王 娜,孫靈霞,萬 冉,余秋穎,李正邦,任紅濤,*
(1.河南農業大學食品科學技術學院,河南 鄭州 450002;2.鄭州市營養與健康食品重點實驗室,河南 鄭州 450002;3.正陽新地食品集團有限公司,河南 駐馬店 463600)
花生原名落花生,又被稱為長生果、金果、番豆等。花生營養豐富,含有易被人體吸收的蛋白質,此外還含有脂肪、碳水化合物、維生素、類胡蘿卜素和多種微量成分,可抗衰老、補虛、延年益壽,因此人們稱之為“長生果”[1]。花生不僅可被用作營養豐富的保健品,還有一定的食療效果[2],有助于消化和營養吸收。石榴全身可用作藥物,其果具有止渴生津、解酒、祛毒等功效[3],石榴果汁中含有多種氨基酸和微量元素,具有抗胃潰瘍、助消化、軟化血管、降脂降糖、降低膽固醇的作用[4]。
近年來市場上出現越來越多的植物蛋白飲料,因其口感細膩、風味獨特,且營養豐富,易于吸收,深受人們喜愛[5]。目前,國內外在植物蛋白復合飲料的開發和應用方面也做了大量的研究,并取得了諸多成果[6-8],但是對以花生為主要原料制成的復合蛋白飲料的研究報道較少。慕鴻雁等[9]研究了花生與山楂的復合蛋白飲料工藝,肖付剛等[10]研究了花生與紅薯復合蛋白飲料加工工藝。市場上花生蛋白飲料種類較少,因此選擇口感細膩、風味濃郁的花生漿與風味清淡、顏色鮮艷的石榴汁進行搭配,研制復合蛋白飲料,不僅能使石榴汁和香氣濃郁的花生漿風味和營養互補,形成風味獨特、口感清新的復合蛋白飲料,同時也能為復合蛋白飲料的開發提供一定的參考。
1.1.1 材料與試劑
花生仁:正陽小白沙,由正陽新地花生集團提供;石榴:中榴1 號,由正陽新地花生集團提供。
碳酸氫鈉、白砂糖:購于丹尼斯超市;單甘酯、蔗糖酯:上海羚躍實業有限公司;胭脂紅:河南味泉生物科技有限公司;石榴香精:陜西晨明生物科技有限公司;三氯蔗糖:安徽金禾實業股份有限公司。
1.1.2 儀器與設備
C21-RT2120 多功能電磁爐:廣東美的生活電器制造有限公司;C75 型烤箱:青島漢尚電器有限公司;JYL-C16V 型豆漿機:九陽股份有限公司;JMS-8 膠體磨:廊坊通用機械有限公司;GYB40-10 型均質機:上海東華高壓均質機廠;LDZF-50KB 型立式高壓蒸汽滅菌鍋:上海申安醫療器械廠;Anke TDL80-2B 型臺式離心機:上海安亭科學儀器廠;UV-2000 型紫外可見分光光度計:上海尤尼柯儀器有限公司;S20A 型自動消化裝置、K1301 型半自動定氮儀:上海晟聲自動化儀器有限公司;WYA-2S 型數字阿貝折光儀:上海申光儀器儀表有限公司。
1.2.1 花生石榴復合蛋白飲料加工工藝流程

混合調配→均質→灌裝殺菌→冷卻→成品
1.2.2 操作要點
選擇顆粒飽滿、干燥無損傷、無霉變的花生仁,去除沙土、石塊和其他雜質[11]。花生仁于160~170 ℃下烘烤10 min,焙烤后脫紅衣[12]。花生浸泡條件為:花生與水質量比1∶3,溫度為60~70 ℃,加入0.5%小蘇打浸泡花生仁5 h,以提高花生漿蛋白含量[13]。將浸泡后的花生仁用清水沖洗3~4 遍,并瀝干水分。花生先用60~70 ℃熱水進行打漿,120 目濾網過濾[14]。
將石榴洗凈、去皮,剝下石榴籽,放進攪拌機,攪打2 min。雙層紗布過濾,再1 000 r/min 離心,制得的石榴原汁于4 ℃下保藏。
將白砂糖、甜味劑、乳化穩定劑與香精等在80~85℃的熱水中充分溶解混合,冷卻后加入花生漿中,然后花生漿與石榴汁按照一定的比例進行混合,定容后添加白砂糖4%、三氯蔗糖0.005 9%、胭脂紅0.001 86 mg/mL、石榴香精0.03%。花生漿先進行第1 次均質,均質壓力為45MPa,混合后再進行第2 次均質,均質壓力為35MPa。將兩次均質后的飲料灌裝后進行殺菌。
1.2.3 單因素試驗設計
1.2.3.1 花生打漿料液比對產品感官評分的影響
分別以花生仁打漿料液比1∶10、1∶15、1∶20(g/mL),進行打漿試驗,花生漿和石榴原汁復配質量比10∶1,乳化劑添加量0.11%,黃原膠添加量0.08%,一次均質壓力45 MPa,二次均質壓力35 MPa,均質料液溫度70 ℃,最終以產品感官評分為評價指標,確定適宜的打漿料液比。
1.2.3.2 花生漿與石榴汁配比對產品感官評分的影響
花生打漿料液比1∶15(g/mL),然后將花生漿和石榴汁分別以質量比1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1、6∶1、8∶1、10∶1、12∶1 進行復配,乳化劑添加量0.11%,黃原膠添加量0.08%,一次均質壓力45 MPa,二次均質壓力35 MPa,均質料液溫度70 ℃,最終以產品感官評分為評價指標,確定花生漿和石榴汁適宜的配比。
1.2.3.3 乳化劑對產品感官評分的影響
花生打漿料液比1∶15(g/mL),分子蒸餾單甘酯和蔗糖酯的復配用量(以花生漿計)分別為0.05%、0.07%、0.09%、0.11%、0.13%,兩者的質量比分別為3∶2、1∶1、2∶3,乳化劑加入到花生漿中,然后花生漿和石榴原汁以質量比10∶1 進行復配,黃原膠添加量0.08%,一次均質壓力45 MPa,二次均質壓力35 MPa,均質料液溫度70 ℃,均質、殺菌后,檢測飲料的穩定性,確定適宜的乳化劑用量及比例。
1.2.3.4 穩定劑黃原膠對產品感官評分的影響
花生打漿料液比為1∶15(g/mL),花生漿和石榴原汁配比10∶1,乳化劑(單甘酯與蔗糖酯配比1∶1)添加量0.11%,穩定劑黃原膠用量(以花生漿計)分別為0.02%、0.04%、0.06%、0.08%,一次均質壓力為45 MPa,二次均質壓力為35 MPa,均質溫度70 ℃,最終檢測飲料的穩定性,確定適宜的黃原膠添加量。
1.2.3.5 均質條件的篩選
在一次均質壓力45 MPa,二次均質壓力35 MPa的條件下,料液均質溫度分別為60、70、80 ℃,測定透光率,確定適宜的均質溫度。均質溫度確定后,進行均質次數試驗,分別為0、1、2、3 次均質,測定透光率,確定適宜的均質次數。
1.2.3.6 殺菌試驗條件的篩選
花生打漿料液比為1∶15(g/mL),花生漿和石榴原汁配比10∶1,乳化劑(單甘酯與蔗糖酯配比1∶1)添加量0.11%,黃原膠添加量0.06%,一次均質壓力為45MPa,二次均質壓力為35 MPa,均質料液溫度70 ℃,然后取6 份復合蛋白飲料,分別在100、121 ℃條件下各殺菌10、20、30 min,在37 ℃條件下放置10 d,通過感官評分和微生物指標測定確定適宜的殺菌條件。
1.2.4 正交試驗設計
在單因素試驗結果基礎上,選擇花生漿與石榴汁漿汁配比、單甘酯與蔗糖酯比例、乳化劑添加量、黃原膠添加量進行四因素三水平正交試驗設計。試驗因素與水平見表1。

表1 復合蛋白飲料正交試驗因素水平表Table 1 Orthogonal test table of compound protein beverage
1.2.5 測定項目與方法
1.2.5.1 感官評價
根據產品特征,制定產品感官評價標準[15],具體見表2。選擇10 名感官評價人員進行感官評價,每人對產品進行評分(色澤20 分、風味20 分、口感30 分、組織狀態30 分),結果取平均值。

表2 花生石榴復合蛋白飲料的感官評分標準Table 2 Sensory evaluation criteria of peanut-pomegranate compound protein beverage
1.2.5.2 離心沉淀率

1.2.5.3 油脂析出率

1.2.5.4 蛋白質含量
采用凱氏定氮法[17]測定。
1.2.5.5 可溶性固形物含量
采用折光計法[18]測定。
1.2.5.6 透光率
采用可見分光光度法[19]測定。
1.2.5.7 微生物菌落總數
采用平板計數法[20]測定。
1.2.6 數據處理
采用SPSS16.0、DPS7.05 軟件進行數據處理。
2.1.1 花生打漿料液比對產品感官評分的影響
由表3 可知,花生打漿料液比分別為1∶10、1∶15、1∶20(g/mL)時,飲料感官評分之間無顯著性差異。但是從感官評分的均值可以看出,料液比為1∶15(g/mL)時最高,因此確定花生打漿適宜的料液比為1∶15(g/mL)。

表3 花生打漿料液比對產品感官評分的影響Table 3 Effect of material liquid ratio of peanut pulp on sensory score of beverage
2.1.2 花生漿與石榴汁配比對產品感官評分的影響
由表4 可知,隨著花生漿和石榴汁配比從1∶1 變化至12∶1,產品的感官評分波動變化,花生漿與石榴汁配比為10∶1 時,產品的感官評分較高,故確定花生漿與石榴汁適宜的配比為10∶1。

表4 花生漿與石榴汁配比對產品感官評分的影響Table 4 Effect of proportion of peanut pulp and pomegranate juice on sensory score of beverage
2.1.3 乳化劑配比及用量對產品穩定性的影響
由表5 可知,單甘酯與蔗糖酯不同復配比對產品影響差異明顯。整體上看,單甘酯與蔗糖酯復配比為1∶1,且其添加量為0.11%時產品的油脂析出率和離心沉淀率最低。因此,確定乳化劑單甘酯與蔗糖酯復配比1∶1,用量為0.11%較為適宜。

表5 分子蒸餾單甘酯和蔗糖酯的復配比例及用量對飲料穩定性的影響Table 5 Effect of proportion and addition of monoglycerides and sucrose ester on beverage stability
2.1.4 黃原膠添加量對產品穩定性的影響
由表6 可知,以黃原膠為穩定劑,不同添加量之間產品的離心沉淀率差異顯著(P<0.05)。當黃原膠添加量為0.06%時,飲料的離心沉淀率最低,此時飲料呈現均勻穩定的乳狀液。故黃原膠適宜添加量為0.06%。

表6 黃原膠添加量對飲料穩定性的影響Table 6 Effect of xanthan gum addition on beverage stability
2.1.5 均質條件篩選
2.1.5.1 均質溫度篩選
在一次均質壓力45 MPa,二次均質壓力35 MPa條件下,均質溫度對飲料透光率的影響見表7。

表7 均質溫度對復合蛋白飲料透光率的影響Table 7 Effect of homogenization temperature on light transmittance of compound protein beverage
由表7 可知,均質溫度不同時,飲料的透光率之間存在明顯差異。隨著均質料液溫度的升高,飲料的透光率呈現先降低后升高的趨勢,當均質溫度為70 ℃時,飲料的透光率達到最小值。因此,確定均質適宜的料液溫度為70 ℃。
2.1.5.2 均質次數篩選
在一次均質壓力為45 MPa,二次均質壓力為35 MPa,均質溫度70 ℃的條件下,均質次數對飲料透光率的影響見表8。

表8 均質次數對復合蛋白飲料透光率的影響Table 8 Effect of homogenization times on light transmittance of compound protein beverage
由表8 可知,隨著均質次數的增加,飲料透光率呈現先降低后趨于平緩。考慮到節能問題,確定均質時適宜的均質次數為2 次。
2.1.6 殺菌試驗
殺菌后復合蛋白飲料在37 ℃條件下進行放置。對100 ℃殺菌后的產品進行感官評定,結果見表9;對121 ℃殺菌后的產品進行感官評定、菌落總數計數及飲料穩定狀態觀察,結果見表10。

表9 100 ℃時殺菌時間對復合蛋白飲料感官評分的影響Table 9 Effect of sterilization time at 100 ℃on sensory score of compound protein drink

表10 121 ℃時殺菌時間對復合蛋白飲料感官評分和菌落總數的影響Table 10 Effect of sterilization time at 121 ℃on sensory score and colony count of compound protein drink
由表9 可知,100 ℃條件下殺菌時間對飲料的感官品質無顯著性影響。將殺菌后的飲料于37 ℃條件下放置10 d 均出現明顯的分層現象,說明殺菌溫度為100 ℃時復合蛋白飲料的穩定性較差。
由表10 可知,121 ℃下殺菌10 min 與殺菌30 min對復合蛋白飲料的感官品質有顯著影響(P<0.05),殺菌10 min 與殺菌20 min 飲料的菌落總數之間無顯著性差異,殺菌30 min 產品的菌落總數與前兩組間存在顯著性差異(P<0.05)。121 ℃條件下隨著殺菌時間的延長,飲料的感官評分和菌落總數均呈下降趨勢,殺菌時間10 min 與殺菌20 min 的產品感官評分相差不大。從食品安全及經濟成本考慮,選擇適宜的殺菌條件為:殺菌溫度121 ℃,殺菌時間20 min。
在單因素試驗結果的基礎上,以花生漿與石榴汁配比、單甘酯與蔗糖酯比例、乳化劑添加量、黃原膠添加量為主要影響因素,以復合飲料的感官評分為評價指標,采用L9(34)正交試驗優化花生石榴復合蛋白飲料工藝參數,正交試驗結果見表11。

表11 復合蛋白飲料正交試驗結果Table 11 Orthogonal test results of compound protein beverage
由表11 中的極差分析可得,影響產品感官評分各因素的主次順序為C>A>B>D,即乳化劑對產品感官品質的影響最大,其次是花生漿與石榴汁配比和單甘脂與蔗糖酯比例,黃原膠對產品感官品質的影響最小。花生石榴復合蛋白飲料的最佳加工工藝配方組合為A3B2C2D3,即花生漿與石榴汁配比12∶1,單甘酯與蔗糖酯比例1∶1,乳化劑添加量0.11%,黃原膠添加量0.08%。
經正交試驗優化得到花生石榴復合蛋白飲料最佳工藝條件,進行3 次平行驗證試驗,產品的感官評分為94.2 分,高于正交試驗表中的最優組合A3B3C2D1,產品色澤自然,口感良好。
2.4.1 感官品質
花生石榴復合蛋白飲料為粉紅色乳狀液,具有石榴汁的清新風味,又兼具花生的濃郁香味,口感細膩,酸甜適口,無異味,無肉眼可見雜質,無明顯分層現象。
2.4.2 理化指標
經測定,得到花生石榴復合蛋白飲料可溶性固形物含量為8.11%,蛋白質含量為0.82%。
2.4.3 微生物指標
試驗結果表明,花生石榴復合蛋白飲料的菌落總數為29 CFU/mL。
上述檢測結果顯示,各項指標均符合QB/T 4222—2011[21]中的規定。
上述試驗結果表明,花生石榴復合蛋白飲料的最佳工藝條件為:花生漿打漿料液比1∶15(g/mL),花生漿和石榴汁(100%原汁)配比12∶1,乳化劑(單甘酯與蔗糖酯1∶1)0.11%,黃原膠0.08%,白砂糖4%,三氯蔗糖0.005 9%,胭脂紅0.001 86 mg/mL,石榴香精0.03%;飲料一次均質壓力為45 MPa,二次均質壓力為35 MPa,兩次均質溫度均為70 ℃;飲料殺菌溫度121 ℃,殺菌時間20 min。該條件下制得的飲料呈粉紅色乳狀液,具有石榴汁的清新風味和花生的濃郁香味,口感細膩,酸甜適口,無異味,無肉眼可見雜質,無明顯分層現象。