Hippo-YAP/TAZ通路在腫瘤免疫調節中的作用研究進展

韓明媛 王振波

[摘要] Hippo-YAP/TAZ 通路在調節細胞增殖、存活和信號轉導等生物學功能方面發揮著重要作用。近年來，該通路在腫瘤免疫調節中的作用被廣泛研究，其不僅可以調節腫瘤微環境中的免疫細胞，還能在 mRNA 和蛋白水平上調控程序性死亡配體-1（PD-L1）的轉錄和翻譯過程，進而影響程序性死亡受體-1（PD -1）/PD-L1免疫檢查點抑制劑的療效。此外，該通路還是腫瘤細胞耐藥與免疫逃逸之間聯系的橋梁。因此，全面了解 Hippo-YAP/TAZ 通路在免疫調節中的作用機制，可為臨床抗腫瘤治療尋求新的靶點，使更多患者在免疫治療中獲益。

[關鍵詞] Hippo-YAP/TAZ 通路;腫瘤免疫調節; PD-1/PD-L1;免疫逃逸;作用機制

[中圖分類號] R730.1 [文獻標識碼] A? [文章編號]2095-0616（2021）22-0049-04

Advances in the study of the role of Hippo-YAP/TAZ pathway in tumor immunity regulation

HAN? Mingyuan?? WANG? Zhenbo

Department of Oncology， Affiliated Hospital of Binzhou Medical University， Shandong， Binzhou 256600， China? [Abstract] Hippo-YAP/TAZ pathway plays an important role in regulating biological functions such as cell proliferation， survival and signal transduction. In recent years， the role of this pathway in tumor immunity regulation has been extensively studied. A variety of studies showed that it not only regulates immune cells in the tumor microenvironment， but also regulates the transcription and translation processes of programmed death-ligand 1（PD-L1） at the messenger ribonucleic acid （mRNA） and protein levels， which further affects the efficacy of programmed cell death-1（PD-1）/PD-L1 immune checkpoint inhibitors. In addition， this pathway bridges the link between drug resistance and immune escape in tumor cells. Therefore， a comprehensive understanding of the mechanism of Hippo-YAP/TAZ pathway in immunity regulation can lead to new targets for antitumor therapy in clinic and enable more patients to benefit from immunotherapy.

[Key words] Hippo-YAP/TAZ pathway; Tumor immunity regulation; Programmed cell death-1/programmed death- ligand 1; Immune escape; Mechanism

近年來，腫瘤免疫檢查點抑制劑（immune checkpoint? inhibitors，ICIs）成為臨床關注的熱點，其中，程序性死亡受體-1（programmed death protein 1，PD-1）/程序性死亡配體-1（programmed death ligand 1， PD-L1）抑制劑在臨床治療中應用較為廣泛。免疫治療的目的是啟動免疫的自我循環過程，即癌癥-免疫周期[1]，該循環中的任何一個環節都會影響免疫治療的效果，接受免疫治療的患者必須具有一定程度的免疫功能;同時，ICIs 的應用會導致某些免疫相關不良事件的發生[2]。因此，免疫耐藥以及尋求更多、更精確的生物標志物成為臨床治療中亟待解決的問題[3]。

Hippo-YAP/TAZ 通路是一個高度保守的信號轉導通路， Yes 相關蛋白（yes-associated protein， YAP）是該通路的轉錄共激活因子，在正常機體內， YAP 以磷酸化的形式參與信號轉導的調節。當 Hippo 通路發生異常或 YAP 過表達時會破壞細胞的增殖-凋亡平衡，從而促進腫瘤的發生[4]。研究發現，該通路在免疫調節過程中發揮著重要作用[5]。因此，本文就 Hippo-YAP/TAZ 通路在腫瘤免疫調節中的作用做一綜述。

1哺乳動物中的Hippo-YAP/TAZ通路

在哺乳動物中，經典的 Hippo 通路主要是由 MST1/2、SAV1、LATS1/2及 MOB1組成的一條激酶鏈，如圖1所示，這一系列的激酶級聯反應最終會抑制 YAP 和轉錄共激活因子 PDZ 結合基序（transcriptional co-activator with PDZ-binding motif，TAZ）的活性。當 Hippo 通路被激活時首先會活化 MST1/2激酶，該激酶與支架蛋白 SAV1形成蛋白復合物，激活 LATS1/2激酶，使其與 MOB1蛋白結合，導致 YAP/TAZ 磷酸化后失活。失活的 YAP/TAZ 與14-3-3結合域結合后滯留在細胞質中，進一步磷酸化及泛素化，并通過蛋白酶體途徑被降解，從而抑制下游基因的表達，減少細胞的過度增殖。反之，當核心激酶鏈中的某個激酶處于失活狀態時，Hippo 通路發生異常，去磷酸化的 YAP/TAZ 則會進入細胞核，由于它們缺乏 DNA 結合位點，需要與 TEA 結構域家族（TEA domain family members， TEADs）結合，形成 YAP/TAZ- TEADs 復合物，進而促進相關靶基因的轉錄與表達，誘導細胞增殖、遷移[6-7]。

2 Hippo-YAP/TAZ通路在腫瘤免疫調節中的作用

2.1 Hippo通路參與調節腫瘤微環境中的多種免疫細胞

腫瘤細胞逃避免疫監視的機制包括抑制抗原的產生或呈遞、促進免疫抑制性細胞的激活和再招募等。腫瘤微環境（tumor micro-environment， TME）中含有多種細胞類型，它們分泌的各種因子會促進慢性炎癥的發生，抑制免疫應答，大大降低腫瘤細胞被免疫細胞監測和清除的可能性[8]。因此，TME 的改變以及免疫細胞的調節在腫瘤的發生、發展中有著重要作用。有文獻指出，Hippo 通路可調節 TME 中的腫瘤相關免疫細胞，包括骨髓源性抑制細胞（myeloid -derived suppressor cells，MDSCs）、腫瘤相關巨噬細胞和調節性 T 細胞等[9]。

MDSCs 是一種未成熟的髓系細胞群，無法分化為具有正常功能的巨噬細胞、樹突狀細胞或中性粒細胞，其促進腫瘤生長及轉移的途徑大致分為4個方面：①抑制抗腫瘤反應，降低免疫細胞對腫瘤的殺傷作用;②重塑 TME;③建立轉移前生態位;④與腫瘤細胞相互作用并促進上皮-間充質轉化。有研究表明，在 Hippo 通路中，胞核內的 YAP-TEAD 復合體能夠驅動腫瘤細胞分泌趨化因子 CXCL5，這種趨化因子會吸引表達 CXCR2的 MDSCs 向 TME 募集，從而抑制抗腫瘤免疫反應。因此，藥物性阻斷 CXCL5-CXCR2信號或抑制 MDSCs 能夠增強抗腫瘤反應[10]。

在腫瘤發生早期，腫瘤啟動細胞（tumor-initiating cells，TICs）呈現單個存在的狀態。Guo 等[11]在肝癌的研究中表明， TICs 中 C-C Motif 趨化因子配體2（C-C Motif chemokine ligand 2，CCL2）與集落刺激因子1（colony stimulating factor， CSF1）是 YAP- TEAD 的靶基因，激活 YAP 可以誘導 CCL2和 CSF1的表達，從而促進 TICs 相關巨噬細胞募集，使腫瘤細胞得以生存。

YAP 還是 T 細胞免疫應答反應的負性調節因子。特異性 YAP 缺乏的 T 細胞中，參與 T 細胞活化、遷移的基因表達水平顯著升高，且在相應的小鼠移植瘤模型中， CD4、CD8陽性的 T 細胞浸潤增加，小鼠移植瘤生長緩慢。而 Hippo 通路中的核心激酶 MST1/2，已被證明是 T 細胞發育、分化和凋亡的重要調節因子，該基因敲除時會導致 T 細胞凋亡增加[12-13]。

值得注意的是，在該通路對天然免疫調節作用的研究中，核心激酶 LATS1/2缺失或 YAP/TAZ 過表達的腫瘤細胞會分泌大量富含核酸的細胞外囊泡，通過 TLRs-Myd88/TRIF 信號增強抗腫瘤免疫反應，抑制腫瘤生長[14]。以上研究均表明，靶向 YAP 聯合免疫治療可能為腫瘤患者提供新的治療策略。

2.2 Hippo通路在mRNA和蛋白水平調控PD-L1的表達

PD-1屬于 CD28家族，是表達于 T 細胞表面的一種免疫檢查點受體。PD-L1是 PD-1的配體之一，在各實體瘤中高度表達。當 PD-1與 PD-L1結合時會抑制 CD8+T 細胞的效應功能，并促進 T 細胞凋亡，從而幫助腫瘤細胞逃避宿主免疫。目前，針對 PD-1/PD-L1的 ICIs 已被廣泛研究，并成功地用于治療包括非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer， NSCLC）在內的各種實體腫瘤和血液惡性腫瘤[15]。

癌細胞表面 PD-L1的異常表達是腫瘤逃避免疫反應的重要機制，并且 PD-L1的表達水平可以作為 ICIs 是否有效的預測生物標志物。但 ICIs 作為一種單一療法，只能啟動患者體內固有的免疫應答反應，如果與其他靶向治療聯合應用，可能會獲得更大的療效[16]。Miao 等[17]發現， YAP 與 PD-L1共同表達于 NSCLC 中，且 YAP 通過與 PD-L1下游的增強子結合調控其表達，用小干擾 RNA 和化合物維泊芬抑制 YAP 表達后， PD-L1的蛋白和 mRNA 表達水平降低。同樣，在黑色素瘤的樣本中，組成型活性 YAP 也會影響 PD-L1的表達水平，敲除 YAP 可以觀察到 PD-L1的表達明顯下降。

TAZ 作為 YAP 的類似物，同樣也引起了眾多研究者的關注。TAZ 和 PD-L1共同表達于乳腺癌、肺腺癌等多種癌癥類型中[18]，過表達的 TAZ 通過轉錄因子 TEAD 家族與 PD-L1的啟動子結合，從而上調 PD-L1的 mRNA 表達水平，抑制效應 T 細胞的功能。因此，深入了解 Hippo 通路與 PD-1/PD-L1的相互作用機制十分必要。

2.3 Hippo通路導致腫瘤細胞耐藥的機制

有文獻指出，抑制 YAP/TAZ 能夠增加化療藥物的細胞毒性，還能提高腫瘤細胞對表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor， EGFR）、 BRAF、MEK 等靶向抑制劑的敏感性[19]。EGFR 是一種跨膜酪氨酸激酶受體，通過參與一系列的信號轉導通路，調控細胞的生長、增殖等。對于存在 EGFR 激酶結構域突變的 NSCLC 來說， EGFR-酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-tyrosine kinase inhibitors， EGFR-TKIs）是一種可供選擇的靶向治療方法，而部分患者在接受 EGFR-TKIs 治療后會產生耐藥性[20]。臨床試驗指出，與厄洛替尼或吉非替尼（EGFR-TKIs）單藥治療相比，聯合抗 PD-1/PD-L1抑制劑的治療并沒有提高客觀反應率，因此，兩藥聯合治療晚期 EGFR 突變型 NSCLC 的療效尚不清楚[21]。EGFR-TKIs 耐藥細胞中 YAP 和 PD-L1的表達水平明顯升高，敲除 YAP 會顯著降低 PD-L1的表達，而同時敲除 YAP、抑制 PD-L1比單藥治療更能有效地減少腫瘤細胞的增殖[22-23]。有研究發現，YAP 的激活增強了 NSCLC 中腫瘤細胞對吉非替尼的抗藥性，使用 YAP 抑制劑維泊芬聯合吉非替尼治療更有效的抑制了腫瘤的侵襲[24]。Yi 等[25]研究了用 EGFR-TKIs 治療 NSCLC 時 TME 的動態變化。 MDSCs 在這個過程中持續升高，且血清中的炎癥因子 IL-10和 CCL-2也同樣升高，在一定程度上解釋了 PD-1/PD-L1抑制劑在 EGFR-TKIs 耐藥的 NSCLC 中療效不好的原因。同樣，黑色素瘤患者在接受 BRAF 抑制劑治療出現進展后，其腫瘤細胞內表現出了 YAP 的過度激活以及 T 細胞衰竭標志物的增加，如 PD-L1，而 YAP 及 TAZ 的敲除抑制了 PD-L1的轉錄和表達。這些研究均提示， Hippo 通路通過上調 PD-L1的表達來抑制 T 細胞功能，進而導致腫瘤細胞耐藥。

3總結與展望

綜上所述，復雜的微環境與不同腫瘤組織之間的差異性使得 Hippo 通路在免疫調節過程中具有多重性作用。目前研究模型多采用黑色素瘤、卵巢癌及 NSCLC 等，對于該通路在其他常見實體瘤中的免疫調節作用以及藥物聯合應用的療效問題仍然值得深入探討。全面了解 Hippo-YAP/TAZ 通路的作用機制，開發以 YAP 為靶點的抗腫瘤藥物，在臨床免疫治療中具有重要指導意義和實際應用價值。

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（收稿日期：2021-05-12）