MTHFR、MTRR基因多態(tài)性與妊娠期不良結(jié)局的關(guān)系探討

陳瀟菲 遲成 孔德玉 葛鑫

【摘要】：目的：探討MTHFR、MTRR基因多態(tài)性與妊娠期不良結(jié)局的關(guān)系。方法：研究時間2018年3月-2020年10月，德州市婦幼保健院就診的圍產(chǎn)期產(chǎn)婦410例為研究對象，按照是否有無不良孕產(chǎn)史分成兩組;中有不良妊娠結(jié)局的孕婦125例為觀察組，無不良妊娠結(jié)局孕婦285例為對照組;兩組研究對象進行基因檢測，比較兩組MTHFR? C677T 、MTHFR? A1298C、MTRR? A66G位點基因分型，對造成妊娠期不良結(jié)局進行多因素分析。結(jié)果：兩組MTHFR C677T 位點基因比較，c66c，C677T 基因型比較差異有統(tǒng)計學(xué)，P<0.05。T677T基因型比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。兩組MTRR A66G位點基因分型比較，A66A，A66G基因型比較有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05。G66G基因型比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。兩組MTHFR A1298C位點基因分型比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。結(jié)論：MTHFR? C677T、 MTRR A66G位點的基因多態(tài)性分布與不良妊娠的發(fā)生有相關(guān)性，MTHFR? C677TT、MTRR? 66 AG 基因型是不良妊娠發(fā)生的獨立危險因素。

【關(guān)鍵詞】：甲硫氨酸合成酶還原酶;5，10- 亞甲基四氫葉酸還原酶;基因多態(tài)性;妊娠期不良結(jié)局

山東省省醫(yī)藥衛(wèi)生發(fā)展計劃：2017WS678

不良妊娠結(jié)局（adverse pregnancy outcomes APOs）是指妊娠后無法產(chǎn)生功能、外觀的子代，如自然流產(chǎn)，異位妊娠等。不良妊娠結(jié)局不僅對孕婦造成傷害，對家庭、社會也有一定的影響。我國是人口大國，不良妊娠結(jié)局對人口健康素質(zhì)有一定的影響。葉酸（FA）是一種人體必需的水溶性 B 族維生素，其主要參與氨基酸、核酸等代謝外，同時對 DNA 、RNA的合成、細胞的增殖等也具有重要的作用。近年來，5， 10- 亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）、甲硫氨酸合成酶還原酶（MTRR）基因多態(tài)性與不良妊娠結(jié)局關(guān)聯(lián)性的研究成為熱點。本文主要探討MTHFR、MTRR基因多態(tài)性與妊娠期不良結(jié)局的關(guān)系，研究時間2018年3月-2020年10月，在我院就診的圍產(chǎn)期產(chǎn)婦410例為研究對象，現(xiàn)整理如下：

1資料與方法

1.1一般信息

研究時間2018年3月-2020年10月，德州市婦幼保健院就診的圍產(chǎn)期產(chǎn)婦410例為研究對象，按照是否有無不良孕產(chǎn)史分成兩組，其中有不良妊娠結(jié)局的孕婦125例，為觀察組，年齡22-36歲，平均（29.89±2.35）歲。無不良妊娠結(jié)局孕婦285例為對照組，年齡22-37歲，平均（29.81±2.31）歲。兩組基本信息比較，無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。本次研究，經(jīng)研究對象及家屬知情且同意;經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2方法

采集所有研究對象外周血，利用柱式抽提試劑盒抽取樣本 DNA。 MTHFR、MTRR基因多態(tài)性采用限制性片段長度多態(tài)性聚合酶鏈反應(yīng)（PCR -RFLP）技術(shù)。設(shè)置反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性3min→92℃預(yù)變性15s→60℃退化1min→75℃預(yù)變性45s;上述循環(huán)操作30個，然后進行擴增，75℃延伸10min。最后通過相應(yīng)的擴增產(chǎn)物進行片段分析，詳細記錄結(jié)果。

利用分析軟件確定各個樣品的基因分型結(jié)果，對MTHFR C677T 、MTHFR? A1298C、MTRR? A66G位點基因分型比較。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理

本次研究計量資料、計數(shù)資料分別以 （±s），和百分比表示，采用 t 檢驗和X2檢驗;應(yīng)用軟件SPSS23.0，統(tǒng)計結(jié)果P<0.05，有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組MTHFR? C677T 位點基因分型比較

兩組MTHFR C677T 位點基因比較，c66c，C677T 基因型比較差異有統(tǒng)計學(xué)，P<0.05。T677T基因型比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。

2.2兩組MTHFR A1298C位點基因分型比較

兩組MTHFR A1298C位點基因分型比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。

2.3兩組MTRR A66G位點基因分型比較

兩組MTRR A66G位點基因分型比較，A66A，A66G基因型比較有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05。G66G基因型比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。

2.4不良妊娠多因素分析

MTRR66AA、MTHFRC677TT是孕婦不良妊娠結(jié)局發(fā)生的獨立危險因素，P<0.05。

3討論

葉酸是備孕期，孕初期重要的一種維生素，而葉酸的代謝中MTHFR 是其關(guān)鍵酶;通過MTHFR的作用將 5，10- 亞甲基四氫葉酸 （5，10-MTHF） 轉(zhuǎn)化為 5- 甲基四氫葉酸 （5-MTHF），形成可以為甲基形成甲硫氨酸過程中重要的 HCY ;作用機制是與維生素12維持甲硫氨酸合成酶 （MTR） 的活性，催化 HCY 合成甲硫氨酸。同時MTHFR可以影響機體的DNA、RNA轉(zhuǎn)錄，蛋白質(zhì)等物質(zhì)的合成提供甲基。

對于MTHFR酶活性及穩(wěn)定性，MTHFR基因位點的穩(wěn)定性非常重要，一旦MTHFR基因位點變異，則影響MTHFR酶活性、穩(wěn)定性。其作用會導(dǎo)致 5-MTHF生產(chǎn)減少，繼而影響機體的 DNA、蛋白質(zhì)甲基化反應(yīng)異常，HCY 向甲硫氨酸轉(zhuǎn)化受到影響。MTRR基因位點變異，會影響MTRR酶的活性，MTRR酶活性降低會影響HCY 向甲硫氨酸轉(zhuǎn)化。THFR和MTRR基因多態(tài)性均可造成高 HCY 血癥，直接或間接導(dǎo)致不良妊娠的發(fā)生。相關(guān)研究表明，其二者的與唐氏綜合征、先天性心臟病、等早期多種不良妊娠有密切的聯(lián)系。本次研究結(jié)果顯示，兩組MTHFR C677T 位點基因比較，c66c，C677T 基因型比較差異有統(tǒng)計學(xué)，P<0.05。T677T基因型比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。兩組MTRR A66G位點基因分型比較，A66A，A66G基因型比較有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05。G66G基因型比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。兩組MTHFR A1298C位點基因分型比較無統(tǒng)計學(xué)意義，P>0.05。提示，不良妊娠結(jié)局與MTHFR? C677T、 MTRR A66G位點的基因多態(tài)性分布有關(guān)系;相關(guān)研究也表明， C677C 酶活性正常，C677T 酶活性較低，故攜帶 C677T基因與不良妊娠結(jié)局有關(guān)系。

綜上所述，MTHFR? C677T、 MTRR A66G位點的基因多態(tài)性分布與不良妊娠的發(fā)生有相關(guān)性，MTHFR? C677TT 和 MTRR? 66 AG 是不良妊娠發(fā)生的獨立危險因素。現(xiàn)在社區(qū)已經(jīng)將葉酸在妊娠早期進行免費發(fā)放，可以加強相關(guān)的健康教育，提高孕婦對葉酸補充的認知，從而達到降低出生缺陷的發(fā)生，提高人口素質(zhì)。

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作者簡介：陳瀟菲，碩士研究生，主管技師，研究方向：分子學(xué)診斷

通訊作者：葛鑫，本科，主管技師，研究方向：微生物

德州市婦幼保健院 山東德州 253077