通過豬口蹄疫抗體檢測淺析當(dāng)前免疫現(xiàn)狀及其影響因素

靳玉舒

(長子縣動物疫病預(yù)防控制中心，山西 長治 046600)

口蹄疫(Foot and Mouth Disease, FMD)是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)引起的以感染偶蹄類動物為主的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，屬國家一類動物疫病，口蹄疫病毒變異與傳播速度極快，可感染70多種家養(yǎng)和野生的偶蹄動物，是危害最嚴(yán)重的豬病之一，對畜牧業(yè)及相關(guān)產(chǎn)業(yè)影響很大，曾多次在世界范圍內(nèi)暴發(fā)流行，造成巨大政治、經(jīng)濟(jì)損失，世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須申報(bào)的傳染病，我國將其列在一類動物傳染病的首位。生豬養(yǎng)殖作為國內(nèi)當(dāng)前一項(xiàng)重要產(chǎn)業(yè)項(xiàng)目，有效控制豬口蹄疫是我國生豬規(guī)模化和產(chǎn)業(yè)化快速發(fā)展的有力保障。疫苗接種是當(dāng)前成功預(yù)防、控制乃至最終消滅口蹄疫的最有效手段。

動物免疫抗體檢測是對免疫接種后的畜禽體內(nèi)采集血清進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測，及時了解疫苗注射后動物體內(nèi)產(chǎn)生的免疫抗體水平、維持時間和免疫效果，反映某區(qū)域動物免疫效果和動物疫病保護(hù)情況，為準(zhǔn)確把握免疫時機(jī)、建立科學(xué)合理的免疫程序，完善免疫方案提供依據(jù)，為政府主管部門科學(xué)地制定動物疫病預(yù)防控制規(guī)劃和疫病預(yù)警建立理論基礎(chǔ)，是動物疫情流行病學(xué)調(diào)查和疫情分析評判的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[1-2]，也是做好動物免疫工作的前提和保證。但由于抗體檢測工作程序復(fù)雜、過程較長，檢測結(jié)果會受到多方面因素的影響，要通過多環(huán)節(jié)把控縮小檢測結(jié)果與真實(shí)水平的差距。

長治縣2018—2020年未發(fā)生過豬或其它動物口蹄疫疫情，基于口蹄疫危害的嚴(yán)重性，我縣為了持續(xù)保持穩(wěn)定安全的養(yǎng)豬環(huán)境，常年采取日常檢測和春、秋集中檢測相結(jié)合的方式，對廣大養(yǎng)豬戶的口蹄疫疫苗接種效果進(jìn)行評價(jià)和把控，現(xiàn)對近3年長子縣豬口蹄疫檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，形成當(dāng)前影響我縣豬口蹄疫抗體變化的主要原因，針對性提出有效建議。

1 材料與方法

1.1 樣品的采集

根據(jù)省、市、縣下達(dá)的監(jiān)測任務(wù)，日常監(jiān)測結(jié)合春、秋防集中監(jiān)測，對山西省長子縣14個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的規(guī)模場(年出欄量≥500頭)和散養(yǎng)戶進(jìn)行全血樣品自主送檢和監(jiān)督采樣檢測。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部《全國春季、秋季重大動物疫病防控情況實(shí)地采樣實(shí)施方案》和山西省長治市關(guān)于春季、秋季重大動物疫病監(jiān)測通知的相關(guān)要求，結(jié)合養(yǎng)殖場(戶)存欄量，規(guī)模場每場采10～15份，散養(yǎng)戶每戶采5～10份。

1.2 檢測方法

采用口蹄疫O型間接血凝抗體檢測法和抗體阻斷ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))。

1.3 檢測試劑

口蹄疫O型間接血凝抗體檢測試劑盒來自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

口蹄疫O型抗體檢測阻斷ELISA試劑盒來自洛陽萊普生信息科技有限公司。

依據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行檢測。陰性和陽性對照均符合判斷標(biāo)準(zhǔn)時試驗(yàn)成立。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

1.4.1 個體免疫合格 間接血凝法：產(chǎn)生血凝反應(yīng)的樣品血清最高稀釋度≥1∶128，樣品判定為抗體陽性。

1.5 數(shù)據(jù)分析

將養(yǎng)殖場(戶)基本情況及檢測結(jié)果等相關(guān)數(shù)據(jù)錄入Excel，為保證討論的準(zhǔn)確性，刪除極少量(＜1.8%)信息填寫不完整的檢測場次數(shù)據(jù)。根據(jù)年份、養(yǎng)殖規(guī)模、合格率等要素對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，生成統(tǒng)計(jì)圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 2018—2020年長子縣豬口蹄疫抗體合格率均高于國家標(biāo)準(zhǔn)

通過檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，全縣近3年檢測豬口蹄疫情況見表1。3年合格率均達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的重大動物疫病免疫抗體合格率高于70%的要求。2019年合格率升高，2020年有所下降，總體呈現(xiàn)先升高后下降的波動態(tài)勢。

表1 2018—2020年長子縣豬口蹄疫抗體檢測情況

2.2 長子縣規(guī)模養(yǎng)殖場(戶)的豬口蹄疫免疫效果優(yōu)于散養(yǎng)戶

根據(jù)山西省農(nóng)業(yè)廳和環(huán)保廳對我省生豬養(yǎng)殖場制定標(biāo)準(zhǔn)，生豬年出欄≥500頭為規(guī)模場，結(jié)合我縣實(shí)際，生豬年存欄量≥300頭的養(yǎng)殖場年出欄量可達(dá)500頭，即定為規(guī)模養(yǎng)豬場。以此標(biāo)準(zhǔn)將豬口蹄疫抗體監(jiān)測數(shù)據(jù)分為規(guī)模場和散養(yǎng)戶兩部分，分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示，2018年檢測規(guī)模場123場次，合格率為91.8%，檢測散養(yǎng)戶555場次，合格率為78.7%；2019年檢測規(guī)模場65場次，合格率為96.9%，檢測散養(yǎng)戶357場次，合格率為94.7%；2020年檢測規(guī)模場120場次，合格率為88.3%，檢測散養(yǎng)戶202場次，合格率為64.9%(圖1、圖2)，可以看出，規(guī)模場豬口蹄疫合格率大于散養(yǎng)戶，且2020年表現(xiàn)尤為明顯。除此之外，將所有合格(合格率≥70%)的場次數(shù)據(jù)依據(jù)檢測結(jié)果進(jìn)行劃分，“合格率=100%”為第1組，“70%≤合格率＜100%”為第2組，發(fā)現(xiàn)規(guī)模場和散養(yǎng)戶“合格率=100%”的比例均在79%以上，且2019年該比例高達(dá)94.7%和100%(圖3)，可以看出，全縣近3年內(nèi)豬口蹄疫抗體合格率持續(xù)保持較高水平。另外，規(guī)模場中檢測合格率為100%的比例均大于散養(yǎng)戶，規(guī)模場豬口蹄疫免疫效果更佳。

圖1 2018—2020年長子縣規(guī)模場/散養(yǎng)戶豬口蹄疫檢測合格/不合格數(shù)量

圖2 2018—2020年長子縣規(guī)模場/散養(yǎng)戶豬口蹄疫抗體檢測合格率/不合格率

圖3 2018—2020年長子縣豬口蹄疫不同合格率值所占比例

2.3 長子縣規(guī)模養(yǎng)殖場比例逐漸增大

以時間為軸線比對數(shù)據(jù)，2018—2020年，檢測樣品總數(shù)呈現(xiàn)先減少后增多的波動變化(結(jié)果2.1描述)，檢測養(yǎng)殖場總數(shù)(678減少至322場次)及散養(yǎng)戶數(shù)量(555減少至202場次)均呈現(xiàn)不同程度降幅，規(guī)模場雖有所波動，但依然在2020年回升至120場次，與2018年數(shù)量基本持平(圖4)，規(guī)模場占比由18.1%(2018年)上升至37.3%(2020年)，見圖5，由此可以看出，長子縣規(guī)模場比例逐漸增大，生豬養(yǎng)殖模式逐漸向規(guī)模化發(fā)展。

圖4 2018—2020年長子縣規(guī)模場/散養(yǎng)戶豬口蹄疫檢測數(shù)量

圖5 2018—2020年長子縣豬口蹄疫檢測場戶中規(guī)模場所占比例

3 討論

3.1 影響我縣豬口蹄疫免疫效果的主要因素

根據(jù)分析結(jié)果可以看出，我縣近3年豬口蹄疫抗體合格率均超過國家標(biāo)準(zhǔn)，保質(zhì)保量的完成了省、市下達(dá)的監(jiān)測任務(wù)，達(dá)到了免疫要求(標(biāo)準(zhǔn))。但從詳細(xì)數(shù)據(jù)可以看出，2020年抗體合格率依然有所下降，通過我縣動物疫病預(yù)防控制中心人員于各鄉(xiāng)鎮(zhèn)進(jìn)行督查、流行病學(xué)調(diào)查、技術(shù)指導(dǎo)等工作，與基層獸醫(yī)人員和養(yǎng)殖戶的深度交流，針對該現(xiàn)象，分析可能有以下幾點(diǎn)主要原因。

(1)2019年下旬機(jī)構(gòu)改革對我縣原有基層防疫體系造成了一定影響。原鄉(xiāng)鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)中心站人員及村級防疫員不再專職于畜牧工作，管理有所松懈，精力分散，重視程度不夠，敷衍塞責(zé)本職工作，導(dǎo)致整體畜牧工作機(jī)制不暢通，在春、秋防集中免疫期間尤為明顯。

(2)村級防疫隊(duì)伍專業(yè)技術(shù)不過關(guān)。疫苗免疫工作最終落實(shí)環(huán)節(jié)依靠鄉(xiāng)村防疫員，防疫員多為農(nóng)民，以農(nóng)耕為主，非專業(yè)獸醫(yī)人員，免疫知識和技術(shù)較差，時常因疫苗運(yùn)輸、保存不當(dāng)造成疫苗污染、變質(zhì)、失效，因注射劑量不足、注射部位不準(zhǔn)確、不同疫苗同時注射、非健康狀態(tài)接種、忽略母源抗體等問題使得免疫效果不佳，因操作不當(dāng)致使動物產(chǎn)生副反應(yīng)甚至死亡，降低養(yǎng)殖戶疫苗接種的積極性。且村級防疫員流動性較大，人員不穩(wěn)定，技術(shù)培訓(xùn)對于防疫員實(shí)操能力的提高效果并不明顯。

(3)我縣生豬養(yǎng)殖模式依然以散養(yǎng)為主。有調(diào)研發(fā)現(xiàn)農(nóng)村散養(yǎng)戶實(shí)行程序化免疫抗體合格率和穩(wěn)定性更高[4-6]。我縣散養(yǎng)戶大多不進(jìn)行程序化免疫，僅依靠“春秋兩防”，忽略加免程序，豬口蹄疫疫苗主要通過二次免疫才能產(chǎn)生較長的免疫保護(hù)期，因此散養(yǎng)戶抗體水平不穩(wěn)定，免疫效果差。且春、秋防時間恰好與春耕秋收的農(nóng)忙時節(jié)相沖突，兼職畜禽養(yǎng)殖的農(nóng)戶和村防員工作量增大，養(yǎng)殖戶疏于免疫，村防員入戶困難，免疫工作十分被動[3]。

(4)近年養(yǎng)殖戶對于豬口蹄疫的免疫意識下降。很多小型養(yǎng)殖戶尤其是散養(yǎng)戶，免疫意識不強(qiáng)，無法保證加免和補(bǔ)免程序，不配合疫苗免疫工作，甚至拒絕免疫豬口蹄疫。

(5)實(shí)驗(yàn)室檢測豬口蹄疫抗體水平的精準(zhǔn)度提高。我縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室于2020年通過全省獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室Ⅱ級考核驗(yàn)收，檢測儀器、檢測環(huán)境、檢測方法及檢測人員素質(zhì)等軟硬實(shí)力雙提升，檢測抗體水平更加精準(zhǔn)，使得免疫劑量不夠、免疫程序不完善、抗體水平處在邊緣線的養(yǎng)殖戶不易通過“合格”這一關(guān)。

3.2 規(guī)模豬場免疫效果佳的原因

從結(jié)果可以看出，我縣規(guī)模場豬口蹄疫免疫效果明顯優(yōu)于散養(yǎng)戶，經(jīng)調(diào)查分析，主要原因如下。

(1)我縣規(guī)模場常年進(jìn)行程序化免疫，不受春秋防的時間限制，可以自行安排疫苗免疫時間進(jìn)而避開農(nóng)忙時節(jié)。

(2)大型規(guī)模場多具有自己的專業(yè)技術(shù)人員，免疫采血技術(shù)純熟，方法得當(dāng)，操作規(guī)范，接種途徑合理，接種率高，且免疫程序科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，不易出現(xiàn)免疫抑制、藥物和母源抗體干擾[7]等現(xiàn)象。

(3)管理人員疫病防范意識強(qiáng)，養(yǎng)殖環(huán)境良好，飼養(yǎng)密度合理，嚴(yán)格消毒，飼料營養(yǎng)全面[8-9]等都為豬群的健康生長和成功進(jìn)行免疫接種提供了穩(wěn)定條件。

3.3 我縣生豬業(yè)正向規(guī)模化現(xiàn)代養(yǎng)殖目標(biāo)邁進(jìn)

2018年前，我縣生豬養(yǎng)殖以農(nóng)村散養(yǎng)和中小型規(guī)模養(yǎng)殖占主導(dǎo)地位，多為自給自足或半自給自足的庭院式養(yǎng)豬，屬經(jīng)驗(yàn)養(yǎng)殖，防疫意識不強(qiáng)，傳統(tǒng)養(yǎng)殖理念根深蒂固，存在飼養(yǎng)環(huán)境較差，養(yǎng)殖技術(shù)落后，引種不合理，設(shè)施設(shè)備簡陋，防控水平較低等問題[10]，嚴(yán)重阻礙了我縣養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。

2018年非洲豬瘟傳入中國，對全國各地養(yǎng)豬行業(yè)都產(chǎn)生了極大的影響，也打破了我縣原有養(yǎng)殖模式組成，疫病風(fēng)險(xiǎn)，短期市場低谷，加之資源約束，淘汰了很大一部分抵御市場風(fēng)險(xiǎn)能力弱的家庭式散養(yǎng)戶[11-12]。疫病防控、環(huán)保、良種豬等模塊技術(shù)升級成為必然發(fā)展趨勢[13-14]，非洲豬瘟防控也成為近年我縣生豬養(yǎng)殖轉(zhuǎn)型升級的主要推動力。從檢測養(yǎng)殖場(戶)情況可以看出，近3年我縣散養(yǎng)戶數(shù)量銳減，規(guī)模場比例大幅度提升。通過政府扶持及各項(xiàng)強(qiáng)農(nóng)惠農(nóng)政策實(shí)施，我縣溫氏生豬一體化養(yǎng)殖項(xiàng)目穩(wěn)步推進(jìn)，精衛(wèi)湖農(nóng)牧科技規(guī)模豬場洗消中心即將建成，“豬-沼氣”、“豬-魚塘”等生態(tài)型養(yǎng)殖場不斷涌現(xiàn)，增設(shè)數(shù)十家糞污無害化環(huán)保處理設(shè)施，養(yǎng)殖戶開始自覺采用自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出模式，我縣生豬行業(yè)向規(guī)模化、綠色化、標(biāo)準(zhǔn)化、集約化現(xiàn)代養(yǎng)殖模式邁進(jìn)了一大步。

3.4 提高生豬抗體水平的措施及建議

(1)充實(shí)基層防疫管理機(jī)構(gòu)，明確工作職責(zé)，鞏固加強(qiáng)工作隊(duì)伍，確保基層獸醫(yī)工作有專門機(jī)構(gòu)管，有專職人員干。

(2)加強(qiáng)監(jiān)督指導(dǎo)，對免疫工作中發(fā)現(xiàn)的問題及時整改，確保問題得到及時解決。

(3)“以錢養(yǎng)事”機(jī)制激活鄉(xiāng)村防疫人員管理，加強(qiáng)管理培訓(xùn)，從疫苗接種、副反應(yīng)處理、過敏死亡救治等畜禽技術(shù)及免疫原理、免疫規(guī)范等理論知識雙方面提高村防員整體專業(yè)素養(yǎng)。

(4)堅(jiān)持開展常年性抗體監(jiān)測工作，科學(xué)制定免疫程序，督促養(yǎng)殖戶及時進(jìn)行疫苗補(bǔ)免和加免。

(5)實(shí)施“先打后補(bǔ)”，從規(guī)模場過渡，盡可能達(dá)到農(nóng)民散養(yǎng)戶的自主免疫，有效避開農(nóng)忙時節(jié)，提高養(yǎng)殖戶尤其是散養(yǎng)戶豬群的免疫率及場主進(jìn)行免疫工作的靈活性。

(6)加強(qiáng)疫病防控及政策宣傳[15]，壓實(shí)養(yǎng)殖經(jīng)營者防疫主體責(zé)任，促使養(yǎng)殖戶完善各項(xiàng)生物安全防護(hù)措施，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)、全進(jìn)全出、封閉養(yǎng)殖[16]，定期免疫，嚴(yán)格消毒，科學(xué)引種，提高其養(yǎng)殖的規(guī)范性[18-20]。

(7)進(jìn)一步強(qiáng)化獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室安全管理[17]，注重檢測人員素質(zhì)能力培養(yǎng)，提升分子生物學(xué)檢測能力，提高免疫監(jiān)測準(zhǔn)確性。

4 小結(jié)

隨著我縣養(yǎng)豬業(yè)的迅猛發(fā)展，豬瘟、口蹄疫、豬高致病性藍(lán)耳病等重大動物疫病防控工作得到進(jìn)一步深化，防疫工作從季節(jié)性免疫向常年免疫轉(zhuǎn)變、從集中免疫向月月補(bǔ)免轉(zhuǎn)變、從注重免疫密度向注重免疫質(zhì)量轉(zhuǎn)變，免疫接種已經(jīng)成為目前防御疫病傳播的首選措施。2018—2020年長子縣豬口蹄疫免疫效果良好，3年抗體合格率均達(dá)國家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%以上，且規(guī)模場飼養(yǎng)規(guī)范，常年進(jìn)行程序化免疫，抗體水平穩(wěn)定，免疫效果優(yōu)于散養(yǎng)戶。受機(jī)構(gòu)改革、疫情沖擊等多方面因素影響，2020年抗體合格率雖略有下降，但依然保持在國家標(biāo)準(zhǔn)以上，為我縣生豬生產(chǎn)提供了穩(wěn)定環(huán)境。相信通過畜牧獸醫(yī)及其它各級各部門認(rèn)真貫徹農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的決策部署，全面落實(shí)免疫監(jiān)測、疫情排查、宣傳培訓(xùn)等各項(xiàng)綜合防控措施，構(gòu)建更加科學(xué)的動物防疫體系，我縣生豬業(yè)快速健康發(fā)展和公共衛(wèi)生安全都將得到更加堅(jiān)實(shí)有力的保障。