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BD BACTECTMFX200全自動血培養儀的性能評價

2021-09-21 21:45:22郭麗娜
醫學食療與健康 2021年13期

【摘要】目的:對BD BACTECTM FX200全自動血培養儀進行性能評價。方法:選用24株臨床已分離菌株及標準菌株進行檢測,評價儀器的準確性,采用轉種平板的方法, 回顧性分析2019年6月至12月968份血培養的結果,分析陽性率、陽性檢出時間、檢出菌種類、假陽性率及假陰性率等的性能評價指標。結果:在模擬20份樹脂需氧瓶中,19份在72h內報陽,陽性檢出率為95%。在模擬20份溶血素厭氧瓶和樹脂兒童瓶中在72h內全部報陽,陽性檢出率為100%。報陽轉種的病原菌經Phoenix 100鑒定后,與已知病原菌一樣,準確性為100%。968份臨床血培養標本,120份陽性,陽性率12.4%,最快陽性報警時間2h,假陰性率0.47%,假陽性率為4.0%。結論:FX200血培養儀操作簡便,檢測速度快,準確性高,既提高血培養陽性率,又縮短報陽時間。

【關鍵詞】BD BACTECTM FX 200;全自動血培養儀;病原菌;性能評價

[中圖分類號]R446 [文獻標識碼]A [文章編號]2096-5249(2021)13-0144-02

BD BACTECTM FX 200為微生物快速培養系統, 可對菌血癥患者血液里的病原菌進行快速靈敏檢測, 同時也可檢測體內無菌部位標本。能為臨床更快提供檢驗結果,便于臨床診斷治療及用藥[1], 現根據CNAS-GL028文件要求,對該血培養儀進行性能評價,結果如下。

1 材料與方法

1.1菌株來源 我院自2019年1月至6月在血培養陽性標本中分離的21株病原菌,經過Phoenix 100鑒定且經microTyper MS質譜儀分析確認。分別為肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、熱帶假絲酵母菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、屎腸球菌、糞腸球菌、肺炎克雷伯菌、無乳鏈球菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌、陰溝腸桿菌、產酸克雷伯菌、粘質沙雷菌、奇異變形桿菌、化膿鏈球菌、藤黃微球菌、表皮葡萄球菌、卡他莫拉菌、產氣莢膜梭菌。還有3株病原菌為標準菌株大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌,標準菌株購自中國工業微生物菌種保藏管理中心。

1.2臨床標本 我院自2019年6月至12月經BD BACTECTMFX200檢測的血培養標本共計968份。

1.3儀器與試劑 BD BACTECTM FX 200、樹脂需氧瓶、溶血素厭氧瓶、樹脂兒童瓶、Phoenix 100鑒定系統、microTyper MS質譜儀、BD革蘭氏陰性細菌鑒定/藥敏板、BD革蘭氏陽性細菌鑒定/藥敏板、PhoenixTM酵母菌鑒定板。

1.3方法 ①準確性評價:先配置麥氏0.5菌懸液,9.9 mL生理鹽水加0.1 mL菌懸液稀釋兩次,9.8 mL生理鹽水加0.2 mL菌懸液一次,稀釋三遍后相當于菌懸液濃度為300 CFU/mL,加100uL稀釋后的菌懸液至3 mL無菌血液中即制備成接種至樹脂需氧瓶或含溶血素厭氧瓶的模擬標本(菌量為10 CFU/瓶),加100uL稀釋后的菌懸液至1 mL無菌血液中即制備成接種至樹脂兒童瓶的模擬標本(菌量為30CFU/瓶)。另取100uL生理鹽水加入需要量無菌血液中,作為陰性對照。將制備好的模擬標本打入相應培養瓶中, 按操作步驟放置血培養儀中,并記錄報陽時間,吸取報陽瓶中的培養液轉種于血平板、沙保羅、巧克力平板,放在5%CO2培養箱中培養18~24h,過夜培養的菌株用Phoenix 100進行鑒定。后續經microTyper MS質譜儀分析確認,比較不同病原菌在相同濃度時儀器報陽時間的差別及鑒定結果與已知菌株的一致性。②性能指標評價:按照血培養儀的標準規程培養臨床血標本,并轉種至血平板、沙保羅、巧克力平板進行培養及鑒定,根據鑒定結果對儀器的陽性率、陽性檢出時間、檢出菌種類、假陽性率及假陰性率進行評價。

2 結果

2.1培養分離 菌株樹脂需氧瓶中,除藤黃微球菌未報陽性,其余19份均在72h內報陽,陽性檢出率95%。鑒定結果與已知菌株一致,準確性100%。在溶血素厭氧瓶和樹脂兒童瓶中,20份模擬樣本72h內均報陽,陽性檢出率100%,培養分離菌株鑒定結果與已知菌株一致,準確性100%。

2.2檢出菌種類分布及構成比 968份臨床血標本中,120份陽性標本,陽性率12.4%,其中革蘭氏陰性菌占58.3%、革蘭氏陽性菌占35.8%、酵母菌占5.8%,大腸埃希菌陽性報警時間最快(2h),假陰性率0.47%,假陽性率4.0%(見表1),檢出菌種類分布及構成比見表2。

3 討論

血流感染是醫院常見嚴重的感染性疾病,有相關文獻報道:革蘭氏陰性菌造成的血流感染多于革蘭氏陽性菌造成的血流感染[2-3], 與本文檢出的病原菌分類一致。

本實驗模擬的20份血培養標本中,溶血厭氧瓶在72h內報陽率100%,報陽平均時間13時52分。除了產氣莢膜梭菌為專性厭氧菌外,其余19株病原菌均為兼性厭氧菌,說明厭氧瓶兼具檢出專性厭氧菌和兼性厭氧菌的能力。溶血厭氧瓶與樹脂需氧瓶所選用的病原菌有16株一樣的,在相同濃度、病原菌情況下,除肺炎鏈球菌和卡他莫拉菌外,其余14株厭氧培養報陽時間均早于樹脂需氧培養,與文獻中提到雙瓶均報陽,厭氧瓶報陽時間早于需氧瓶的報道一致[4],究其原因,我認為可能是厭氧培養瓶中營養成分比需氧培養瓶好,有些兼性厭氧菌僅在厭氧培養瓶中生長。因此建議臨床對疑似血流感染患者抽取血培養時,要采集雙瓶雙側,分別做需氧和厭氧培養。

在968份臨床標本中,報陽時間最快的是大腸埃希菌,因為此菌屬于腸桿菌科,兼性厭氧菌,在普通瓊脂平板即可生長,發酵葡萄糖產酸產氣,這與BD血培養儀檢測原理一致。本文中儀器假陽性率為4.0%,可能原因有:①抽血量過多;②厭氧菌及苛養菌的存在,沒有選擇適合的培養方式及平板;③室溫高于28℃;④培養箱電壓及溫度不穩定。將經血培養儀培養5 d報陰性的瓶子取出,轉種于血平板、沙保羅及巧克力平板,發現4份血培養標本為假陰性,假陰性率為0.47%,3份真菌,1份奴卡菌。產生原因:①血液標本采集后,放在室溫時間過長;②血液采集量不足,兒童少于1 mL,成人少于3 mL,產生的CO2量不足以激發熒光系統而造成假陰性;③采集標本時剛剛或正在使用抗生素;④未抓住采集合適時機;⑤消毒酒精未完全揮發時進行標本采集。因此,血培養瓶經儀器培養5 d后報陰時,應轉種血平板、沙保羅、巧克力平板,以確認是否為真陰性。

綜上所述,BD BACTECTM FX 200全自動血培養儀操作簡便,準確性高,檢出速度更快捷,大大提高血培養的陽性率,縮短報陽時間,為患者治療贏取寶貴時間。

參考文獻

[1] 向成玉. A 項BacT /ALERT 3D 與B 項BACTEC FX 的血培養系統比對及性能評價[J]. 實用醫院臨床雜志2017, 14(1): 96-98.

[2] 廖忠, 葉杰, 陳振南. 全自動血培養儀陽性病原菌種類及報警時間分析[J]. 中國醫學創新, 2013, 10(4): 6-8.

[3] 閆文婧, 于建華. 全自動血培養儀陽性病原菌種類及報警時間分析[J]. 醫學檢驗與臨床, 2017, 28(6): 52-54.

[4] 王玉月, 殷瀟嫻, 毛易捷, 等. 需養與厭氧配對培養在血流感染診斷中的價值[J]. 臨床檢驗雜志, 2015, 33(7): 510-512.

作者簡介:郭麗娜(1982.12-),女,漢族,陜西省渭南市人,大學本科,主管檢驗師,研究方向:細菌耐藥機制。

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