玉樹地區寄宿生結核分支桿菌的培養分離及耐藥性分析

蘇紅梅

(玉樹州疾病預防控制中心，青海 玉樹 815099)

0 引言

肺結核作為呼吸內科臨床常見病和多發病，屬于傳染性疾病范疇，近年來的發病率較高，病人主要是因為感染了結核分枝桿菌，進而侵害其肺部[1]。隨著肺結核的發病率逐年增加，各類藥物廣泛運用后導致耐藥性問題也日漸凸顯，鑒于此，培養及分離結核分枝桿菌并對其耐藥情況進行分析，對于提高臨床藥物治療效果而言有重要意義[2]。本次研究納入了我科2020年4月1日至2021年6月1日的160例肺結核病人為對象，采集其痰液標本并展開結核分枝桿菌培養，并將其耐藥情況進行總結，并報告如下：

1 資料和方法

1.1 基礎資料

回顧性分析2020年4月1日至2021年6月1日的160例肺結核病人資料，均為寄宿生，性別：男性72例、女性88例；年齡：14歲-20歲，平均(18.00±0.50)歲。納入標準：均屬于痰液標本；病人資料獲得我倫理委員會審核與批準；病人(或)及家屬對于此研究一律知情統一。排除標準：將尿液標準、腦脊液標準及胸腹水標本排除；將中途撤離本次研究的病人排除；將臨床資料不完整的病人排除。

1.2 方法

1.2.1 標本采集

本次研究采集痰液標本主要借助通用的螺旋蓋痰瓶，及直徑為4cm干2cm的蠟紙盒，按照采集的時間不同將標本分為了晨痰、即時痰與夜間痰這三種，在采集痰液標本的時候先由深吸氣子肺深處咳出的血痰、分干酪痰以及黏液痰才符合痰液標本的標準。

1.2.2 涂片鏡檢方法

分別取病人患者按醫囑分別取深部痰液或肺部咳出痰液三份，即晨痰、即時痰與夜間痰標本各一份，經涂片行萋尼氏抗酸染色，借助顯微鏡下鏡檢，嚴格按照《痰涂片鏡檢標準化操作及質量保證手冊》[3]中相關操作方法及流程對所有病人的痰液標本進行處理。

1.2.3 培養方法

檢驗人員參照我國防癆協會頒布的《結核病診斷細菌學檢驗規程》當中的相關要求與標注，現將濃度為4%的氫氧化鈉對采集到的痰液標本進行處理，然后移植到酸性的羅氏培養基當進行培養。其中，針對陽性的痰液標本則可以選擇比例法來測定其藥物的敏感性。本院使用的結核分枝桿菌藥敏試劑包括了鏈霉素、利福平、異煙肼、利福噴丁、乙胺丁醇、卷曲霉素、左氧氟沙星、對氨基水楊酸鈉、阿米卡星這九種，而其中由于利福噴丁與利福平存在相同的藥理作用，所以在統計耐藥性的時候全部按照利福平處理，本次培養與分離處理中涉及的試劑、培養基等一律購于珠海貝索生物技術有限公司。

1.3 耐藥性判斷標準

本次研究中對于結核分枝桿菌的耐藥情況，主要參照《耐藥結核病化學治療指南》中的相關標在進行判斷，一共分做了五種等級，分別是利福平耐藥、單耐藥、多耐藥以及耐多藥、廣泛耐藥，其中，結核分枝桿菌僅僅對一種一線的抗結核藥物產生耐藥，視為單耐藥情況；若結核分枝桿菌僅對利福平產生耐藥，則視為利福平耐藥；若結核分枝桿菌對大于一種的一線抗結核藥物產生耐藥，且不同時間段對利福平、異煙肼產生耐藥，則可以視為多耐藥；若結核分枝桿菌同一時間段對利福平與異煙肼產生耐藥，則視為耐多藥；最后，若結核分枝桿菌在耐多藥的同時至少同時對1種二類抗結核藥物與1種氟喹諾酮類藥物產生耐藥，則視為廣泛耐藥[4]。

1.4 數據統計處理

數據用軟件SPSS 23.0處理，計數資料以%表示，χ2檢驗、計量資料以(±s)表示，t檢驗，P<0.05時差異有統計學意義。

2 結果

2.1 分析160例病人涂片檢查結果

本次研究的160例結核分枝桿菌陽性病人，有146例屬于結核桿菌復合群陽性病例，所占比例是91.25%；其余14例屬于非結核桿菌復合群，所占比例是8.75%，兩者對比差異有統計學意義，χ2=217.8000，P<0.05。

在146例結核桿菌復合群陽性病例痰涂片陽性檢出率78.77%(115/146)，高于非結核桿菌復合群痰涂片檢查的陽性檢出率50.00%(7/14)，對比差異有統計學意義，χ2=5.8378，P<0.05。

2.2 耐藥情況分析

14例非結核桿菌復合群病人對本次研究的所有抗結核藥物均存在耐藥情況。而146例結核桿菌復合群陽性病人對本次研究涉及的九種抗結核藥物存在95例不耐藥，所占比例是65.07%，耐藥51例，所占比例是34.93%，差異有統計學意義，χ2=26.5205，P<0.05，其中，以異煙肼的耐藥率最高，其次是鏈霉素，最后是利福平、左氧氟沙星，耐藥的詳細情況如表2所示。

2.3 初治與復治的耐藥及類型分析

146結核桿菌復合群陽性病人中，初治病人共116例，所占比例是79.45%；復治病人是30例，所占比例20.55%，差異有統計學意義，χ2=101.3151，P<0.05。其中，116例初治病人對的耐藥率是22.41%(26/116),30例復治病人中耐藥率是83.33% (25/30)，差異有統計學意義，χ2=38.9181，P<0.05。

表1 51例結核桿菌復合群陽性病人的耐藥情況(n/%)

從耐藥類型來看：復治病人在廣泛耐藥方面所占比例較初治病人高，χ2=4,5140，P<0.05，詳細情況如表2所示。

表2 復治病人與初治病人的耐藥類型分布情況(%,n)

3 討論

肺結核是一種常見的傳染性疾病，隨著該病的臨床患病率逐年增加，各類抗結核藥物在臨床上的廣泛使用，是的耐藥問題越來越明顯，已經收到臨床醫務人員的廣泛關注。對病人展開痰液標本采集，并進行結核分枝桿菌進行培養研究，對于明確病人的藥敏情況，便于及時調整治療方案，提高效果[5]。

本次研究中，通過采集的160例肺結核病人的痰液標本，160例病人結核分枝桿菌復合群陽性占91.25%，高于非結核分枝桿菌復合群的8.75%，P<0.05。結核桿菌復合群陽性病例痰涂片陽性檢出率是78.77%，高于非結核桿菌復合群的50.00%，P<0.05。由此說明通過痰液標本檢驗結核分枝桿菌的陽性情況，有較高的價值。從病人的耐藥情況來看，非結核分枝桿菌復合群病人對本次研究的所有抗結核藥物均存在耐藥情況，提示這類肺結核病人的臨床治療難度更大。而在結核桿菌復合群陽性病人中不耐藥(65.07%)與耐藥(34.93%)差異有統計學意義，P<0.05，耐藥率較高的四種藥物依次是異煙肼、鏈霉素、利福平、左氧氟沙星，說明在治療結核桿菌復合群陽性病人過程中，主要對上述幾種藥物產生耐藥作用，建議在臨床治療中酌情使用，盡可能選擇其他抗結核藥物來治療，減少病人耐藥的風險。

一般情況下，肺結核很難徹底根治，病情容易反復發作，臨床上將首次接受治療的人成為初治病人，而非首次治療的病人則為復治病人。初治病人的病情較輕，治療難度低于復治病人，所以在耐藥方面復治病人更容易對藥物產生耐藥作用[6]。本次研究組，初治病人的耐藥率(22.55%)低于復治病人(83.33%)，P<0.05，且在廣泛耐藥方面的差異最為顯著，P<0.05，且復治病人存在廣泛耐藥情況，臨床用藥難度更大。

綜上，經過展開一系列的藥敏實驗分析，能夠明確各類型肺結核病人的耐藥情況，為臨床治療提供客觀參考。