馬藍生產概況、形態(tài)特征觀測及生化成分評價

劉保財 陳菁瑛 李西文 張武君 黃穎楨 趙云青

(1福建省農業(yè)科學院農業(yè)生物資源研究所福建福州350003;2中國中醫(yī)科學院中藥研究所北京100700;3福建省農業(yè)科學院藥用植物研究中心福建福州350003)

馬藍Strobilanthes cusia（Nees）Kuntze Revis.系爵床科Acanthaceae馬藍屬Strobilan‐thes植物［1］，其莖、葉常被加工為中藥飲片青黛，具有清熱解毒、涼血消斑、瀉火定驚等功效，主治溫毒發(fā)斑、血熱吐岫、胸痛咳血、口瘡、痄腮、喉痹、小兒驚癇；其根與根莖作為中藥飲片南板藍根，具有清熱解毒、涼血消斑的功效，主治溫疫時毒、發(fā)熱咽痛、溫毒發(fā)斑、丹毒［2］；其葉常作為大青葉，具有清熱解毒、涼血止血的功效，主治溫熱病、高熱頭疼、發(fā)斑、肺熱咳嗽、濕熱瀉痢、黃疸、丹毒、猩紅熱、麻疹、咽喉腫痛、吐血、牙齦出血、蛇蟲咬傷等［3］。現(xiàn)代生化研究表明，馬藍含有色胺酮、2-苯并噁唑酮、靛玉紅、阿克苷、角胡麻苷等生化成分，并且結構上存在諸多異構現(xiàn)象，在臨床上具有廣泛的應用［4-7］。

馬藍最早見于春秋戰(zhàn)國時期《爾雅·釋草》：“箴，馬藍。”，傳統(tǒng)用于染料、藥用等，在中國具有較長的使用史和栽培史［8-9］。近年對其基因、代謝、合成、藥理［10-13］等方面做了深入研究。然而關于其當前主產區(qū)的生產概況、植株的形態(tài)特征差異、各地開發(fā)利用情況研究較少。盲目地跟風種植造成資源浪費、價格時高時低，農民、藥企利益受損，并且影響產品質量。為此，筆者對國內馬藍主產區(qū)進行走訪調查，研究其主產區(qū)的分布及馬藍種植面積、栽培方式、形態(tài)特征差異、成分含量等，以期為馬藍產業(yè)的良性發(fā)展奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 調查地點

地點位于福建省仙游縣、貴州省獨山縣、云南省金平縣。

1.1.2 調查時間

2020年11月19 日，福建省仙游縣書峰鄉(xiāng)書峰村周邊；2020年11月23日，貴州省獨山縣上司鎮(zhèn)峰洞村周邊；2020年11月30日，云南省金平縣阿得博鄉(xiāng)高興寨周邊。

1.1.3 主要儀器設備與藥品

1260高效液相色譜儀，美國Agilent公司；BSA224S-CW電子分析天平，德國Sartorius公司；KQ-400DE數(shù)控超聲波清洗儀，江蘇昆山超聲儀器有限公司；H-2050R離心機，湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司。

對照品靛玉紅（批號為170117，南京森貝伽生物科技有限公司）；對照品靛藍（批號為110716-201612，中國食品藥品檢定研究院）；對照品吲哚苷（批號為NSZ2I-DG，上海梯希愛化成工業(yè)發(fā)展有限公司）；甲醇（德國MERCK公司）；其余試劑均為國產分析純。

1.2 方法

1.2.1 調研方法

采用實地調查、種植戶和企業(yè)走訪以及文獻檢索等相結合的方法，通過文獻檢索和同行咨詢獲悉廣東、四川等省區(qū)的生產情況。

1.2.2 形態(tài)特征測量

各地隨機選擇林下和大田各3個地塊，每個地塊選擇代表性植株15株，用卷尺測量株高（地面到主莖頂端的高度，cm）；用直尺測量成熟葉片長（葉基到葉尖的長度，cm）和寬（葉片最寬處的距離，cm），每株測量10片代表性葉片。

1.2.3 生化成分測定

1.2.3.1樣品采集

各地分別選擇林下、大田2種環(huán)境下3個地塊各5片成熟的葉片，用清水沖洗后，用卷紙把表面的水分吸干，每2片放一起，用錫箔紙包裹，放在干冰里，帶回室內保存于-80℃冰箱里。

1.2.3.2 靛藍量檢測

參考2020版《中華人民共和國藥典》青黛中靛藍和靛玉紅測定法［2］及高效液相色譜法同時測定馬藍根、莖、葉中4種成分含量［14］的方法。將葉片放在液氮中磨碎，稱取0.5 g，置于25 mL容量瓶中；加入約20 mL DMF，超聲處理30 min，放冷至室溫，定容至刻度；用0.45微孔濾膜過濾，待測。

色譜條件：Ultimate XB-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，3 μm）；流動相：甲醇∶水（70∶30）；檢測波長：289 nm；柱溫：30℃；進樣量：10 μL；進樣時間：25 min；流速：1 mL/min。每個樣品重復測定3次。

1.2.3.3 吲哚苷含量檢測

參考肖春霞等［15］方法，采用RP-HPLC法測定不同產地及不同部位馬藍中6種活性成分含量。將葉片放在液氮中磨碎，稱取5 g于錐形瓶中，加入20倍超純水，沸水浴加熱提取1 h；靜置18 h，離心（3 000 r/min，15 min）；移取上清液于50 mL容量瓶中，定容，取適量離心（12 000 r/min，10 min），上清液即為供試品溶液；取適量供試液用0.45微孔濾膜過濾，待測。

色譜條件：Ultimate XB-C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，3 μm）；流動相：甲醇∶水（15∶85）；檢測波長：280 nm；柱溫：30℃；進樣量：10 μL；進樣時間：30 min；流速：1 mL/min。每個樣品重復測定3次

2 結果與分析

2.1 主產區(qū)生產概況

當前中國馬藍的種植區(qū)域主要在貴州省南部黔南地區(qū)、云南南部紅河地區(qū)、福建省仙游縣書峰鄉(xiāng)及四川、廣東，另外廣西、浙江等地也有少量生產，其中以黔南地區(qū)種植面積最大，產量最高，各產區(qū)概況見表1。

表1 中國馬藍主要產區(qū)生產概況

馬藍的主要用途為地上部分加工為青黛、地下部分作為南板藍根入藥，其葉片作為大青葉以民間用藥為主，藥廠收購的較少。不同主產區(qū)的規(guī)模、用途等方面均有差異。貴州、云南、四川等地，地上部分加工為青黛，其地下部分作為南板藍根收購和施用；而福建主要以收割地上部分加工成青黛為主，地下部應用較少；廣東則主要收獲根部及基部莖稈作為南板藍根，較少收獲地上部加工成青黛。作為南板藍根用的地下根及根莖因產量低、價格高，為此，部分產區(qū)將整株挖出后曬干或陰干，去掉葉片和頂端的部分嫩枝，剔除泥土、石塊、雜草等雜質，整株切段，作為南板藍根通貨應用。仙游縣雖為福建青黛道地產區(qū)，但相對其他2個產區(qū)，人工費較高，從事馬藍種植業(yè)的人數(shù)較少，面積及產量較貴州、云南少。

栽培方式也存在較大的差異。貴州省獨山縣主要采用平地及山坡邊緣地塊種植（圖1、2）；云南省金平縣因坡度較大、基本沒有平地，因此栽培地均為坡地及山坡上的雜木林下（圖3、4）；福建省仙游縣多為枇杷園林下套種（圖5、6）；而廣東則主要在荔枝園、香蕉園等果園套種。各地均有輪作的習慣，但輪作時間不一，仙游主要收獲地上部分，因此輪作時間4年左右；獨山一般種植3年后進行輪作；金平因種植目標不同，種植1年或2年后整株采收，采收后均會輪作或者休耕。

圖1 獨山縣上司鎮(zhèn)平地栽培

圖2 獨山縣上司鎮(zhèn)山坡邊緣地塊

圖3 金平縣因坡地栽培

圖4 金平縣林下坡地栽培與育苗

圖5 仙游縣枇杷園套種

各主產區(qū)產業(yè)鏈基本成熟，均有專門的加工和銷售企業(yè)，但基本以原料或者加工為青黛原料的方式，提供給華潤三九醫(yī)藥股份有限公司、昆明中藥廠有限公司、雅安迅康藥業(yè)有限公司、福建省莆田市德龍藥業(yè)有限公司、貴州青山生物科技有限公司等專業(yè)的企業(yè)，由他們進一步加工成中藥飲片或者中成藥。龍頭企業(yè)的帶動對當?shù)伛R藍種植面積和產量有重要的影響，收購價格直接調控種植面積、生產投入等。近年在堅持傳統(tǒng)用途的基礎上，逐步開發(fā)新產品，如洗發(fā)露、面膜、高檔繪畫原料、茶等，為產業(yè)發(fā)展注入新活力。

圖6 仙游縣枇杷園周邊地塊栽培

各主產區(qū)當?shù)卣咭膊幌嗤缭颇鲜〗鹌娇h對馬藍種苗進行補貼，提高了當?shù)剞r戶的種植熱情，種植面積進一步擴大，在當?shù)刂鸩匠蔀榕c草果齊名的特色作物與產業(yè)。所以除龍頭企業(yè)帶動影響外，不同地區(qū)的政府引導是影響當?shù)伛R藍種植規(guī)模的第二個主要因素。

2.2 形態(tài)特征

各主產區(qū)植株形態(tài)特征差異較大，主要表現(xiàn)在株型、葉片大小和形狀上（表2）。福建仙游所栽培的植株呈匍匐型生長，葉片較小，植株較矮。而云南金平所栽培的植株株型直立、莖稈粗壯、葉片寬而大（圖7、8）。貴州馬藍植株形態(tài)接近云南的，但葉片沒有云南金平所栽培的大（圖9、10），福建的最小（圖11、12）。但各產區(qū)植株花的大小變化不大（圖13），同一地區(qū)植株形態(tài)也有輕微差異，如福建野生的植株葉片大、莖稈粗壯，但葉片的數(shù)量和厚度小于人工栽培植株。同時植株的株高還與收獲方式有關，如一年收獲2次的植株株高低于一年收獲1次的植株，因此形態(tài)特征是否能夠穩(wěn)定遺傳，還需要進一步跟蹤觀察。葉片形狀差異較大，有闊葉型、尖葉型2種（圖14）。

圖9 貴州山坡邊緣栽培

圖11 福建仙游林下栽培

圖13 花的類型

圖14 葉片類型

表2 馬藍主要產區(qū)生產植株特征

圖7 云南梯田栽培植株

2.3 生化成分測定

圖8 云南同一地塊不同表型

測定結果（表3）表明，云南金平所產的靛藍、吲哚苷含量最高，其次為仙游，貴州的較低，但是在新鮮葉片中，均沒有檢測出靛玉紅。

表3 馬藍主要產區(qū)生化成分測定

圖10 貴州大田栽培

圖12 福建仙游林緣栽培

3 討論與結論

3.1 馬藍的主要產區(qū)

通過實地調研與咨詢同行可知，當前中國馬藍的種植區(qū)域中，貴州省南部黔南地區(qū)面積、產量均居全國首位。馬藍分布于中國的廣東、海南、臺灣、廣西、云南、貴州、四川、福建等省區(qū)，常生于潮濕處，因此中國的華南大部分區(qū)域均可栽培［1，9，16-17］。然而受種植習慣、應用習俗、加工方法、市場價格等因素影響，當前該品種種植面積小、產量低，尤其是其作為傳統(tǒng)的染料被化學染料替代后，受價格因素影響，許多傳統(tǒng)栽培區(qū)域逐漸放棄種植，從而使其栽培面積進一步縮小［18-20］。當前得益于中國少數(shù)民族對傳統(tǒng)染料的青睞，因此種植面積主要分布在少數(shù)民族集中區(qū)。

3.2 馬藍的形態(tài)特征

此次調查表明，馬藍的形態(tài)特征差異主要表現(xiàn)在株型、葉片大小和葉片形狀上。植株高低受收割次數(shù)、栽培措施等影響較大，所以各地植株的高低及同一地區(qū)植株的高低差異均較大。光照強度對馬藍光合作用有顯著的影響［21］，因此葉片的大小受光照強弱的影響；據(jù)筆者田間調查，光線強的地方，葉片皺縮且發(fā)黃，而林下及有遮陽的地方，葉片綠色，顏色正常。葉片有闊葉型和尖葉型2種形態(tài)類型。

3.3 馬藍的生化成分

《中華人民共和國藥典》收載，青黛、南板藍根的指標成分均為靛藍、靛玉紅［2］。經(jīng)測定發(fā)現(xiàn)，12月份低溫季節(jié)新鮮的馬藍葉片中靛玉紅的含量很低，甚至無法檢測到；干燥后的葉片中則可測量到［3］，這可能是因為靛玉紅與靛藍合成類似，是在后續(xù)干燥過程或者初加工過程中逐步合成，在新鮮的組織內含量很低或者無［22-23］。現(xiàn)在多數(shù)研究認為，靛藍和靛玉紅的合成前體為吲哚，吲哚被氧化成吲哚酚，植物尿苷二磷酸葡萄糖酶可通過糖基化作用，將吲哚酚轉化為糖苷類物質，避免其自發(fā)氧化。在老葉中或受到外界影響時，這些糖苷類物質通過水解酶分解，形成吲哚酚，繼而氧化并發(fā)生縮合反應生產靛藍及其他相關成分［24-25］。然而有學者認為，靛藍、靛玉紅藥理作用與南板藍根臨床治療流感和消炎解毒的功效并無相關性，因此建議選擇角胡麻苷、阿克苷等其他成分［4］，這值得進一步研究和探討。

馬藍的生化成分極其復雜，不僅受遺傳、收獲時間、栽培、氣候等因素影響，加工為青黛時還與加工工藝有關，這使馬藍及其主要加工品青黛的成分變化更加復雜化［26-28］；因此，馬藍及其青黛的生化成分有待進一步研究與綜合評價。