不同蕨菜制品醇提物體外抗氧化及降血糖活性研究

李榕娣，莊遠杯，魏愛紅，鐘婉如，張 超，張 勇，張聲源,

（1.嘉應學院廣東省山區特色農業資源保護與精準利用重點實驗室，廣東梅州 514015；2.嘉應學院醫學院客家藥用生物資源研究所，廣東梅州 514031）

蕨菜為烏毛蕨科烏毛蕨屬烏毛蕨（Blechnum orientaleL.）的嫩芽，又名拳頭菜、龍頭菜，分布于中國各地[1]。蕨菜全草入藥，用于清熱利濕、消腫、利水、安神等功效[2]?，F代藥學研究表明，蕨菜含有許多黃酮類、藏素類、苯甲酸類等成分[3]。其中，黃酮為其主要有效成分，具有降血脂、抗過敏、增強機體免疫力、抗腫瘤等藥理活性[4]。然而，關于抗氧化活性的研究多局限于采用單一加工處理方式的蕨菜粗提物，對不同加工處理方式蕨菜的抗氧化和降血糖活性與組分相關性研究未見報道，目標成分不明確。民間即食蕨菜不同加工處理方式主要有兩種：一是加1%的食鹽沸水熱燙殺青，脆化冷卻，鹽水浸泡出售（濕品）；二是經1%的食鹽沸水熱燙，脆化冷卻，自然曬干（干品）[5]。研究顯示，不同加工處理過程對蕨菜成分含量影響較大，其中經過加工處理的蕨菜中原蕨苷、維生素C 含量明顯低于新鮮蕨菜[6?7]，但針對不同加工處理方式蕨菜的總酚、總黃酮成分含量及抗氧化、降血糖活性比較研究未見報道。

糖尿?。―iabetes Mellitus，DM）已嚴重威脅人體健康，2019 年全球約4.63 億20～79 歲成人患糖尿病，預計到2030 年，糖尿病患者會達到5.784 億，呈高度流行態勢[8?9]。α-葡萄糖苷酶位于小腸刷狀緣，是降低餐后血糖的有效分子靶標，抑制其活性可顯著延緩體內葡萄糖的吸收，降低血糖水平[10]。研究表明，持續高血糖水平引起的氧化應激反應可促進動脈粥樣硬化等糖尿病并發癥的形成[11]，減少自由基的產生或直接淬滅體內產生的自由基是預防和治療糖尿病及其并發癥的有效手段[12]。目前臨床廣泛運用的抗氧化劑及α-葡萄糖苷酶抑制劑存在毒副作用，如阿卡波糖引起脹氣、腹部不適、排氣等胃腸道不良反應[13?14]。天然產物降糖作用具有多途徑、多靶點的藥理特點，作用溫和持久、毒副作用小，可有效減輕糖尿病的癥狀并延緩并發癥的發生和發展[15]。從可食用的天然產物中尋找安全、有效、且同時具有α-葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化活性的藥物已成為研究熱點。

為明確蕨菜的食用及藥用價值，實驗測定三種不同蕨菜95%乙醇提取物的總酚、總黃酮的含量差異，測定抗氧化活性、體外α-葡萄糖苷酶抑制活性、體外α-淀粉酶抑制活性，并對總酚、總黃酮含量與生物活性進行了相關性分析，為蕨菜的進一步研究和開發利用提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

蕨菜 2019 年2～3 月采于廣東省梅州市大埔縣，經嘉應學院醫學院張聲源副教授鑒定為烏毛蕨科（Blechnaceae）的烏毛蕨（Blechnum orientale L.）的嫩芽；α-葡萄糖苷酶（G5003-100U）、α-淀粉酶（A3176-500KU） sigma 公司；對-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（pNPG）、對硝基苯酚（pNP） 上海源葉科技有限公司；阿卡波糖 德國拜耳公司；3,5-二硝基水楊酸（DNS） 國藥集團化學試劑有限公司；葡萄糖 西隴科學股份有限公司；丙三醇 天津市富宇精細化工有限公司；可溶性淀粉 天津市大茂化學試劑廠；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、2,2-聯氮基-雙-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺）二氨鹽（ABTS）、NaH2PO4·2H2O、Na2HPO4·12H2O、FeSO4·7H2O、水楊酸、K3[Fe（CN）6]、三氯化鐵、三氯乙酸、維生素C（Vc）、亞硝酸鈉 上海阿拉丁生化科技股份有限公司；硝酸鋁 天津市科密歐化學試劑有限公司；沒食子酸 分析純，上海金穗生物科技有限公司；蘆丁

分析純，成都昂賽思生物科技有限公司；甲醇、乙腈 色譜純，fisher scientific 公司。

Alliance 2695 型高效液相色譜儀、XBridge Peptide BEH C18色譜柱（250 mm× 4.6 mm，5 μm）沃特世科技（上海）有限公司；UV-1800 型紫外-可見分光光度計 日本島津公司；MING-CHE 24ΜV 型超純水機 法國Merck Millipore 公司；PB-21 型酸度計 北京賽多利斯科學儀器有限公司；N-1100V 型旋轉蒸發儀 上海愛朗儀器有限公司；FA2004 型電子分析天平、BS110s 型電子分析天平德國Sartorius 公司；WJX-A1000 型高速多功能粉碎機 浙江省永康市紅太陽機電有限公司；JP-100S 型超聲波清洗器 深圳市潔盟清洗設備有限公；GL-25M 型離心機 上海趙迪生物科技有限公司；XW-80A 型旋渦混合器 上海精科實業有限公司；TGL16MC 型臺式高速冷凍離心機 長沙湘銳離心機有限公司；數顯HH-6 系列恒溫水浴鍋 金壇市國旺實驗儀器廠。

1.2 實驗方法

1.2.1 不同蕨菜醇提取物的制備 參考文獻[5]，a.鮮品（新鮮采摘的蕨菜）；b.濕品（加1%的食鹽沸水熱燙、殺青）；c.干品（經1%的食鹽沸水熱燙、殺青，再自然曬干）；取上述三種供試品各2.0 kg，切碎，分別加10 L的95%乙醇浸泡12 h，超聲輔助提取30 min（溫度設為40 ℃，200 W，40 kHz）、過濾，重復上述操作2 次，合并三次濾液，濃縮得浸膏，得到鮮品浸膏210 g（得率10.5%，得率（%）=（浸膏質量/2000）×100，下同）、濕品浸膏196 g（得率9.8%）、干品浸膏228 g（得率11.43%），放置于冰箱4 ℃冷藏，備用。樣品使用前加磷酸緩沖溶液（PBS，0.067 mol/L，pH6.8）溶解制備成不同質量濃度的溶液，質量濃度均以提取物計。

1.2.2 硝酸鋁法測定總黃酮含量

1.2.2.1 蘆丁標準曲線的制備 參考文獻[16?17]，精密稱取干燥至恒重的蘆丁對照品20 mg，用95%乙醇溶解并定容至100 mL的容量瓶中，搖勻，得質量濃度為0.2 mg/mL的蘆丁對照品標準溶液，按濃度梯度配制成最終質量濃度為0.028、0.056、0.084、0.112、0.140 mg/mL的蘆丁對照品標準溶液。分別精密移取不同質量濃度梯度蘆丁對照品標準溶液7 mL，依次加入5%亞硝酸鈉溶液1 mL，震蕩搖勻，放置4 min，加入10 % Al（NO3）3溶液1 mL，搖勻，放置4 min，加入4%氫氧化鈉試液10 mL，再加蒸餾水至刻度，充分搖勻，放置10 min，以95%的乙醇和顯色試劑為空白，按照紫外-可見分光光度法，在波長為500 nm 處測定吸光度。吸收度（A）與其質量濃度（C，mg/mL）用最小二乘法求得回歸方程。

1.2.2.2 總黃酮含量的測定 分別精確移取待測樣品溶液3 mL，按照 “1.2.2.1”項的實驗方法于500 nm處測定其吸光度，以PBS 代替待測樣品為空白對照。每組實驗平行測定3 次。各提取物的總黃酮含量參考蘆丁（rutin,RT）標準曲線用蘆丁當量（每克干樣品中黃酮類化合物相當于蘆丁的毫克數，mg/g）表示，根據公式（1）計算。每個提取物平行測定3 次。

式中：c 為待測樣品稀釋后的總黃酮濃度，由標準曲線擬合得出，mg/mL；v 為各待測樣品提取液總體積，mL；k 為待測樣品提取液稀釋倍數；m 為蕨菜粉末質量，g。

1.2.3 福林酚法測定總酚含量

1.2.3.1 沒食子酸標準曲線的制備 參考文獻[18?19]，精確稱取干燥至恒重的沒食子酸標準品20 mg，用蒸餾水溶解并定容于100 mL 棕色量瓶中，得質量濃度為0.2 mg/mL 沒食子酸標準液。分別精密移取沒食子酸標準溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL 置于6 個10 mL 棕色具塞比色管中，依次加入6 mL>蒸餾水，0.5 mL 福林試劑，充分搖勻，室溫避光靜置2 min，再加2 mL 7.5%碳酸鈉溶液，用蒸餾水定容至刻度，40 ℃水浴10 min，最后25 ℃水浴暗置60 min。得沒食子酸質量濃度分別為0、2、4、6、8、10 μg/mL的標準溶液，在760 nm 波長處測定其各吸光度。吸收度（A）與其濃度（C，μg/mL）用最小二乘法求得回歸方程。

1.2.3.2 不同加工方法蕨菜總酚含量的測定 分別精確移取待測樣品溶液10 mL，按照“1.2.3.1”項的實驗方法于760 nm 處測定其吸光度，以PBS 代替待測樣品為空白對照。每組實驗平行測定3 次。各提取物的總酚含量參考沒食子酸（gallic acid，GA）標準曲線用沒食子酸當量（每克干樣品中酚類化合物相當于沒食子酸的毫克數，mg/g）表示，根據公式（2）計算。每個提取物平行測定3 次。

式中：c 為待測樣品稀釋后的總酚濃度，由標準曲線擬合得出，mg/mL；v 為各待測樣品提取液總體積，mL；k 為待測樣品提取液稀釋倍數；m 為蕨菜粉末質量，g。

1.2.4 抗氧化活性測定

1.2.4.1 清除DPPH 自由基活性測定 參考文獻[20?21]，稍作改進。分別精密移取2.0 mL 不同質量濃度被試樣品（不同加工方式蕨菜質量濃度均為：50.0、25.0、12.5、6.25、3.125 μg/mL；Vc 為：17.0、12.0、8.1、5.6、4.0 μg/mL）于10 mL 試管中，分別加入0.15 mmoL/L DPPH 溶液2.0 mL，室溫避光靜置20 min，于波長517 nm 處測定吸光度（Ai）；同時測定2.0 mL DPPH溶液與2.0 mL 甲醇混合后在波長517 nm 處的吸光度（A0）；測定2.0 mL 甲醇與2.0 mL 樣品溶液在波長517 nm 處的吸光度（Aj）；每組平行測定3 次，以抗壞血酸作為陽性對照。根據公式（3）計算出DPPH 自由基的清除率。

1.2.4.2 清除ABTS 自由基活性測定 參考文獻[22?23]，稍作改進。將7.0 mmoL/L的ABTS 溶液與2.45 mmoL/L 過硫酸鉀溶液等體積混合，室溫避光靜置12～16 h，制備ABTS 自由基母液。10 mmoL/L（pH7.4）磷酸緩沖溶液將ABTS 自由基母液稀釋，使其在波長734 nm 處吸光度達到（0.70±0.02）。分別將0.1 mL 不同質量濃度被試樣品（不同加工方式蕨菜質量濃度均為：0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125 mg/mL；Vc 為：0.15、0.12、0.096、0.049、0.039 mg/mL）加入3.9 mL ABTS 自由基溶液中，振蕩30 s 后室溫靜置10 min，于波長734 nm 處測量吸光度（Ai）；同時測定3.9 mL ABTS 自由基溶液與0.1 mL 甲醇溶液混合后在波長734 nm 處的吸光度（A0）；測定3.9 mL（10 mmoL/L；pH7.4）磷酸緩沖溶液與1.0 mL 樣品溶液在波長734 nm 處的吸光度（Aj）；每組平行測定3 次，以抗壞血酸作為陽性對照。根據公式（4）計算出ABTS 自由基的清除率。

1.2.4.3 對Fe3+還原能力測定 參考文獻[24]，稍作改進。取各不同質量濃度被試樣品（不同加工方式蕨菜質量濃度均為：90.0、80.0、70.0、60.0、50.0 μg/mL；Vc 為：36.0、24.0、16.0、12.0、8.0 μg/mL）2.5 mL，加入2.0 mol/L（pH6.8）的磷酸緩沖液2.5 mL 及1%的鐵氰化鉀溶液2.5 mL，搖勻后置于50 ℃恒溫水浴鍋中加熱反應20 min，急速冷卻后加入10%的三氯乙酸溶液2.5 mL，充分混勻，于4000 r/min 離心10 min，取上清液2.5 mL，依次加入2.0 mL 蒸餾水與0.5 mL FeCl3溶液混合均勻，于700 nm 處測定此反應體系的吸光值（Ai）。以 2.5 mL的蒸餾水代替不同濃度的試樣品于在700 nm 處測得空白吸光值（A0）。不同質量濃度的Vc 標準溶液重復上述操作，以吸光度為縱坐標（Y），Vc 溶液濃度（μmol/mL）為橫坐標（X），繪制標準曲線。每組平行測定3 次，鐵還原力大小用每克樣品的Vc 當量表示（μmol Vc/g）。

1.2.5 體外降血糖活性評價

1.2.5.1 對α-葡萄糖苷酶抑制活性的測定 參考文獻[25]，稍作改進。精密吸取0.067 mol/L（pH6.8）的磷酸鹽緩沖溶液250 μL 于試管中、加入被試樣品50 μL、0.1 U/mLα-葡萄糖苷酶300 μL，混勻，37 ℃恒溫水浴20 min，加入4.0 mmol/L pNPG 200 uL，混勻，37 ℃恒溫反應60 min，加入甲醇800 μL 終止反應，0.45 μm 微孔濾膜過濾，用HPLC 檢測pNP，每組平行三次，以阿卡波糖為陽性對照。根據公式（5）計算酵母菌源α-葡萄糖苷酶的抑制率。

式中：Ao為緩沖液+酶液+底物反應后的pNP 峰面積；Ai:樣品+酶液+底物反應后的pNP 峰面積；Aj:樣品+緩沖液+底物反應后的pNP 峰面積。

色譜條件：色譜柱為XBridge Peptide BEH C18柱（5 μm，4.6 mm×250 mm）；流動相：乙腈（A 液），0.1%甲酸水溶液（B 液）。梯度洗脫條件為：0～8 min，20%～30% A 液；8～13 min，30%～80%A 液；13～15 min，80%～20% A 液；15～25 min，20%A 液；進樣量：10 μL；流速：1.0 mL/min；柱溫：35 ℃；檢測波長：315 nm。

1.2.5.2 對α-淀粉酶抑制活性的測定 參考文獻[26?27]，稍作改進。精密吸取被試樣品0.3 mL，加0.3 mLα-淀粉酶溶液，混勻，于37 ℃水浴孵育5 min，加入0.3 mL 在 37 ℃水浴中同時預溫5 min的1%可溶性淀粉溶液，混勻，反應15 min，立即加入0.5 mL DNS，煮沸5 min，隨后于冰水中靜置20 min，0.067 mol/L（pH6.8）磷酸緩沖溶液定容至5 mL，540 nm 下測吸光值，每組平行三次，以阿卡波糖為陽性對照。根據公式（6）計算α-淀粉酶抑制率。

式中：A0為樣品溶液+酶溶液+PBS 溶液反應體系的吸光度值；Ab為酶溶液+PBS 溶液反應體系的吸光度值；Ai為樣品溶液+酶溶液+淀粉溶液反應體系的吸光度值；Aj為樣品溶液+PBS+淀粉溶液反應體系的吸光度值。

1.3 數據統計分析

實驗重復3 次，采用Origin 8.5 軟件進行數據處理，結果以平均值±標準差（）表示，并得到相應的半數抑制濃度（IC50）。利用單因素方差分析和Duncan 法檢驗多組數據間差異的顯著性（P<0.05 顯著相關；P<0.01 極顯著相關）。

2 結果與分析

2.1 總黃酮和總酚含量

蘆丁的標準曲線如圖1 所示，曲線的線性擬合方程Y=13.638X–0.033，R2=0.999，線性良好。

圖1 蘆丁標準曲線Fig.1 Rutin standard curve

沒食子酸的標準曲線如圖2 所示，曲線的線性擬合方程Y=0.1056X+0.0257，R2=0.997，線性良好。

圖2 沒食子酸標準曲線Fig.2 Gallic acid standard curve

由表1 可知，不同蕨菜的總黃酮、總酚含量大小依次為鮮品>濕品>干品，差異顯著（P<0.05），表明經過食鹽水熱湯加工處理后的濕品和干品蕨菜總酚和總黃酮含量低，這可能與酚類和黃酮類中的羥基受熱不穩定性有關，研究顯示經過熱燙后的酚類物質含量下降達到約60%[28]。其中鮮品總黃酮含量高達（156.75±1.28）mg RT/g，鮮品總酚含量高達（593±3.45）mg GA/g，該結果與陳乃東等[29]的研究結果一致。

表1 不同蕨菜醇提物總黃酮、總酚含量（,n=3）Table 1 Total flavonoid,polyphenol contents of different processing products from Blechnum orientale L.(,n=3)

表1 不同蕨菜醇提物總黃酮、總酚含量（,n=3）Table 1 Total flavonoid,polyphenol contents of different processing products from Blechnum orientale L.(,n=3)

注：同行肩標字母不同表示差異顯著（P<0.05），表2～表5同。

2.2 抗氧化評價

2.2.1 DPPH 自由基清除作用 對DPPH 自由基清除作用由圖3、表2 可知，不同蕨菜醇提取物對DPPH 自由基均具有一定程度的清除作用，清除率隨質量濃度的增大而增大，呈一定的量效關系。IC50值大小依次為蕨菜干品>濕品>鮮品>Vc，差異顯著（P<0.05）。IC50值越小，對自由基的清除能力越強。表明蕨菜鮮品對DPPH 自由基的清除能力最強，其IC50=（17.01±0.022）μg/mL，在質量濃度為50.0 μg/mL時清除率可達97.28%。

圖3 不同蕨菜醇提取物對DPPH 自由基的清除作用Fig.3 Effect of different processing products from Blechnum orientale L. on scavenging rate for DPPH radical

表2 不同蕨菜醇提取物對DPPH 自由基清除作用的IC50 值（,n=3）Table 2 IC50 values of different processing products from Blechnum orientale L.on scavenging rate for DPPH radical (,n=3)

表2 不同蕨菜醇提取物對DPPH 自由基清除作用的IC50 值（,n=3）Table 2 IC50 values of different processing products from Blechnum orientale L.on scavenging rate for DPPH radical (,n=3)

2.2.2 ABTS 自由基清除作用 對ABTS 自由基清除作用由圖4、表3 可知，不同蕨菜醇提取物對ABTS 自由基均具有一定程度的清除作用，清除率隨質量濃度的增大而增大，呈一定的量效關系。IC50值大小依次為蕨菜干品>濕品>鮮品>Vc，差異顯著（P<0.05）。表明蕨菜鮮品對ABTS 自由基的清除能力最強，其IC50=（0.20±0.001）mg/mL，在質量濃度為0.5 mg/mL 時最高清除率可達99.59%。

圖4 不同蕨菜醇提取物對ABTS 自由基的清除作用Fig.4 Effect of different processing products from Blechnum orientale L. on scavenging rate for ABTS radical

表3 不同蕨菜醇提取物對ABTS 自由基清除作用的IC50 值（,n=3）Table 3 IC50 values of different processing products from Blechnum orientale L.on scavenging rate for ABTS radical (,n=3)

表3 不同蕨菜醇提取物對ABTS 自由基清除作用的IC50 值（,n=3）Table 3 IC50 values of different processing products from Blechnum orientale L.on scavenging rate for ABTS radical (,n=3)

2.2.3 Fe3+還原能力 對Fe3+還原能力由圖5 可知，不同蕨菜醇提取物均具有一定的Fe3+還原能力，還原能力大小依次為鮮品>濕品>干品，其Vc 當量分別為（1427.77±1.36）、（1218.24±0.25）、（340.68±2.45）μmol Vc/g，差異顯著（P<0.05）。

圖5 蕨菜不同加工品對Fe 3+ 還原能力的影響Fig.5 Effect of different processing products from Blechnum orientale L.on reducing ferric

綜合DPPH 自由基清除能力、ABTS 自由基清除能力和鐵離子還原能力的實驗結果，不同加工品抗氧化能力大小依次為鮮品>濕品>干品，表明經過加工處理后的蕨菜抗氧化活性降低，該結果與總黃酮、總酚變化趨勢一致，這可能與蕨菜在經過加工處理后總黃酮、總酚和蛋白質、維生素C 等營養成分含量降低有關[7]。吳永祥等[30]也觀察到類似的趨勢，其結果顯示經過發酵加工處理后的蕨菜醇提物總酚含量降低，清除DPPH 自由基和ABTS 自由基能力降低。

2.3 體外降血糖活性

2.3.1 對a-葡萄糖苷酶活性的抑制 圖6、表4 可知，不同蕨菜醇提取物對酵母菌來源α-葡萄糖苷酶均具有一定程度的抑制作用，且在一定質量濃度范圍內，隨著質量濃度的增加，其抑制活性顯著提高，呈一定的量效關系，α-葡萄糖苷酶活性抑制的IC50值大小依次為鮮品>干品>濕品，差異顯著（P<0.05）。表明蕨菜濕品抑制α-葡萄糖苷酶活性最強，其IC50=（1.65±0.054）μg/mL，在質量濃度為15.0 μg/mL時抑制率可達89.62%。

圖6 不同蕨菜醇提取物對酵母菌來源α-葡萄糖苷酶抑制活性Fig.6 Inhibition of different processing products from Blechnum orientale L.on yeast α-glucosidase activity

表4 不同蕨菜醇提取物對酵母菌來源α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50 值（,n=3）Table 4 IC50 of the inhibitory activity of different processing products from Blechnum orientale L.to yeast α-glucosidase (,n=3)

表4 不同蕨菜醇提取物對酵母菌來源α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50 值（,n=3）Table 4 IC50 of the inhibitory activity of different processing products from Blechnum orientale L.to yeast α-glucosidase (,n=3)

2.3.2 對α淀粉酶活性的抑制 由圖7、表5 可知，不同蕨菜醇提取物對α-淀粉酶均具有一定程度的抑制作用，且在一定質量濃度范圍內，隨著質量濃度的增加，其抑制活性顯著提高，呈一定的量效關系。對α-淀粉酶活性抑制的IC50值大小依次為鮮品>干品>濕品，差異顯著（P<0.05）。其中，濕品的IC50值低于阿卡波糖，干品和鮮品的IC50值高于阿卡波糖。表明蕨菜濕品抑制α-淀粉酶活性最強，且活性強于陽性對照阿卡波糖，其IC50=（0.056±0.001）mg/mL，在質量濃度為0.1 mg/mL 時抑制率可達77.09%。

表5 不同蕨菜醇提取物對α-淀粉酶抑制活性的IC50 值（,n=3）Table 5 IC50 of the inhibitory activity of different processing products from Blechnum orientale L.to α-amylase (,n=3)

表5 不同蕨菜醇提取物對α-淀粉酶抑制活性的IC50 值（,n=3）Table 5 IC50 of the inhibitory activity of different processing products from Blechnum orientale L.to α-amylase (,n=3)

圖7 不同蕨菜醇提取物對α-淀粉酶抑制活性Fig.7 Inhibition of different processing products from Blechnum orientale L.on α-amylase activity

綜合α-葡萄糖苷酶與α-淀粉酶活性抑制的結果顯示，不同蕨菜醇提取物體外降血糖活性大小依次為濕品>干品>鮮品，表明加工處理后的蕨菜的降血糖活性優于新鮮蕨菜。其中，不同蕨菜醇提取物對酵母菌來源α-葡萄糖苷酶抑制作用強于阿卡波糖，其可能原因在于蕨菜提取物中豐富的酚類、黃酮、多糖、生物堿等成分類型和多種成分的協調作用的結果有關[2]，研究顯示酚類、多糖具有顯著的α-葡萄糖苷酶抑制活性，甚至優于阿卡波糖[31]。

2.4 相關性分析

由表6 可知，總酚和總黃酮含量與抗氧化活性（DPPH 自由基清除能力、ABTS 自由基清除能力、還原能力）均呈極顯著正相關性（P<0.01）。總酚與α-葡萄糖苷酶抑制活性呈極顯著正相關性（P<0.01），但總酚與α-淀粉酶抑制活性、總黃酮與α-葡萄糖苷酶抑制活性、α-淀粉酶抑制活性呈顯著正相關性（P<0.05）。

表6 不同蕨菜醇提取物總酚、總黃酮與抗氧化、α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶的抑制活性的相關性Table 6 The relationships of the contents of total polyphenols and total flavonoids with the antioxidant activity、α-glucosidase and α-amylase inhibitory activity of different processing products from Blechnum orientale L.

結果表明，總酚、總黃酮是蕨菜發揮抗氧化活性的重要物質基礎，可能與其總酚、總黃酮富含酚羥基結構有關[32]，而其降血糖活性與總酚、總黃酮未顯示極顯著正相關，表明其發揮降血糖活性物質基礎除總酚、總黃酮，可能與其他活性成分，如蕨菜中的多糖、生物堿類有關[2]。

3 結論

實驗以不同蕨菜醇提取物為原料，對其總酚、總黃酮含量及其體外抗氧化和降血糖活性進行了系統研究。結果顯示，不同蕨菜醇提取物均含有豐富的總酚、總黃酮和顯著的抗氧化和降血糖活性，且抗氧化活性與總酚和總黃酮含量呈極顯著相關，降血糖活性與總酚和黃酮呈顯著正相關。其中，蕨菜鮮品具有最高的總酚、總黃酮含量和抗氧化活性，蕨菜濕品具有最高的體外降血糖活性，應重點從鮮品出發尋找發揮抗氧化活性的酚類和黃酮類成分，從濕品出發尋找降低餐后血糖的活性成分。

研究結果對蕨菜的生產加工提供一定的數據參考，特別是對蕨菜在食品藥品工業中的潛在應用研究具有一定的參考價值。然而，蕨菜發揮抗氧化活性中酚類、黃酮類具體結構及構效關系和作用機制有待進一步深入，除酚類、黃酮類，蕨菜發揮降血糖活性的其他物質基礎和作用機制有待進一步闡明。