醫院銅綠假單胞菌分布及耐藥性分析

陳虎虎，李博萍，邱 倩，周姣含

(1.隴東學院 岐伯醫學院，甘肅 慶陽 745000；2.慶陽市第二人民醫院，甘肅 慶陽 745000)

銅綠假單胞菌(PAE)屬于革蘭陰性桿菌，是一種非發酵菌，它是導致醫院發生感染的最常見病菌，在空氣、水、土壤等自然環境中廣泛分布，常定植在健康人群的胃腸道、呼吸道、黏膜、皮膚等位置，當人的機體免疫力下降時，該病菌容易侵入人體引發醫院感染[1]。PAE是重癥監護病房(ICU)以及呼吸科醫院感染的主要病菌，由于其存在易耐藥、變異、定植等復雜特征，在臨床抗菌藥物中屬于有難度的問題。國外相關報道顯示，因為PAE感染導致死亡的概率大約為5.1%，隨著腫瘤化療、免疫抑制劑、抗菌藥物等藥物的廣泛使用，醫院的感染途徑、易感人群、感染源明顯增多，醫院感染呈逐漸加重的趨勢[2]。因此，對銅綠假單胞菌的分布情況與耐藥性進行分析，對臨床防治銅綠假單胞菌引發的醫院感染有重要的意義。此次研究主要是為了分析醫院銅綠假單胞菌分布及耐藥性分析情況，以便為臨床提供一定的參考，研究如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年1月-2019年1月隴東學院附屬醫院住院患者的各種病原菌培養標本5286份，對所有標本進行培養、鑒定、藥敏試驗，分析銅綠假單胞菌分布和耐藥性。5286份標本主要來源于胸腹水、分泌物、膿液、尿液、血液、痰液。標本分離嚴格按照相關要求進行。質控菌株銅綠假單胞菌(ATCC27853)由浙江省臨床檢驗中心提供。菌株鑒定、分離儀器為半自動細菌鑒定、藥敏分析儀(ATBExpression型)，藥敏卡(ATBPSE5)、鑒定卡(IDGN5)均由法國梅里埃公司提供。鑒定板(API20NE)、瓊脂(MH)均由法國梅里埃生物公司生產；藥敏紙片、麥康凱平板、血平板由杭州天和微生物公司生產。患者均知曉同意此次研究，研究得到倫理委員會審批。

1.2 方法

1.2.1 細菌培養、鑒定

對標本操作按照相關規程嚴格進行[3]。標本接種麥康凱平板、血平板，將其放置到二氧化碳孵箱中進行培養，溫度設定為35℃，對培養的優勢菌進行分離與鑒定。

1.2.2 藥敏試驗

使用瓊脂紙片擴散法(K-B法)對13種抗菌藥物的耐藥性進行判斷，結果按照相關的標準進行[4]。

1.3 觀察指標

(1)分析病原菌分離情況。

(2)分析醫院銅綠假單胞菌分布情況。

(3)分析不同科室銅綠假單胞菌分布情況。

(4)分析銅綠假單胞菌對常用的抗菌藥物耐藥情況。

2 結果

2.1 病原菌分離情況分析

5286份本中，共分離出銅綠假單胞菌1064株，分離陽性率為20.1%。

2.2 醫院銅綠假單胞菌分布情況分析

1064株銅綠假單胞菌中，標本主要為痰液(71.0%)、創傷分泌物(10.2%)、中段尿(6.2%)、胸腹腔積液(5.5%)，其他的標本分布比較少，見表1。

表1 醫院銅綠假單胞菌分布情況分析(株，%)

2.3 不同科室銅綠假單胞菌分布情況分析

1064株銅綠假單胞菌中，主要分布在呼吸內科(19.6%)、ICU(13.3%)、老年病科(13.0%)、泌尿外科(5.9%)，其他的科室分布比較少，見表2。

表2 不同科室銅綠假單胞菌分布情況分析(株，%)

2.4 銅綠假單胞菌對常用的抗菌藥物耐藥情況分析

耐藥性較高的藥物主要有頭孢噻肟(58.5%)、環丙沙星(50.0%)、慶大霉素(50.8%)、復方新諾明(84.8%)；敏感度較高的藥物主要有阿米卡星(30.5%)、頭孢他啶(32.2%)、哌拉西林/他唑巴坦(35.6%)、頭孢哌酮/舒巴坦(13.5%)、亞胺培南(11.8%)，見表3。

表3 銅綠假單胞菌對常用的抗菌藥物耐藥情況分析(株，%)

3 討論

銅綠假單胞菌廣泛存在于自然界中，在全國耐藥監測中發現銅綠假單胞菌排首位[5]。該病菌可以通過多種方式、多種途徑對身體的部位進行感染，臨床治療難度比較大，很難將其徹底清除，且會出現多重耐藥菌株，容易引發醫院嚴重感染[6]。

銅綠假單胞菌出現多重耐藥與臨床藥物濫用有很大的關系[7]。銅綠假單胞菌對不同的抗生素所產生的耐藥機制是不相同的，一般是多種耐藥機制綜合作用的結果，這對臨床抗菌治療造成了一定的難度，其最主要的耐藥機制為：(1)產生抗生素修飾酶、滅活酶，比如氨基糖苷鈍化酶、B-內酰胺酶等[8]。(2)對抗菌藥物的作用靶點進行改變，逃避抗菌藥物的作用。(3)主動外排、膜屏障功效及外膜的通透性的明顯下降，使得某些蛋白喪失或者是缺乏。(4)生物膜產生。近年的臨床研究顯示，細菌生物膜在銅綠假單胞菌感染中大量存在，是導致抗菌治療無效的重要因素[9]。

研究顯示，5286份標本中，共分離出銅綠假單胞菌1064株，分離陽性率為20.1%，陽性標本主要來源于痰液(71.0%)、創傷分泌物(10.2%)、中段尿(6.2%)、胸腹腔積液(5.5%)，其他的標本分布比較少，這與其他學者的結果基本一致。結果顯示銅綠假單胞菌引發的感染主要為肺部感染，其次為手術后或者是外傷后導致的創面感染，免疫功能較低或者是重癥患者也比較容易發生尿路感染。另外，1064株銅綠假單胞菌中，主要分布在呼吸內科(19.6%)、ICU(13.3%)、老年病科(13.0%)、泌尿外科(5.9%)，其他的科室分布比較少，這與ICU患者的病情一般比較危重，患者的機體免疫力明顯降低，加之侵入性治療與操作、多種抗菌藥物的使用等有關，使得ICU患者成為銅綠假單胞菌的易感人群。而呼吸內科的患者由于呼吸系統存在異常使得呼吸道防御能力明顯下降，使得呼吸內科患者也成為銅綠假單胞菌的易感人群，同時，可能與這些科室老年患者較多也有關系[10]。

在銅綠假單胞菌對常用的抗菌藥物耐藥情況分析中，研究顯示，耐藥性較高的藥物主要有頭孢噻肟(58.5%)、環丙沙星(50.0%)、慶大霉素(50.8%)、復方新諾明(84.8%)；敏感度較高的藥物主要有阿米卡星(30.5%)、頭孢他啶(32.2%)、哌拉西林/他唑巴坦(35.6%)、頭孢哌酮/舒巴坦(13.5%)、亞胺培南(11.8%)，因此，在治療由于銅綠假單胞菌引發的感染中要避免再次使用已經產生耐藥的藥物。阿米卡星屬于半合成氨基糖苷類藥物的一種，它對不動桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌等抗菌效果較好。它可以維持相關酶生物活性的穩定，在治療卡那霉素、慶大霉素耐藥患者中有明顯的效果。亞胺培南屬于碳青酶烯類藥物的一種，抗菌活性較高，它可以作用于細菌的結合蛋白，且與其親和力較高，是臨床上治療銅綠假單胞菌感染患者的主要抗菌藥物，但是通常不會單獨使用，需要將其與西司他汀聯合使用，可使亞胺培南在腎臟處不受破壞，同時減輕腎臟毒性[11]。但是，臨床上隨著碳青酶烯類藥物的廣泛使用或者是過度使用，耐藥菌株明顯增多，因此，限制或者是減少該類藥物的臨床使用是降低耐藥性的重要措施。同時，臨床上應該根據細菌培養結果與藥敏試驗結果選擇合適的抗菌藥物，如果患者的感染比較嚴重，則要聯合使用抗菌藥物進行治療。

近幾年，銅綠假單胞菌引發的臨床感染逐漸增加，導致感染增加的原因主要有：(1)臨床上雖有相關的規章制度來規定抗菌藥物的使用，但是，很多臨床醫生只是憑借自己的臨床經驗為患者使用抗菌藥物，沒有根據細菌培養、藥敏試驗結果對患者進行合理的治療，使得最終的感染率、耐藥性明顯提高[12]。(2)近年臨床上使用的廣譜抗菌藥物明顯增多，這容易使患者的機體菌群失去平衡，導致繼發感染的發生。(3)隨著我國人口老齡化現象的不斷增加，醫院中的床位明顯增多，住院患者也明顯增多。(4)銅綠假單胞菌的生長、繁殖能力非常強，且對生長的環境要求不是很高，對很多的藥物存在天然的耐藥性，這就使得臨床交叉感染發生率明顯提高[13]。為了更好地控制醫院銅綠假單胞菌的感染，預防細菌耐藥性，建議臨床上及時采取有效的措施進行預防，醫務人員要時刻注意手衛生，消毒隔離工作要做好，對醫院內的感染進行控制，提高對銅綠假單胞菌的耐藥性檢測，盡早進行細菌培養、鑒定、藥敏試驗，禁止長時間或者是過度使用同一種類型的抗菌藥物，并對臨床抗菌藥物的使用方法進行規范，以便降低耐藥菌的產生[14]。簡言之，醫院銅綠假單胞菌引發的感染是可以控制與預防的。各科室要根據送檢標本的細菌培養與藥敏試驗結果選擇合適的抗菌藥物，要對使用情況進行密切的監測，同時要合理控制抗菌藥物的使用量，以便降低院內因為銅綠假單胞菌引發的感染。另外，應定期對科室中的病菌分布、耐藥菌發展情況進行統計與分析，以便更好地控制與預防院內感染的發生。

此次研究的不足：此次研究時間比較短，樣本數量比較少，得到的結果可能存在一定的不準確性與局限性，在今后的研究中，我們會進行大樣本、更深入的研究，以便對本次研究結果的準確性進行證實，希望本次研究可以為其他學者提供一定的參考價值。

綜上所述，醫院銅綠假單胞菌引發的臨床感染明顯增多，臨床檢出率明顯提高，但是隨著藥物的耐藥性提高，臨床上應該加強藥物的耐藥性監測，合理使用抗菌藥物，以便降低細菌的耐藥性。