/體表面積(BSA)。LVH判斷標準：參照美國超聲心電圖協會標準[7]，女性LVMI＞110 g/m2，男性LVMI＞125 g/m2，可以認定為LVH。

1.2.2 實驗室指標 入院第二天早上，采集患者的空腹靜脈血5 mL，設置3 000 r/min的轉速離心10 min，分離出血漿，并放置于RNA酶滅菌管中待用。采用全自動生化分析儀(貝克曼庫爾特，型號AU5800)檢測TC、FPG、hs-CRP、HbA1c、TG以及UA指標。選用Trizol試劑進行總RNA的提取，用TaKaRa進行逆轉錄反應，并使用SYBR Green法進行PCR分析(所用引物序列見表2)。

表2 PCR分析所用引物序列

1.3 統計學方法 應用SPSS18.0統計軟件進行數據分析，計量資料以均數±標準差(±s)表示，組間均數比較采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗；循環miR-26b水平與各超聲參數的相關性分析用Pearson相關性分析法；高血壓左心室肥厚的相關危險因素分析采用多因素Logistic回歸分析法，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者的超聲參數比較 兩組患者的LVEF和LVEDD比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；高水平組患者的VST、LVPWT、LVMI明顯低于低水平組，E/A值則明顯高于低水平組，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表3。高水平組患者中左心室肥厚24例(21.82%)，明顯少于低水平組的105例(90.52%)，差異有統計學意義(χ2=108.768，P=0.000)。

表3 兩組患者的超聲參數比較(±s)

表3 兩組患者的超聲參數比較(±s)

組別 例數VST(mm)LVEF(%)LVEDD(mm)LVPWT(mm)E/A值LVMI(g/cm2)高水平組1109.94±0.9566.16±6.5244.37±3.889.56±0.930.91±0.28110.40±10.73低水平組11612.24±1.1265.78±6.4944.54±3.9211.67±1.020.60±0.13139.52±12.26 t值16.6060.4390.32816.22410.76418.959 P值 ＜0.050.6610.744＜0.05＜0.05＜0.05

2.2 循環miR-26b水平與各超聲參數的相關性Pearson相關分析結果顯示，循環miR-26b水平與VST、LVPWT、LVMI呈負相關(P＜0.05)，與E/A值呈正相關(P＜0.05)，見表4。

表4 循環miR-26b水平與各超聲參數的相關性

2.3 高血壓患者左心室肥厚相關危險因素 多因素Logistic回歸分析結果顯示，LVPWT及LVMI是高血壓左心室肥厚的獨立危險因素(P＜0.05)，miR-26b水平升高則是保護因素(P＜0.05)，見表5。

表5 高血壓患者左心室肥厚相關危險因素的多因素Logistic回歸分析

3 討論

左心室肥厚是高血壓的常見病癥，高血壓作為一種長期性的慢性疾病，會使得左心室負荷不斷加重，導致左心室發生肥厚[8]。大量研究顯示，相較于普通高血壓患者，高血壓合并左心室肥厚患者的冠狀動脈儲備能力顯著下降，急性心肌缺血事件發生率大大提高，給患者的生命造成嚴重威脅[9-10]。因此，高血壓患者的左心室肥厚診斷極為重要。

miRNAs能夠調控基因表達，是一種內源性非編碼小分子RNA，在生物進化過程中表現出高度保守性。在心臟發育、心肌肥大等心血管成長發育以及其他生理過程中，均有微小miRNAs的參與，并且穩定性極強[11-12]。miRNAs與心肌肥大、心力衰竭等多種心血管疾病密切相關，可用于心血管疾病的診斷。有研究顯示，miR-26b水平與高血壓患者左心室肥厚相關，推測miR-26b可以作為高血壓患者左心室肥厚診斷的潛在指標[12-13]。

本研究結果顯示，高水平組患者的VST、LVPWT、LVMI以及LVH病例數均顯著少于低水平組，差異均有統計學意義(P＜0.05)。左心室質量指數由左心室后壁和室間隔厚度決定，且左心室質量指數是判斷左心室是否肥厚的重要檢測指標，左心室質量指數越大表示左心室肥厚越嚴重[14]。有文獻表明，高血壓伴發左心室肥厚患者常出現左心室舒張功能下降，舒張晚期流速峰值升高，二尖瓣舒張早期血液流速峰值下降，則兩者比值下降，當比值＜1時則表明左心室舒張功能下降[15]。本研究結果顯示，兩組患者的E/A值均＜1，且高水平組明顯高于低水平組，差異有統計學意義(P＜0.05)，循環miR-26b水平與E/A值呈正相關，這表明兩組患者均出現左心室舒張功能不全，且循環miR-26b水平越低功能下降越嚴重。

Pearson分析結果顯示，循環miR-26b水平與VST、LVPWT、LVMI呈負相關(P＜0.05)，這是由于miR-26b降低后，抑制脂肪細胞分化，心肌細胞發生增殖，產生代償性肥大，導致心肌間質膠原增多，心肌的持續變厚使得心肌功能出現異常，最終導致心臟舒張功能下降[16]。Logistic分析顯示，miR-26b水平升高是高血壓左心室肥厚的保護因素，而LVPWT及LVMI均是高血壓左心室肥厚的獨立危險因素，這是因為心臟肥厚組織中miR-26b表達水平下降，并通過對靶點糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)，能夠抑制調控心臟發生肥厚[17]。

綜上所述，高血壓患者的循環miR-26b水平與左心室肥厚相關，且高血壓左心室肥厚患者的miR-26b表達水平較低，miR-26b可作為高血壓患者左心室肥厚的一個檢測指標。