顯微鏡在基層農(nóng)作物病害診斷中的應(yīng)用

劉夢(mèng)穎，史云敏，王桂玲，趙慶華

（1.天津市寶坻區(qū)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，天津 301800；2.天津市寶坻區(qū)農(nóng)村社會(huì)事業(yè)發(fā)展服務(wù)中心，天津 301800）

農(nóng)作物病害鑒別是基層測(cè)報(bào)工作必要的技術(shù)環(huán)節(jié)，能否快速準(zhǔn)確對(duì)病害種類做出判斷，直接關(guān)系到病害測(cè)報(bào)工作的及時(shí)性和準(zhǔn)確性，對(duì)有效指導(dǎo)病害防治具有十分重要的意義。當(dāng)前，天津市基層測(cè)報(bào)工作中，在病害的識(shí)別與診斷方面還主要憑借經(jīng)驗(yàn)和直覺(jué)，存在難以診斷區(qū)分癥狀相近的病害，病害診斷準(zhǔn)確率不高。而顯微鏡檢視技術(shù)可通過(guò)對(duì)病害病原菌特征進(jìn)行微觀觀察，準(zhǔn)確鑒定病害，顯著提高了病害識(shí)別的準(zhǔn)確率，大大提高了農(nóng)作物病害的診斷能力，為農(nóng)作物病害的快速判斷、科學(xué)指導(dǎo)防治提供技術(shù)支撐。

1 農(nóng)作物病害診斷工作存在的問(wèn)題

在基層測(cè)報(bào)工作中，農(nóng)作物病害診斷人為的主觀性較大，主要是通過(guò)人的肉眼去觀察，以經(jīng)驗(yàn)為主要依據(jù)，從而有可能產(chǎn)生判斷誤差。一是病害之間的診斷。在實(shí)際測(cè)報(bào)工作中，一些病害在田間癥狀表現(xiàn)上有很大的相似性，一般很難區(qū)分，容易混淆。同一種病害也存在癥狀的多樣性，更加提高了識(shí)別的困難性。其次是侵染性病害與生理病害問(wèn)題之間的診斷。如農(nóng)作物因施藥不當(dāng)產(chǎn)生的藥害，田間表現(xiàn)與病害也有相似性，而農(nóng)民在施藥過(guò)程中缺乏科學(xué)性，意識(shí)不到在用藥量和噴施技術(shù)方面存在問(wèn)題，盲目否認(rèn)藥害，給基層測(cè)報(bào)人員帶來(lái)誤導(dǎo)。農(nóng)作物的缺素癥或因土壤、溫度、光照等引發(fā)的生理障礙都要與病害區(qū)分開來(lái)。三是一些年輕的測(cè)報(bào)人員缺乏經(jīng)驗(yàn)，對(duì)一些病害的特征還不熟悉，難以準(zhǔn)確判斷。

2 顯微鏡在基層病蟲測(cè)報(bào)中的作用

病蟲樣品通過(guò)簡(jiǎn)單的處理，就可以上鏡進(jìn)行顯微觀察。通過(guò)對(duì)病菌特征形態(tài)或害蟲微觀特征的觀察，有助于快速區(qū)分生理性與病理性病變，可鑒別病菌和害蟲種類或了解害蟲發(fā)育進(jìn)度等信息。顯微觀察操作簡(jiǎn)便，可以減少因人為經(jīng)驗(yàn)不足而造成的病蟲害誤判，減少亂用藥、濫用藥的問(wèn)題。

3 顯微鏡檢視

顯微鏡觀察病原物形態(tài)特征可按下列步驟進(jìn)行：首先，用刀片刮下病健交界部位或病部制成切片。放在載玻片上，加蒸餾水1滴（也可用冷水代替），并覆以蓋玻片；然后，將載玻片放在顯微鏡臺(tái)上，對(duì)好光線，先用低倍鏡觀察，看清后再用高倍鏡觀察。注意病原物的形態(tài)，如菌物菌絲有無(wú)隔膜，孢子或子實(shí)體的形狀、顏色、大小、隔膜數(shù)目等。如為細(xì)菌病害，一般可以看到有大量細(xì)菌從病部溢出（菌溢），由此可以初步判斷。

4 應(yīng)用實(shí)踐

4.1 確診向日葵黑斑病

2017年7月23日，在天津市寶坻區(qū)大口屯鎮(zhèn)田間發(fā)現(xiàn)向日葵葉片上有暗褐色圓形病斑，邊緣有黃綠色暈圈。向日葵屬于經(jīng)濟(jì)作物，在寶坻區(qū)種植的面積較小，所以向日葵病害的相關(guān)知識(shí)測(cè)報(bào)人員不太熟悉。因此，采集部分病葉帶回室內(nèi)進(jìn)行顯微鏡下觀察，根據(jù)病菌形態(tài)，確定為向日葵黑斑病害（圖1）。

圖1 向日葵黑斑病病原菌

4.2 確診小麥赤霉病

2018年5月23日，在寶坻區(qū)牛道口鎮(zhèn)麥田里發(fā)現(xiàn)部分麥穗枯死，有的是整個(gè)穗枯死，有的是部分小穗枯死。根據(jù)植株田間病癥，難以確診是小麥赤霉病還是小麥根腐病。小麥赤霉病近些年一直未發(fā)生，測(cè)報(bào)人員從未看過(guò)其田間癥狀。若為小麥根腐病，田間癥狀上又有些不符。因此，測(cè)報(bào)人員采集了部分小麥病穗帶回室內(nèi)經(jīng)簡(jiǎn)易保濕培養(yǎng)后在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)了大量的禾谷鐮孢菌，由此診斷為小麥赤霉病（圖2）。

圖2 小麥赤霉病病原菌

4.3 確診番茄葉霉病

2019年4月23日，在寶坻區(qū)史各莊鎮(zhèn)設(shè)施番茄田間發(fā)現(xiàn)葉片染病，疑似葉霉病，為了進(jìn)一步確診,采取了部分病葉帶回室內(nèi)進(jìn)行了顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)了大量的番茄葉霉病病原菌，由此準(zhǔn)確確定了病害（圖3）。

圖3 番茄葉霉病病原菌

4.4 小麥莖基腐病

2021年，寶坻區(qū)郝各莊鎮(zhèn)麥田發(fā)生成片黃葉現(xiàn)象，為進(jìn)一步明確是生理性黃葉還是病理性病害，測(cè)報(bào)人員采集了部分病根，經(jīng)簡(jiǎn)易保濕培養(yǎng)后，在顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)了大量的禾谷鐮孢菌（圖4），從而確診了該麥田病害為小麥莖基腐病。

圖4 小麥莖基腐病病原菌

5 小結(jié)與建議

顯微鏡檢視技術(shù)是基層植保人員提高病害診斷準(zhǔn)確率的有效途徑。建議一是相關(guān)部門應(yīng)加強(qiáng)資金支持，為基層配置顯微設(shè)備；二是加大技術(shù)培訓(xùn)力度，讓相關(guān)人員掌握必要的顯微鏡操作、樣品制備以及顯微觀察診斷技能；三是應(yīng)豐富顯微觀察圖冊(cè)，將常見病蟲的微觀圖片編輯成冊(cè)，方便工作人員對(duì)照判斷；四是要繼續(xù)立足科技創(chuàng)新，強(qiáng)化病蟲監(jiān)測(cè)預(yù)警措施，進(jìn)一步加大病蟲害尤其是新型、高風(fēng)險(xiǎn)有害生物的診斷檢測(cè)能力，進(jìn)一步梳理和明確區(qū)域內(nèi)農(nóng)業(yè)病蟲害的主要微生物種類。結(jié)合現(xiàn)有技術(shù)，積極開展基層預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)單位與科研院所合作，使鑒定技術(shù)進(jìn)一步向快速、準(zhǔn)確、便捷、批量鑒定等方向發(fā)展，使其真正服務(wù)于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)民增收。