巨核細胞胞核形態在3種骨髓增殖性腫瘤鑒別診斷中的價值

張成林，蔣琪琪，王珍

（重慶三博長安醫院檢驗科，重慶 400023）

0 引言

骨髓增殖性腫瘤（MPN）是臨床常見病癥之一，屬于克隆性造血干細胞紊亂性疾病的一種，以骨髓細胞連續增殖為主要特點，包括早期原發性骨髓纖維化（PMF）、真性紅細胞增多癥（PV）、原發性血小板增多癥（ET）等疾病類型，若無法得到及時治療，隨著疾病進展，可引起骨髓衰竭或急性白血病，進而提高病死率[1]。在以上3種MPN疾病中，臨床初次診斷時患者血常規通常表現為巨核細胞系統增殖、紅細胞系統增殖或粒細胞系統增殖等情況，患者外周血中血紅蛋白、白細胞和血小板均可出現不同程度升高[2]。目前，臨床多采取骨髓活檢分析方法對MPN進行鑒別診斷，但易受到其他因素影響，進而降低診斷準確性。本次選取90例MPN患者，研究3種MPN鑒別診斷中巨核細胞胞核形態的應用價值，報道見下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月至2021年1月我院收治的90例MPN患者為研究對象，納入標準：（1）均為首次入院；（2）經臨床確診為MPN；（3）骨髓取材質量均合格；（4）具有完整臨床資料；（5）簽署知情同意書。排除標準：（1）合并血液系統疾病者；（2）合并精神疾病者；（3）合并惡性腫瘤者；（4）中途退出者；（5）合并惡性腫瘤者?；仡櫺苑治龌颊吲R床資料，入組病例中，男51例，女39例；其中早期PMF患者22例（男14例，女8例），年齡50-78歲；ET患者37例（男16例，女21例），年齡34-80歲；PV患者31例（男21例，女10例），年齡43-65歲。

1.2 方法

對患者骨髓涂片均應用瑞姬染色，選用光學顯微鏡進行觀察，于標準范圍內（1.5cm×3.0cm）使用低倍鏡定位巨核細胞；于油鏡下對各型巨核細胞進行分類計數；對3種MPN中各型巨核細胞胞核的占比進行觀察，并得出各類疾病中各型形態的臨界百分比，大于臨界百分比為陽性，對各組陽性預測值、診斷效率、特異性及敏感度進行計算，以診斷效率為依據，對優勢核型和各疾病組相關性進行判斷。

1.3 統計學分析

數據經SPSS 19.0軟件分析，計量、計數資料分別經t、χ2檢驗，P<0.05則表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組各型巨核細胞胞核占比對比

巨核細胞胞核形態分為3種類型，包括高分葉型、核固縮型及低分葉型巨核細胞。與早期PMF組、PV組比較，ET組高分葉型巨核細胞檢出率更高，差異顯著（P<0.05）；與ET組、早期PMF組比較，PV組低分葉型巨核細胞檢出率更高，差異顯著（P<0.05）；與ET組、PV組比較，早期PMF組核固縮型巨核細胞檢出率更高，差異顯著（P<0.05），見表1。

表1 三組各型巨核細胞胞核所占百分比比較（，%）

表1 三組各型巨核細胞胞核所占百分比比較（，%）

注：與PV組比較，*P<0.05；與ET組比較，#P<0.05；與早期PMF組比較，△P<0.05

2.2 優勢核型臨界百分比分析

ET組中高分葉型巨核細胞、PV組中低分葉型巨核細胞及早期PMF組中核固縮型巨核細胞的臨界百分比分別為21.8%（32.12%-9.34%）、24.9%（30.84%-5.97%）和16.2%（18.62%-2.38%）。

2.3 三組診斷效能對比

ET組中高分葉型巨核細胞、PV組中低分葉型巨核細胞及早期PMF組中核固縮型巨核細胞的陽性預測值分別為95.2%、85.4%和96.3%。PV組>臨界百分比24.9%為陽性，ET組>臨界百分比21.8%為陽性，早期PMF組>臨界百分比16.2%為陽性。ET中高分葉型巨核細胞占比>21.8%時、PV中低分葉型巨核細胞占比>24.9%時及早期PMF中核固縮型巨核細胞占比>16.2%時，診斷效率分別為90.1%、87.9%和97.2%，見表2。

表2 三組診斷效能比較

3 討論

MPN具有較高發病率，包括ET、早期PMF和PV等疾病，其中ET屬于慢性疾病的一種，以血栓形成、出血傾向等為主要表現，研究發現，在ET患者外周血指標檢測中，相較于普通人群，其血小板呈明顯升高趨勢，可持續增多>450×109/L，且患者骨髓巨核細胞出現過度增生情況，巨核細胞對于血小板生成素（TPO）的敏感性更高[3-5]。通常情況下，當血小板增多時，TPO可保持正常范圍，血漿TPO水平也可出現增高情況，而在該種情況發生時，常提示著TPO受體出現下調或血小板/巨核細胞表達存在缺陷等，以損傷TPO結合及清除[6-7]。在結合出現缺損情況下，巨核細胞仍然能夠對TPO反應表現出較高敏感性，進而導致血小板合成過多，同時引起巨核細胞過度增殖。ET患者的骨髓增生活躍程度維持在正常狀態，而巨核細胞呈現出分散分布情況，而高分葉型巨核細胞過度增殖[8]。對于早期PMF患者來說，其巨核細胞大小存在著較大差異，核與胞質比出現失常情況，易出現核固縮型巨核細胞，或呈現出不規則折疊情況的核，以巨核系增生及粒系增生為主，骨髓增生過度，未見或僅可見少量髓外造血或結締組織沉積，患者發病初期，骨髓呈現出極度增生趨勢，巨核細胞大小具有較大差異，并成簇分布[9]。臨床研究發現，早期PMF與ET在臨床表現上存在著較大相似之處，且實驗室檢查相近，極易出現混淆情況[10]。PV與ET類似，也屬于慢性疾病的一種，以粒細胞、巨核細胞和紅細胞增生為主要表現，臨床癥狀多為出血和血栓形成，臨床將其分為兩個階段，即紅細胞增多期及增多后期，后者多表現為肝脾腫大、髓外造血等癥狀，少數患者可出現骨髓纖維化癥狀。臨床診斷PV的主要標準包括：（1）IAK2發生突變；（2）男性患者HCT>49%，女性>48%；或男性HGB>165g/L，女性HGB>160g/L；（3）骨髓活檢發現，三系具有高增殖的巨核細胞[11-12]。而診斷次要標準為，患者血清EPO水平<正產范圍。PV臨床確診需符合3個主要標準，或符合第2、第3主要標準和次要標準。在年齡發生調整后，骨髓增生活躍程度表現為輕度活躍或中度活躍，巨核細胞大小存在一定差異，成熟情況處于正常狀態[13]。在JAK2基因V617F突變定量檢測顯示陽性，且HCT>49%、HGB>165g/L時，以世界衛生組織（WHO）確定的PV診斷標準，若符合3條主要標準，患者就可被確診為PV。血小板（PLT）≥450×109/L時，可達到ET數量要求，但以WHO所規定ET診斷標準，少數患者可同時具有ET特征，但臨床診斷ET時，要求不可符合PV診斷標準，由此，臨床對于ET和PV的鑒別診斷難度較大[14]。

本研究結果顯示，與早期PMF組、PV組比較，ET組高分葉型巨核細胞檢出率更高；與ET組、早期PMF組比較，PV組低分葉型巨核細胞檢出率更高；與ET組、PV組比較，早期PMF組核固縮型巨核細胞檢出率更高；ET中高分葉型巨核細胞占比>21.8%時、PV中低分葉型巨核細胞占比>24.9%時及早期PMF中核固縮型巨核細胞占比>16.2%時，診斷效率分別為90.1%、87.9%和97.2%，提示ET、早期PMF及PV患者，均可表現為三系增生，且均可出現三種巨核細胞胞核，應用巨核細胞胞核形態對疾病進行鑒別診斷，具有較高準確度。究其原因，PV與低分葉型巨核細胞、ET與高分葉型巨核細胞、早期PFM與核固縮型巨核細胞，均具有直接相關性，可將巨核細胞胞核形態作為診斷不同MPN疾病的輔助指標。

綜上所述，不同MPN鑒別診斷中應用巨核細胞胞核形態，可有效提高診斷效率，且具有操作簡單、結果直觀等優勢，應用價值較高。