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湘西“蒿菜粑粑”原料植物鼠麴草營養評價及抗氧化活性分析

2021-10-09 01:33:58陳加蓓李貴陳璇王璐陳功錫
食品與發酵工業 2021年18期

陳加蓓,李貴,陳璇,王璐,陳功錫*

1(吉首大學 藥學院,湖南 吉首,416000)2(吉首大學 生物資源與環境科學學院,湖南 吉首,416000)3(中南大學 生命科學學院,湖南 長沙,410078)

鼠麴草(GnaphaliumaffineD.Don)為菊科鼠麴草屬一年生藥食兼用型草本植物,廣泛分布于我國臺灣、華中、華東、華南、華北、西北及西南各省區,是我國傳統中草藥,具有抗菌、抗氧化、平喘等生物活性,其莖葉既可做祛痰、鎮咳以及非傳染性潰瘍藥物,又兼有降血壓的療效[1-3]。現代研究證實,鼠麴草含有多種活性成分及人體所必需的物質,如黃酮類、氨基酸、多糖等[3-4]。通過對鼠麴草黃酮類、植物甾醇、三萜類和咖啡酸衍生物等化學成分研究,發現其在抗炎、黃嘌呤氧化酶抑制和腎保護等方面具有優良藥理活性[3,5-9]。

鼠麴草是湘西民族傳統特色食品“蒿菜粑粑”2種主要原料植物之一。用糯米和鼠麴草幼嫩莖葉加工制作的蒿菜粑粑(俗稱“粉粑”)鮮美可口,深受人們喜愛,已有悠久的歷史。此外,鼠麴草也可作為野菜食用和泡茶飲,還可以加工成包子、臭豆腐等食品[3,10-13],可見該植物確實具有較廣闊的食用前景。為了揭示鼠麴草營養特性,本課題組曾于2015年對其幼嫩莖葉營養成分進行了初步測定[14],得到了相關數據,為該植物營養價值綜合評價奠定了基礎。但鑒于方法陳舊、測定指標不全等條件限制,研究深度受限,所以很有繼續深入開展這項工作的必要。本研究以鼠麴草為材料,對其氨基酸、礦物質元素及其他營養成分進行全面測定與分析評價,并對其提取物進行體外抗氧化實驗,探討其抗氧化能力,以期為鼠麴草植物的進一步深入研究與應用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

實驗用“蒿菜粑粑”原料鼠麴草樣品(經吉首大學張代貴高級工程師鑒定為鼠麴草GnaphaliumaffineD.Don),于2019年4月采自湖南省吉首市吉首大學砂子坳校區對面山及后山。將鮮鼠麴草洗凈晾干后于50 ℃恒溫干燥,粉碎,過30目篩,裝袋備用。

PrimacsSN蛋白質分析儀,荷蘭SKALAR分析儀器公司;S433D全自動氨基酸分析儀,德國Sykam公司;UPLC超高液相色譜儀,美國Waters公司;LC液相色譜儀,日本島津公司;ICAP Q電感耦合等離子體質譜儀,美國Thermo Scientific公司;TTL-DC Ⅱ型氮吹儀,北京同泰科技發展有限公司;SHB-Ⅲ循環水式多用真空泵,鄭州長城科工貿有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 常規理化指標測定

本研究選取以下指標進行測定:蛋白質、脂肪、氨基酸組成、礦物質元素及部分維生素等營養成分及多糖、總多酚、總黃酮等功能成分。由于脂肪酸主要存在于植物種子中,本研究所用材料為植物的幼嫩莖葉,故未測定脂肪酸組成。

1.2.1.1 營養成分測定

參照國家標準進行。蛋白質:GB 5009.5—2016;脂肪:GB 5009.6—2016;能量、碳水化合物:GB 28050—2011;水分、灰分:GB 5009.3—2016、GB 5009.4—2016;粗纖維、膳食纖維[總膳食纖維(total dietary fibre,TDF)、可溶性膳食纖維(soluble dieary fibre,SDF)及不溶性膳食纖維(insoluble dietary fiber,IDF)]:GB/T 5009.10—2003、GB 5009.88—2014;氨基酸:GB 5009.124—2016,其中色氨酸參照GB/T 15400—2018、胱氨酸參照GB/T 15399—2018;礦物質元素:GB 5009.268—2016;維生素A、維生素D、維生素E:GB 5009.82—2016;維生素C:GB 5009.86—2016;維生素B1、維生素B2、維生素B3:GB 5009.84—2016、GB 5009.85—2016、GB 5009.89—2016。含量均以干重計。

1.2.1.2 粗多糖的測定

按照SN/T 4260—2015中的苯酚硫酸比色法。

1.2.1.3 總多酚含量測定

參考GB/T 8313—2018。

1.2.1.4 總黃酮含量測定

按照曲線方程y=0.016 6x-0.023 1,r2=0.998 7[15]。

1.2.2 提取物抗氧化活性測定

提取物的提取:向5 g鼠麴草粉加入100 mL石油醚,浸泡5 h,超聲處理30 min,抽濾,所得濾渣于室溫揮干。處理后的樣品,用95%(體積分數,下同)乙醇以25∶1的液料比(按脫脂前的質量計),超聲提取30 min,抽濾,減壓濃縮,所得浸膏,即為鼠麴草乙醇提物,于室溫保存,用于體外抗氧化實驗。水提物的提取與醇提物基本一致,不同之處為將95%乙醇換成蒸餾水。

1.2.2.1 對DPPH自由基清除效果

參考王翔等[16]的方法。取一定量的DPPH,用95%乙醇溶解并配制成 0.058 mg/mL溶液。將樣品與其他試劑的量均擴大1倍,在517 nm測定吸光度值。

1.2.2.2 對ABTS陽離子自由基清除效果

參考王翔等[16]的方法。將樣品與其他試劑的量均擴大0.5倍,在731 nm波長下檢測。

1.2.2.3 總還原能力測定

參考馮小雨等[17]的方法。

1.2.2.4 鐵還原能力(ferric reducing ability of plasma,FRAP)的測定

參考XU等[18]的方法。將樣品與其他試劑的量均擴大1倍,在599 nm測定。

1.2.2.5 β-胡蘿卜素褪色實驗

參考李臻等[19]的方法。6 mg β-胡蘿卜素溶于1 mL氯仿,加入40 μL亞油酸,400 μL吐溫80,充份混勻。旋轉蒸發除去氯仿,立即加入10 mL蒸餾水,將溶液轉移至250 mL容量瓶,用0.01 mol/L H2O2配成250 mL。取10 mL于試管,并加入1 mL樣品溶液、陽性對照(維生素C 和2,6-二叔丁基對甲酚(butylated hydroxytoluene,BHT)(20 mg/L)、空白溶劑(正常對照組),混合均勻,置于50 ℃水浴中,每30 min于470 nm測定吸光度值,直至胡蘿卜素相關色度百分比小于25%。計算過程如公式(1)所示:

β-胡蘿卜素色度百分比/%

(1)

式中:Acontrol,空白組的吸光度;Atest,樣品組的吸光度;t,反應時間,min。

1.2.2.6 硫氰酸鐵(ferric thiocyanate,FTC)實驗測定

參考張京芳等[20]的方法。

1.2.2.7 硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)實驗測定

取FTC實驗的反應液1 mL,加入2 mL 20%(體積分數)的三氯乙酸水溶液和2 mL 0.67%(體積分數)的TBA溶液,混勻后,置于沸水浴反應10 min。冷卻后3 000 r/min離心20 min,取上清液于533 nm下測定吸光度值。樣品的抗氧化活性是以FTC實驗最后一天所測定的吸光度值來計算,即正常對照組的吸光度值達到最大值的第2天所測定的數值。

(2)

式中:As,標準吸光度值;Ai,樣品吸光度值。

1.2.3 營養成分評價

因鼠麴草“蒿菜粑粑”可作主食,故對其進行營養評價時,選擇與“蒿菜粑粑”的另一主體原料糯米、山區常見雜糧玉米和土豆等農作物對比;且鼠麴草食用部位為鮮嫩莖葉,具有蔬菜的性質,故又選擇與大白菜、菠菜、香菜3種常見蔬菜對比[21]。

1.2.3.1 氨基酸營養價值評價

參照張幸等[14]和姚清華等[22-23]的方法。

1.2.3.2 礦物質和維生素營養價值評價

參照陳保等[24]的計算方法。

1.2.4 數據處理

樣品平行測定3次,結果以平均值±標準差的形式表示,使用Microsoft office Excel 2010統計軟件、Origin Pro 9.1繪圖軟件進行數據處理與圖表制作。

2 結果與分析

2.1 基本營養成分含量

檢測發現,鼠麴草能量為981.00 kJ/100g、蛋白質含量為12.21 g/100g、脂肪含量為1.31 g/100g、碳水化合物含量為24.20 g/100g、水分含量為9.67 g/100g、灰分含量為12.88 g/100g。

比較發現,鼠麴草蛋白質含量與灰分含量均高于上述6種作物;脂肪含量高于糯米、土豆、大白菜、菠菜,低于玉米、香菜;水分含量高于菠菜、香菜,低于大白菜、玉米、糯米、土豆;能量、碳水化合物均低于玉米、糯米、土豆和其他3種蔬菜。比張幸等[14]報道的蛋白質、灰分含量高,脂肪含量略低。因此,可以認為鼠麴草是一種高蛋白和脂肪、礦物質豐富、低能量、低碳水化合物的特色植物。

檢測發現,鼠麴草粗纖維含量為27.53 g/100g,總膳食纖維(TDF)含量為46.80 g/100g,不溶性膳食纖維(IDF)含量為45.44 g/100g,可溶性膳食纖維(SDF)含量為0.20 g/100g,由此可見鼠麴草是一種總膳食纖維與不溶性膳食纖維含量豐富、低可溶性膳食纖維的植物。

對比發現,鼠麴草粗纖維含量介于張幸等[14]報道的范圍內;TDF含量比玉米、糯米、土豆、大白菜、菠菜、香菜中高[21],且除高出糯米約50倍外,其他均高出約3倍或以上。由于常吃富含粗纖維的食物對高脂血癥和心血管等疾病有較好的防治功能,且粗纖維食用量適當不會降低其他營養素的利用率;膳食纖維能夠預防糖尿病及肥胖這2種同時出現的健康問題,降低糖胖癥的發病風險[25-26],且TDF含量越高膳食纖維生理功能越佳,故可認為鼠麴草是比較理想的粗纖維和膳食纖維源植物,具有較好的功能價值。

2.2 氨基酸組成與評價

2.2.1 氨基酸組成

如表1所示,鼠麴草氨基酸種類齊全,至少含有18種氨基酸,且氨基酸總量(total amino acid,TAA)為10.30 g/100g,其中谷氨酸含量最高,其次為天冬氨酸(部分可能由天冬酰胺水解產生),色氨酸與胱氨酸含量最低,這與王世寬等[27]的研究結果近似,說明鼠麴草確實為高谷氨酸和天冬氨酸含量資源植物。與大豆[21,28]相比,雖然鼠麴草蛋白質含量和氨基酸總量較大豆略低,但其氨基酸組成卻與大豆基本類似。現代研究證實谷氨酸、天冬氨酸有促進體內蛋白合成、調節腦和神經代謝、提高自身免疫力等多種功能;精氨酸有利于膠原和纖維的增殖合成以及助于傷口愈合[22]。鼠麴草富含多種氨基酸,尤以谷氨酸、天冬氨酸更豐富,當是保健類食品和術后患者的優質膳食資源。

2.2.2 必需氨基酸

鼠麴草含有全部8種人體必需氨基酸及2種兒童必需氨基酸,必需氨基酸總量達3.63 g/100g,兒童氨基酸含量分別為0.48和0.62 g/100g;總必需氨基酸(total essential amino acids,TEAA)/TAA與TEAA/總非必需氨基酸(total nonessential amino acid,TNAA)比例分別為35.23%和54.40%(表1),與聯合國糧食及農業組織(Food and Agriculture Organization of the United Nations,FAO)/世界衛生組織(World Health Organization,WHO)標準值相接近(36.35%,57.11%)。一般認為,各類蛋白質氨基酸組成比例與FAO/WHO標準值相接近,所含必需氨基酸比例與人體必需氨基酸的比例越接近,便可認定這樣的植物品質好、營養價值高。從氨基酸平衡角度來看,鼠麴草氨基酸組成模式與人體蛋白質氨基酸相接近;從必需氨基酸組成比例來看,盡管鼠麴草與大豆[21,28]的氨基酸組成比例略有不同,但是它們均有8種必需氨基酸及2種兒童必需氨基酸,且鼠麴草TEAA/TAA比例還高于大豆,故鼠麴草比大豆的更接近人體必需氨基酸的比例。因此推斷,鼠麴草蛋白質具備開發成高生物價蛋白質的潛能。

表1 鼠麴草中氨基酸的含量(干重,n=3) 單位:g/100g

2.2.3 風味氨基酸

鼠麴草呈味氨基酸含量為4.45 g/100g,其中呈鮮味氨基酸(Glu和Asp)含量>呈甘味氨基酸(Gly和Ala)含量(2.73 g/100g>1.10 g/100g),酸味類氨基酸含量為2.73 g/100g,甜味類氨基酸含量為2.86 g/100g,苦味類氨基酸含量為3.68 g/100g(表2)。鼠麴草中風味氨基酸含量由高到低依次為呈味氨基酸>苦味類氨基酸>甜味類氨基酸>酸味類氨基酸。食物味道的鮮美程度首要由其蛋白質中呈味氨基酸的組成與含量決定[29],而鼠麴草呈味氨基酸豐富,其中呈鮮味氨基酸含量高于呈甘味氨基酸含量,故鼠麴草所具有的鮮味特征可增強其整體風味的鮮味感官,具有開發成調味產品原料的潛質。

表2 鼠麴草中風味氨基酸與不同結構氨基酸的含量(n=3)Table 2 Contents of flavor amino acids and different structure amino acids in Gnaphalium affine (dry weigh, n=3)8

2.2.4 不同結構氨基酸

如表2所示,鼠麴草含硫氨基酸含量為0.24 g/100g,支鏈氨基酸含量為1.82 g/100g,芳香族氨基酸含量為0.87 g/100g。支芳比為2.10,與鴿肉、雞肉及大東風螺、九孔鮑等多種名優水產肉類和大豆比值相近[22,30-31],比健康人和哺乳動物肝受傷(1.0~1.5)時的支芳比高[22]。現代研究證實高支、低芳氨基酸及混合物可起到保肝作用[32],加之有研究發現鼠麴草具有保肝作用[3-4],這從側面證明可通過食用鼠麴草保護人體肝臟。此外,支鏈氨基酸能影響蛋白質的分解與合成,具有增強免疫力、調節代謝等生理作用;芳香族氨基酸是合成人體重要的神經遞質、腎上腺素等激素的前體或原料,如果缺乏將影響腦代謝以及致使苯酮尿癥等疾病的發生[22,33-34]。比較發現,本研究中鼠麴草支鏈氨基酸含量高于桑葚[35],芳香族氨基酸含量高于毛木耳[23],可見鼠麴草含有較高的支鏈氨基酸和芳香族氨基酸。說明鼠麴草植物不僅具有保肝功效,而且很可能具有影響蛋白質合成、分解及調節代謝的功效,這對人體健康十分有益。

2.2.5 氨基酸評分

通過表3、表4數據,依據食物蛋白質最低氨基酸分為該食物蛋白質得分原則,計算鼠麴草氨基酸評分為0.61,含硫氨基酸(Met+Cys)為第一限制性氨基酸。鼠麴草氨基酸比值系數分(score of ratio coefficient,SRC)值為80.90,表明鼠麴草蛋白質氨基酸組成與FAO/WHO規定(SRC=100)的相類似,具有較高的蛋白營養價值。此外,鼠麴草蛋白質還有較高的芳香族氨基酸含量[Phe+Tyr,氨基酸比值系數(ratio coefficient of amino acid,RC)達到1.27],因此可作為補充芳香族氨基酸的食物來源。對比發現,鼠麴草氨基酸評分和SRC值均比大豆高,第一限制性氨基酸與大豆無異[21,28]。可見,從氨基酸角度來言,鼠麴草也確是高營養價值的優質蛋白來源植物。

表3 鼠麴草氨基酸的評分Table 3 Amino acid score in Gnaphalium affine

表4 鼠麴草限制性氨基酸的組成Table 4 Limiting amino acid compositon in Gnaphalium affine

2.3 礦物質含量及營養評價

如表5所示,鼠麴草含有25種礦物質元素,尤其富含K、Ca、Mg、Al、Fe、Mn、Zn等多種人體所需的礦物質元素,其中以K含量38 508.15 mg/kg為最高,其次依次為Ca、Mg、Al、Fe、Mn、Zn等,含量分別為9 213.5、2 605.24、1 190.07、1 134.42、265.84、110.59 mg/kg,以Hg重金屬含量0.01 mg/kg為最低。此外,在國家限量標準(GB 2762—2017)中規定有毒重金屬的限量值分別為Pb≤5.0 mg/kg、As≤0.5 mg/kg、Sn≤250 mg/kg、Hg≤0.1 mg/kg,鼠麴草中Pb、As、Sn和Hg按照國家限量標準的做法以濕基計其含量分別為1.68、0.46、0.01、0.01 mg/kg,均低于國家限量標準,符合食品安全要求。可見湘西“蒿菜粑粑”原料植物鼠麴草礦物質元素種類豐富多樣,且安全基本無污染。

表5 鼠麴草中礦物質元素的含量(干重,n=3) 單位:mg/kg

比較發現,Ca、K、Na、Mg、Fe、Zn、Se、Cu、Mn含量中,除Na含量低于3種蔬菜但高于玉米、糯米、土豆外,其他元素含量均高于6種作物,說明鼠麴草為高Ca、K、Na、Mg、Fe、Zn、Se、Cu、Mn含量的資源植物。根據《中國居民膳食營養素參考攝入量(2018版)》,成年人、成年男子、輕度活動量的常量元素Mg、K、Ca和Na推薦攝入量分別為330、2 000、800、1 500 mg/d。通過比較鼠麴草這幾種元素的營養質量指數(index of nutritional quality, INQ)值與對應的推薦數值,可知鼠麴草常量元素中除Na的INQ值(0.04)<1外,其他常量元素均>1(INQ值大小依次為K=17.94、Ca=10.73、Mg=7.36),而INQ>1表示該營養素豐富,故鼠麴草能給人體提供充足的Mg、K和Ca等營養素。另外,在鼠麴草微量元素中,Fe、Mn和Zn等含量高于其他微量元素,且含有0.22 mg/kg的Se,高于富硒大米(Se≥0.15 mg/kg)和普通蔬菜(硒含量≤0.1 μg/g)[36]。人體必需的微量元素是人體生理過程所必需的激素、酶、維生素等的組成成分,也是人體組織器官的必要成分,具有多種生理功效。其中Fe可促進身體發育,有運載氧和營養物質等作用,若缺乏會引起一系列疾病。Mn參與三大營養素的新陳代謝和多種酶的組成,并影響酶的活性等,缺少Mn是導致骨質疏松的原因之一。Zn有促進兒童智力發育、增進食欲和改善免疫功能等作用。人體缺鋅會使生長停滯,患貧血、糖尿病、食欲下降、傷口難愈合等疾病。Se對防癌抗癌、抗氧化和提高人體免疫力等有一定功效,缺少硒會引起心血管病、癌等[37]。可見Fe、Mn、Zn和Se 4種元素均對機體有重要的生理活性,故可認為鼠麴草很可能具有促進身體發育、防癌抗癌、抗氧化等功能價值。此外,鼠麴草K/Na、Zn/Cu、Zn/Fe值分別為598.70、7.56、0.10。鑒于通常K/Na值遠超過1的食物為高K低Na型食物,可認為有一定心臟保護和治療高血壓等的功效[38];當Zn/Cu大于10及Zn/Fe大于1時,會引發拮抗作用[39],可認為鼠麴草不僅富含Mg、K和Ca等營養素,還屬于有藥用價值的高K低Na型食物,且Zn、Cu、Fe含量較佳。

2.4 維生素含量及營養評價

如表6所示,鼠麴草含有維生素A、維生素E和維生素B23種維生素,含量分別為0.36、2.31、0.35 mg/100g,其中維生素E含量最為豐富,而維生素A、維生素B2含量相差無幾。與張幸等[14]報道的測定結果比較,脫水過的鼠麴草并未測出維生素C,但在鮮樣中卻有測出(維生素C含量為114.47~215.28 mg/100g),說明脫水處理會使鼠麴草中的維生素C發生嚴重損失,因此,新鮮鼠麴草應含有維生素A、維生素C、維生素E和維生素B24種維生素。

表6 鼠麴草中維生素的含量(干重,n=3) 單位:mg/kg

根據《中國居民膳食營養素參考攝入量(2018版)》,成年人、成年男子、輕度活動量的維生素A、維生素C、維生素E和維生素B2推薦攝入量分別為800、100、14、1.4 mg/d。通過比較鼠麴草這幾種維生素的INQ值與對應的推薦數值,可知鼠麴草除維生素A的INQ值(4.24×10-3)<1外,其他3種維生素均>1(INQ值大小依次為維生素C=10.66~20.06、維生素B2=2.33、維生素E=1.54),而INQ>1表示該營養素豐富,故鼠麴草能給人體提供充足的維生素C、維生素E和維生素B2等營養素。比較發現,鼠麴草的維生素B2含量高于玉米、糯米、土豆和其他3種蔬菜;維生素C含量高于玉米、糯米、土豆、菠菜和香菜,略低于大白菜;維生素E含量高于糯米、土豆、大白菜,低于玉米、菠菜和香菜;維生素A含量高于玉米、糯米、土豆和大白菜,低于菠菜和香菜。鑒于維生素B2能夠預防機體的許多不適癥狀,維生素C、維生素E有抗氧化、抗衰老等藥理作用功效[40],可以認為鼠麴草不但能為人體提供充足的維生素C、維生素E和維生素B2等營養素,更是很可能具有預防機體不適癥狀和抗氧化等功效,對人體有益。

2.5 粗多糖、總多酚、總黃酮含量分析

粗多糖、總多酚和總黃酮是食品原料特色的重要體現,具有特定活性功能。其中,粗多糖廣泛存在于真菌及植物中,具有多種保健功效,如抗氧化、抗腫瘤、降血糖與免疫調節等。多酚類物質被稱為“第七類營養素”具有抗氧化、抗癌、抗衰老等多種活性[16],在醫藥、食品及化妝品等行業有寬廣的市場前景。黃酮類化合物作為許多中藥材的有效成分,具有多種生物活性。測定結果顯示,鼠麴草中含有1.67 g/100g的粗多糖和4.20 g/100g的總多酚,總黃酮含量為8.13 g/100g。

2.6 提取物體外抗氧化活性

2.6.1 對DPPH自由基清除效果

圖1顯示“蒿菜粑粑”原料植物鼠麴草醇提物和水提物均具有一定的DPPH自由基清除能力。

圖1 鼠麴草對DPPH自由基的清除效果Fig.1 Scavenging effect of Gnaphalium affine on DPPH free radicals

在10~120 mg/L質量濃度范圍內,兩者均對DPPH自由基的清除率呈上升趨勢,在質量濃度為120 mg/L時,水提物達到最大清除率82.98%;在120~400 mg/L質量濃度范圍內,醇提物對DPPH自由基的清除率繼續呈上升趨勢,在質量濃度為400 mg/L時,醇提物達到最大清除率92.99%。醇提物和水提物的半數抑制質量濃度(IC50)分別為56.53、50.65 mg/L,BHT和維生素C的最大清除率分別為84.37%、98.04%,IC50分別為15.62、6.89 mg/L。維生素C表現出最強的自由基清除能力,鼠麴草水提物與BHT對DPPH自由基的最大清除率基本接近,且醇提物的最大清除率大于BHT,而當濃度較高時,BHT表現出清除率下降的情況,這可能由于BHT濃度太高過飽和化,反而不利于清除。鼠麴草對DPPH自由基清除能力具有劑量依賴性,且通過IC50可知水提物的自由基清除能力略優于醇提物。

2.6.2 對ABTS陽離子自由基清除效果

由圖2可知,鼠麴草醇提物和水提物均具有一定ABTS陽離子自由基清除能力,在10~400 mg/L質量濃度范圍內,對ABTS陽離子自由基的清除率呈上升趨勢,其中水提物在質量濃度為400 mg/L時,達到最大清除率99.85%;在400~800 mg/L的質量濃度范圍內,醇提物對ABTS陽離子自由基的清除率繼續呈上升趨勢,在800 mg/L濃度時,達到最大清除率91.80%,醇提物和水提物的IC50分別為137.79、113.61 mg/L,而BHT和維生素C的最大清除率分別為99.11%、99.70%,IC50分別為76.42、13.82 mg/L,表明鼠麴草與BHT對ABTS陽離子自由基的最大清除率基本一致,鼠麴草提取物對ABTS陽離子自由基的清除能力略弱于BHT和維生素C。鼠麴草對ABTS陽離子自由基清除能力呈現劑量依賴性,且通過IC50可知水提物的清除能力略優于醇提物。

圖2 鼠麴草對ABTS陽離子自由基的清除效果Fig.2 Scavenging effect of Gnaphalium affine on ABTS+·

2.6.3 總還原能力實驗效果

由圖3可知,鼠麴草醇提物和水提物均具有一定總還原能力,在10~2 000 mg/L質量濃度范圍內的吸光度值均呈上升趨勢。同樣濃度條件下,各物質吸光度值大小順序為:維生素C>BHT>鼠麴草醇提物>鼠麴草水提物,說明各物質還原能力順序為:維生素C>BHT>鼠麴草醇提物>鼠麴草水提物,可見鼠麴草提取物具有一定的總還原能力,但弱于BHT和維生素C。鼠麴草的總還原能力具備劑量依賴性,且醇提物優于水提物。

圖3 鼠麴草的總還原能力Fig.3 Total reduction ability of Gnaphalium affine

2.6.4 FRAP實驗效果

由圖4可知,鼠麴草醇提物和水提物在10~2 000 mg/L質量濃度范圍內的吸光度值呈上升趨勢,在同樣濃度范圍內,維生素C、BHT的鐵還原能力也漸漸增強,四者的還原力與濃度有一定量效關系,其中維生素C的鐵還原能力始終大于其他三者,在10~40 mg/L質量濃度范圍內,BHT表現出了較弱的鐵還原能力,低于鼠麴草醇提物和水提物的鐵還原能力,其中醇提物鐵還原能力弱于水提物,當質量濃度超過40 mg/L后,醇提物鐵還原能力始終優于水提物。鼠麴草的鐵還原能力有劑量依賴性,且醇提物優于水提物。

圖4 鼠麴草的鐵還原能力Fig.4 Iron reduction ability of Gnaphalium affine

2.6.5 β-胡蘿卜素褪色實驗效果

由圖5可知,在20 mg/L的濃度下,當β-胡蘿卜素相對吸光度降至50%時,加入維生素C和BHT組所需的時間為51.43、85.19 min,加入鼠麴草醇提物和水提物組的時間分別為110.00、99.00 min。根據結果可知,鼠麴草提取物能夠有效地延緩β-胡蘿卜素褪色,且醇提物略優于水提物。

圖5 鼠麴草對胡蘿卜素褪色的影響Fig.5 The inhibitory effect of Gnaphalium affine on carotene fading

2.6.6 FTC實驗效果

由圖6可知,正常對照組的吸光度值隨著時間延長而增加,并且在第5天達到最大值,BHT吸光度值隨時間延長沒有明顯改變,說明BHT具有最佳的抑制脂質過氧化的能力。維生素C、鼠麴草醇提物和鼠麴草水提物吸光度值隨時間的延長有一定程度的增加,但始終低于正常對照組水平,抑制脂質過氧化的能力大小順序為:維生素C>鼠麴草水提物>鼠麴草醇提物,表明維生素C和鼠麴草均具有一定的抑制脂質過氧化能力,且水提物優于醇提物。

圖6 鼠麴草對FTC實驗的影響Fig.6 FTC experimental determination of Gnaphalium affine

2.6.7 TBA實驗效果

由圖7可知,BHT、鼠麴草水提物、鼠麴草醇提物、維生素C均低于正常對照值,其抑制率分別為95.00%、89.94%、82.38%、27.33%,表明鼠麴草的抑制脂質過氧化能力強于維生素C,且水提物優于醇提物。

圖7 鼠麴草對TBA實驗的影響Fig.7 TBA experimental determination of Gnaphalium affine

3 討論與結論

基本營養成分是人體必不可少的營養物質。湘西“蒿菜粑粑”原料植物鼠麴草蛋白質、灰分、脂肪、水分、TDF與IDF含量較高,其中蛋白質、灰分含量不僅高于常見3種蔬菜,而且高于“蒿菜粑粑”的主體原料糯米和山區常見雜糧玉米、土豆;脂肪含量也高于糯米、土豆、大白菜、菠菜。可見,鼠麴草與上述幾種常見糧食作物和蔬菜一樣,能夠滿足人體多方面的營養需求。

氨基酸含量是評價食品及其原料營養狀況的重要指標,也是營養學家在配方優化設計時必需參考的數據,其組成及含量對人體健康十分重要。鼠麴草富含氨基酸,TEAA/TAA和TEAA/TNAA比例與FAO/WHO標準值相接近,其中必需氨基酸占氨基酸總含量的比例高于大豆。氨基酸中谷氨酸、天冬氨酸含量最高,呈鮮味氨基酸(Glu和Asp)含量高于甘味氨基酸(Gly和Ala)含量,且支芳比值大于健康人和哺乳動物肝受傷時的值。鼠麴草蛋白質氨基酸組成與FAO/WHO規定的相類似(氨基酸組成平衡性合理),且氨基酸評分和SRC值均比大豆高。另外,谷氨酸、天冬氨酸都是藥用氨基酸,均有促進和改善人體代謝及肝臟功能修復等作用[41]。因此,鼠麴草是一種高營養價值植物蛋白來源的資源植物,對人體健康有益,具有成為優質食藥兩用資源的潛能等。

礦物質是組成人體組織及維持正常生理功能所必需的七大營養元素之一。鼠麴草礦質元素豐富,Ca、K、Mg、Fe、Zn、Se、Cu、Mn含量均高于玉米、糯米、土豆和其他3種蔬菜,其中Fe、Mn和Zn等微量元素與Mg、K、Ca等常量元素含量尤為豐富,可作為人體補充礦物質元素的重要來源。維生素則是生物體所需的微量營養成分,一般無法由生物體自行生產,需以飲食等方法獲得。鼠麴草中維生素A、維生素C、維生素E和維生素B2含量高于糯米,其中維生素B2含量還高于其他5種作物,且維生素B2、維生素C、維生素E的含量尤為豐富,是人體補充維生素的優良來源。

鼠麴草提取物在一定濃度范圍內,清除DPPH自由基、ABTS陽離子自由基效果及還原能力與質量濃度呈正相關。通過IC50可知水提物的DPPH自由基和ABTS陽離子自由基清除能力略優于醇提物,而在還原能力、延緩β-胡蘿卜素褪色上醇提物卻優于水提物。鼠麴草提取物也對脂質過氧化具有較好的抑制作用,且水提物優于醇提物。可見鼠麴草具備良好的抗氧化活性,且其水提物抗氧化活性勝于醇提物。

綜上所述,湘西“蒿菜粑粑”原料植物鼠麴草營養豐富,具備抗氧化活性,尤其適合需要補充蛋白質、礦質元素和維生素等營養元素的人群食用,用其與糯米綜合使用可以提高糯米品質和風味。糯米中的能量、碳水化合物、維生素B1、維生素B3高,而蛋白質、灰分、膳食纖維、維生素A、維生素C、維生素E和維生素B2等成分卻不足,而鼠麴草的蛋白質、灰分、膳食纖維以及維生素含量較高,可能可以彌補糯米的不足,且鼠麴草具有抑菌[15]和抗氧化活性,故二者結合制作的“蒿菜粑粑”不僅口味鮮美、營養價值高,而且易于保存和防病。可見湘西民間利用鼠麴草制作“蒿菜粑粑”食用具有合理性,鼠麴草完全具有用作優質食藥資源的潛能,值得進一步深入研究、推廣和開發。

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