甲狀腺乳頭狀癌組織中LAT1、VEGF水平與TNM分期的相關性

喬亮，葛東風

（河南科技大學第一附屬醫院 病理科，河南 洛陽 471000）

甲狀腺乳頭狀癌（PTC）是一種惡性程度較低的甲狀腺癌，早期主要采用手術方式進行治療，但治療方案的制定與PTC的TNM分期密切相關［1］。L型氨基酸轉運體1（LAT1）可促進細胞增殖、血管生成，調控細胞周期；血管內皮生長因子（VEGF）可促進血管內皮細胞增殖、遷移、血管形成。研究［2］表明，LAT1、VEGF在PTC組織中呈異常高表達，由此推測LAT1、VEGF表達情況與PTC患者TNM分期具有一定聯系。鑒于此，本研究旨在分析PTC組織中LAT1、VEGF水平與TNM分期的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年1月至2019年12月期間我院收治的PTC患者70例，其中男性29例、女性31例；年齡24~60歲，平均年齡（42.11±7.27）歲；BMI 16.50~26 kg／m2，平均BMI（21.25±1.46）kg／m2；腫瘤直徑0.4~4.7 cm，平均腫瘤直徑（2.55±1.04）cm。

1.2 入選標準納入標準：①符合PTC診斷標準［3］，且經組織病理學確診；②參與本研究前無相關疾病治療史。排除標準：①合并甲狀腺腺瘤；②合并甲狀腺結節、甲狀腺腫等其他類型的甲狀腺疾病。

1.3 方法

1.3.1 LAT1、VEGF檢測 收集患者的PTC組織標本，應用鏈霉菌抗生物素蛋白－過氧化物酶連結免疫組織化學染色法進行IHC染色，切片3～4μm，常規脫蠟、脫水，應用磷酸鹽緩沖溶液（PBS）清洗后，抗原修復，以體積分數為3%的過氧化氫阻斷內源性過氧化物酶，PBS清洗，滴加一抗，室溫下孵育10 min后放置在濕盒中，并置于4℃冰箱中保存12 h，PBS清洗，DAB顯色，蘇木精復染、脫水、封片，置于鏡下觀察，以PBS代替一抗作陰性對照。

1.3.2 TNM分期TNM分期標準參照《常見腫瘤AJCC分期手冊（第7版）》［4］： Ⅰ期：T1N0M0； Ⅱ期：T2N0M0； Ⅲ期：T3N0M0、T1N1aM0、T2N1aM0、T1N1aM0； Ⅳ期：T4aN0M0、T4aN1aM0、T1N1bM0、T2N1bM0、T3N1bM0、T4aN1bM0，T4b任何N、M0，任何T、任何N、M1。

1.3.3陽性判定標準 選取高倍鏡下10個視野（每個視野至少包含200個細胞），LAT1細胞質或（和）細胞膜為棕黃色顆粒樣為陽性，VEGF細胞質為棕黃色顆粒樣為陽性。著色率：0分：無著色；1分：淺黃色；2分：黃色；3分：棕黃色。陽性率（陽性細胞數／總細胞數×100%）：0分：陰性；1分：陽性率＜10%；2分：陽性 率11%~50%；3分：陽 性率51%~75%；4分：陽性率＞75%。兩項乘積為總評分。總評分＞9分為強陽性（＋＋＋）、3~9分為中陽性（＋＋）、1~2分為弱陽性（＋）、0分為陰性（－）。

1.4 統計學方法采用SPSS 18.0統計學軟件處理數據。計數資料以百分比表示，等級資料采用秩和檢驗；兩個有序分類變量之間采用Kendall＇s tau－b相關分析；P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 PTC患者TNM分期情況經組織病理學證實，70例患者TNM分 期 情 況 如 下：Ⅰ期11例（15.71%），Ⅱ期31例（44.29%），Ⅲ期22例（31.43%），Ⅳ期6例（8.57%）。

2.2 不同TNM分期的PTC組織中LAT1、VEGF表達情況比較TNM分期的PTC組織中LAT1、VEGF陽性表達強度：Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期，兩兩間比較有統計學差異（P＜0.05）。見表1、表2。

表1 不同TNM分期的PTC組織中LAT1表達情況（例）

表2 不同TNM分期的PTC組織中VEGF表達情況（例）

2.3 PTC組織中LAT1、VEGF表達與TNM分期的相關性相關性分析結果顯示，PTC組織中LAT1、VEGF表達與TNM分期呈正相關（r＝0.860、0.798，P＝0.000、0.000）。

3 討論

手術是PTC患者常用治療方式，但不同TNM分期患者手術方案存在一定的差異性，TNM分期Ⅲ期、Ⅳ期患者往往單一手術治療效果不甚理想，臨床上多采取綜合治療方案，以有效改善患者預后。因此，及時明確PTC患者TNM分期，對其臨床治療方案的制定具有重要指導意義。

本研究顯示，TNM分期越高，PTC組織中LAT1、VEGF陽性表達越強；且PTC組織中LAT1、VEGF表達與TNM分期呈正相關，提示PTC組織中的LAT1、VEGF表達情況與PTC患者TNM分期密切相關。分析原因如下：LAT1可轉運大中型氨基酸和芳香族中性氨基酸，其可與CD98結合形成二聚體復合物，參與腫瘤轉移、侵襲過程［5］；另外，LAT1可提供腫瘤細胞快速增殖過程中所需的氨基酸，其在腫瘤細胞中呈異常高表達，會促進腫瘤細胞不斷增殖、分化、遷移，進而促進PTC病情進展［2］。VEGF在體內及體外均有較高生物活性，，VEGF在體外可促進血管內皮細胞生長，在體內可誘導血管增生，在低氧環境下可與內皮細胞膜上的VEGF受體結合，誘發受體自身磷酸化，激活有絲分裂原活化蛋白激酶，促進VEGF有絲分裂，誘導內皮細胞增生［6］。同時，VEGF可通過提高血漿酶原活化因子與血漿酶原活化因子抑制因子－1的mRNA表達，提高血漿酶原活化因子活性，促進細胞外蛋白水解，進一步促進新生血管形成［7］。另外，VEGF在腫瘤增殖、分化、遷移等過程中發揮重要作用，可通過新生血管供給腫瘤細胞增殖、分化過程中所需的氧氣及營養物質，促進腫瘤細胞增殖、轉移，增加TNM分期。

綜上所述，PTC組織中LAT1、VEGF水平與TNM分期密切相關，臨床上可通過測定PTC組織中LAT1、VEGF水平來評估TNM分期，為臨床治療方案的制定提供依據。