病原微生物檢驗中分子生物學技術的應用準確率探討

龐瑞昌 賈賽 徐秀芬

【摘要】目的：探討將分子生物學技術應用于至病原微生物檢驗中的準確性。方法：選取2020年1月至12月期價在我院行病原微生物檢測患者120例，所有受檢者均行實時熒光RT-PCR（實施組）以及常規RT-PCR（常規組）檢測，分別比較其檢測陽性率。結果：實施組受檢者病原微生物檢驗陽性率高達84.17%遠遠高于常規組57.50%，兩組陽性結果互比差異顯著（P<0.05）。結論：將分子生物學技術（RT-PCR）應用至病原微生物檢驗工作中，不僅具有較高的陽性率，且具有檢測迅速的優勢，為此可將該檢驗技術作為常見微生物病原菌的檢驗當中，并值得臨床借鑒和推廣。

【關鍵詞】病原微生物;檢驗;分子生物學技術;陽性率

當前，隨著醫學技術的不斷進步，生物科學技術也逐漸讓人們所了解，人體的康健與微生物間的關系密切，而臨床對生物學檢驗技術越來越重視，該技術已然在臨床上應用越來越成熟，被廣泛地應用至于病原微生物有關的檢驗工作中。以往，臨床微生物檢驗流程包括：病原菌分離培養→染色鏡檢→血清學試驗等，由于檢驗流程復雜、周期長，其結果往往受到環境等各種因素的影響對產生差異，故時效性和應用性存在局限性。當前，以PCR（聚合酶鏈式反應）、生物傳感器、基因芯片（DNA）等，分子生物學代表在臨床檢驗工作中的優勢越加凸顯，對提升微生物檢驗質量有著非常重要的意義。基于此，本次研究將著重分析病原微生物檢驗中應用分子生物學技術的準確性，旨在積累更加豐富的病原微生物檢驗工作經驗，相關材料如下。

1材料與方法

1.1一般資料

選取2020年1月至12月期價在我院行病原微生物檢測患者120例，女性47例，男性為73例，年齡跨度為23歲至60歲之間，平均（40.2±3.9）歲。所有受檢者均知曉本次研究內容，并表示愿意積極配合完成各項檢查，已簽署知情同意書。此外，本次研究內容已經得到我院倫理委員的支持和認可。

1.2方法

所有受檢者120例均采集2份病原微生物標本，共計240份，其中120份行常規RT-PCR病原微生物檢驗（常規組），剩余120份行熒光定量RT-PCR病原微生物檢驗（實施組）。詳細記錄其檢驗結果。

1.3觀察指標

所有受檢者的病原微生物檢驗結果行陽性率計算。

1.4統計學方法

SPSS22.0展開詳細分析，數據采用（%）體現，x2互比檢驗，如P值<0.05，則表示為具有統計學意義。

2結果

實施組受檢者病原微生物檢驗陽性率高達84.17%遠遠高于常規組57.50%，兩組陽性結果互比差異顯著（P<0.05），詳細數據見表1。

3討論

近些年以來，伴隨著大眾對人類健康與微生物之間關系的認知度越來越高，進而微生物檢驗工作的關注度亦得到大眾的重視。目前，食品、飲用水以及臨床診療等各個領域，都有病原微生物檢驗的身影，而分子生物學技術中分子生物學、聚合酶鏈反應、免疫學、基因芯片、蛋白質指紋圖譜技術以及生物傳感等得到了長足發展，并進入了一個全新的階段，當前以分子生物學技術為技術手段，已經打開了科學進步的大門。伴隨在該項技術的不斷發展，使其由傳統的細胞學漸漸向分子技術、基因技術發展，為此形成了一項新技術——分子微生物學。通過對其不斷研究和認識，從其外部結構的相關研究緩慢向其內部結構進行深入研究，促使微生物檢驗自生化免疫不斷向基因水平發展。當前各種分子生物學技術被臨床廣泛的應用于病原微生物檢驗工作中，不僅及時改善了原有微生物檢驗不足的問題，同時實現了快速、有效以及準確的最終檢驗目標[5]。目前，臨床在病原菌檢測方面已經逐漸向簡單、自動化方面發展，而分子生物學技術的發展是在全自動化儀器技術上，將鑒定、診斷，甚至是耐藥基因檢驗都被一一應用至生物芯片技術當中，在一定程度上優化了傳統病原菌臨床應用的現狀。

生命科學領域中最為常見的分子生物學技術即聚合酶鏈式反應（PCR），在傳統聚合酶鏈反應技術的基礎上，被慢慢改進，并得到不斷地發展。PCR的技術原理為，在相同聚合酶反應體系基礎上，將特異性引物融入，由體外酶促合成DNA的手段，將其變性→退火→延伸等多個步驟反應而成，不斷循環、重復實施，使其DNA指數最終達到迅速擴增的目的[6-7]。而實時熒光定量（RT-PCR），是在聚合酶鏈式反應中放入熒光，通過熒光信號不斷積累，再開展檢驗工作，采用標準曲線定量，詳細分析未知模板，該種分子生物學技術被廣泛應用在臨床常見病原菌生物檢驗、分型中。分子生物學技術的優勢主要總結以下幾點：首先靈敏性更高;其次為特異性高，在檢驗中可以準確鑒別出不同類型的病原微生物;最后是檢驗流程不僅具有便捷性，同時整個檢驗過程可在2h內完成，在一定程度上縮短了微生物檢驗用時[8]。為此，該種檢驗技術非常適用于常見病原微生臨床檢驗中。

通過本次研究結果顯示：實施組受檢者病原微生物檢驗陽性率高達84.17%遠遠高于常規組57.50%，兩組陽性結果互比差異顯著（P<0.05），該數據充分證明：分子生物技術應用在病原微生檢驗中具有迅速檢測、準確性高的優勢，具有較高的可行性和有效性。此外，經本次研究深有體會，筆者認為：臨床病原微生物的檢驗技術正在不斷日新月異，而分子生物學技術在檢驗病原菌微生物中具有獨特的優勢，在臨床檢驗中發揮的作用越來越關鍵，其技術不斷完善，其優勢（快速、準確性高、經濟等），不僅檢驗范圍更加廣泛，且在預防和控制疾病中的前景更加廣闊，具有一定的臨床應用價值，可以為患者的健康提供相應的保障，基于此，應在日后工作中不斷的進行深入研究，方能適應當代技術發展的步伐。

綜上所述，將分子生物學技術（RT-PCR）應用至病原微生物檢驗工作中，不僅具有較高的陽性率，且具有檢測迅速的優勢，為此可將該檢驗技術作為常見微生物病原菌的檢驗當中，并值得臨床借鑒和推廣。

參考文獻

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[2]曹利華.病原微生物檢驗中分子生物學技術的應用研究[J].國際感染病學（電子版），2019，8（03）：5-6.

[3]孫文龍，郭宏.分子生物學技術在病原微生物檢驗中的應用[J].中國城鄉企業衛生，2019，34（06）：46-47.

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聊城市東昌府人民醫院檢驗科 山東聊城 252000

聊城市東昌府區古樓街道社區衛生服務中心預防接種科 山東聊城 252000