藥材赤芍的對照藥材薄層色譜法的探索性研究

辛薩如拉

【中圖分類號】R28 【文獻標識碼】A 【文章編號】2107-2306（2021）06-129-01

一.品種的基本情況

中藥材赤芍是毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall.或川赤芍 Paeonia veitchiiLynch的干燥根，具有清熱京血，散瘀鎮痛。用于熱入營血，溫毒發斑，吐血衄血，目赤腫痛，肝郁脅痛，經閉痛經，癓瘕腹痛，跌撲損傷，癰腫瘡瘍。芍藥苷為其主要活性成分藥理研究表明該藥有抗血栓形成作用、能顯著降低重型肝炎患者血清內毒素及血清腫瘤壞死因子，改善肝臟生化指標的作用，此外尚具有鎮靜、鎮痛、抗驚厥、抗炎及抗腫瘤等活性。赤芍在臨床應用廣泛，許多中成藥制劑中都有赤芍成分，劑型有湯劑、片劑、顆粒劑、合劑等，因此赤芍藥材的質量直接影響眾多成藥的質量，需嚴加把控。

二.探索性研究的目的

中藥赤芍在《中國藥典》2020年版一部赤芍項下鑒別（2）的薄層色譜鑒別試驗中，只選擇了芍藥苷作為對照品，而芍藥苷的來源包括毛莨科植物芍藥根、牡丹根、紫牡丹根，所以選用對照藥材對赤芍品種的判斷專屬性更強。

三.本次探索性研究實驗的樣品概況

本次試驗共抽取37家企業生產的47批次樣品，分布情況如下表格

四.開展的探索性研究

（一）對照藥材的選擇與處理方法

按《中國藥典》2020年版一部赤芍項下鑒別（2）規定：取本品粉末0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1mL含2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法通則（0502）試驗，吸取上述兩種溶液個4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，應顯相同的藍紫色斑點。

以上方法的實驗中47批次赤芍均出現了與對照品相應位置上的藍紫色斑點，而且還出現了很多其它斑點，所以此方法應該能提出赤芍藥材飲片的更多成分，用對照藥材做薄層專屬性會更強。以上方法中“濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml使溶解”，的步驟中，考慮溶劑相同情況下不蒸干，直接用濾液作為供試品溶液，省略提取步驟，也作為了本次探索研究方向。

中藥材赤芍是毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall.或川赤芍 Paeonia veitchiiLynch的干燥根，所以對照藥材選擇了赤芍對照藥材和赤芍（川赤芍）對照藥材。

在《中國藥典》2015年版一部益腦寧片檢驗鑒別（3）項下，赤芍對照藥材提取如下：取赤芍對照藥材1g，加水飽和正丁醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液用正丁醇飽和的水洗滌，棄去水洗液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液。

參考了以上兩種提取方法和赤芍藥材的來源，用正丁醇提取的赤芍對照藥材，用乙醇提取，過濾未經蒸干，溶解的47批次赤芍樣品和赤芍對照藥材，赤芍（川赤芍）對照藥材，芍藥苷對照品溶液及空白溶液點與同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。

圖中起點上的1、2、3、4、9、10、12為本次專項抽驗的樣品，5為正丁醇提取的赤芍對照藥材，6為乙醇提取的赤芍對照藥材，7為乙醇提取的對照藥材，8為芍藥苷對照品，11為空白溶液。

5、6、7、8、9起點展開后有共同峰一個藍色斑點1。

5、6、7、9起點展開后都有相應位置的1、2點。

5、6、7、9起點展開后都有相應位置的1、2、3、4點，其中5和9起點展開后出現的點的顏色一致，1為藍紫色，2是紅色，3是淡紫色，4是棕色。

實驗后得出結論：赤芍對照藥材和赤芍（川赤芍）對照藥材都可以在赤芍藥材飲片的薄層色譜鑒別中出現較好的重復性，和鑒別功能，赤芍（川赤芍）考慮到來源不能覆蓋所有赤芍，所以選赤芍對照藥材更為準確。赤芍對照藥材的薄層色譜應用中，正丁醇提取的對照藥材溶液出現斑點與藥材色譜中相應的斑點數多，一致性強，但是操作繁瑣，提取費時。乙醇提取的對照藥材溶液操作簡單快捷，且明顯的紅色與藍紫色斑點特征能有效判斷赤芍藥材。

（二）薄層板的選擇

在《中國藥典》2020年版一部赤芍鑒別（2）項下的檢驗中未見熒光斑點，所以本次薄層色譜法的探索中選擇硅膠G板和H板做對比實驗。

點于G板的結果如圖1。

點于H板后出現的薄層色譜，展開內容不明確，如下圖

（三）點樣量的選擇

在《中國藥典》2020年版一部赤芍鑒別（2）項下的檢驗中芍藥苷對照品點4μl ，供試品4μl，本次探索性研究中，考慮未經過蒸干再溶解的濃縮過程，將對照品，對照藥材及供試品均點6μl實驗。結果如下圖

圖中從左到右分別為赤芍供試品，芍藥苷對照品，赤芍對照藥材，赤芍供試品。

可見圖中兩邊的供試品分離不徹底，藍紫色斑點厚重有重影，而對照品和對照藥材分離的干凈，斑點清晰。

從以上實驗的經驗中再將對照品，對照藥材各6μl，樣品4μl點于薄層板上，結果如圖5，分離效果清晰明確。

（四）系統適應性

圖3中基線原點至點1的距離為45mm，至點2的距離為63mm，展距為100mm，Rf1=45/100=0.45 ， Rf2=63/100=0.63符合《中國藥典》2020年版四部通則0502規定的0.2～08之間為宜。

（五）結論：取赤芍藥材或飲片粉末0.5g，加乙醇10ml，振搖5分鐘，濾過，作為供試品溶液。另取赤芍對照藥材作同法制成對照藥材溶液。再取芍藥苷對照品，加乙醇制成每1mL含2mg的溶液，。照薄層色譜法通則（0502）試驗，吸取上述對照品溶液6μl，對照藥材溶液6μl，供試品溶液4μl分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，應顯相同的藍紫色斑點，在與對照藥材色譜相應的位置上應顯相同顏色的藍紫色半點與紅色斑點。

五.實驗結果

本次實驗選取的47批次赤芍品種通過（五）結論的方法提取、展開、顯色、晾干，得出的薄層色譜在與對照品色譜相應的位置上，都顯相同的藍紫色斑點，在與對照藥材色譜相應的位置上都顯相同顏色的藍紫色斑點與紅色斑點，數據證明簡化實驗步驟，加赤芍對照藥材的薄層色譜法操作簡單，專屬性更強。

參考文獻：

[1]《中國藥典》2020年版一部

[2]《中國藥典》2020年版四部