葉延瑤,張 洪,宋 敏
1.重慶市高新區人民醫院檢驗科,重慶 400039;2.重慶大學醫學院,重慶 400044;3.陸軍軍醫大學附屬第一醫院輸血科,重慶 400038
艾滋病是由人類免疫缺陷病毒(HIV)引起的以免疫功能障礙為特征的傳染性疾病,傳播途徑主要為性傳播、血液傳播和母嬰傳播[1]。目前對于艾滋病的診斷主要依據實驗室檢測,包括HIV抗體檢測、HIV抗原抗體聯合檢測、免疫印跡試驗(WB)、重組/線性免疫印跡試驗(RIBA/LIA)及核酸檢測等。由于醫學界至今仍無針對艾滋病的有效疫苗及特效藥物,早發現、早治療便成為控制傳染源的關鍵[2]。為了進一步保障血液安全,2010年起我國各血液中心便陸續開始對獻血者進行核酸檢測,不斷有報道單獨HIV核酸陽性的獻血者被檢出[3],有效地降低了HIV經血傳播的風險。為了進一步減少醫院內感染,陸軍軍醫大學附屬第一醫院(以下簡稱本院)對輸血、手術及有高危行為特定患者行HIV-1型核酸檢測。現將本院發現的1例HIV抗原抗體檢測呈陰性而核酸檢測呈陽性的病例情況報道如下。
1.1一般資料 患者,女,76歲,2020年于1月19日從外院轉入本院肝膽科,有多次輸血史,多次手術史,2月5日HIV抗原抗體檢測為陽性后,在本院4 ℃標本庫(HIV陽性血液標本長期保存,HIV和核酸檢測血液標本保存1個月以上,常規血液標本保存1周以上)中找到1月20日、1月26日、2月1日不同日期的血液標本進行HIV抗原抗體和HIV核酸檢測。
1.2儀器與試劑 HIV抗體篩查試劑(HIV抗原抗體診斷試劑盒,北京萬泰公司,批號:H20201115),核酸提取試劑(廣州美基公司,批號:202008),HIV-1型核酸檢測試劑(中山大學達安基因,批號:2020004),全自動加樣儀(瑞士HAMILTON),全自動酶免分析儀(瑞士HAMILTON),核酸提取儀(Thermo Fisher Scientific),熒光定量PCR儀(美國ABI7500)。
1.3檢測方法
1.3.1檢測流程 收集該患者1月20日、1月26日、2月1日、2月5日血液標本,采用HIV抗原抗體檢測試劑進行雙孔酶聯免疫吸附試驗(簡稱酶免檢測),采用HIV-1型核酸檢測試劑進行核酸檢測。
1.3.2酶免檢測 標本嚴格按照試劑說明書操作,S/CO值≥1判為有反應,S/CO值<1判為無反應。
1.3.3HIV-1型核酸檢測 采用HIV-1型核酸提取試劑,通過Thermo Fisher Scientific核酸提取儀進行樣本核酸提取,用HIV-1型核酸檢測試劑在ABI7500 PCR擴增儀上進行擴增,整個操作嚴格按照試劑說明書和儀器操作指南進行操作。核酸檢測循環閾值(Ct值)≤45則視為有反應,Ct值>45則視為無反應。
1月20日的血液標本核酸檢測為有反應(Ct值為38.92,病毒載量為18.56 copy/mL),酶免檢測為無反應,確證檢測為HIV-1型抗體陰性;1月26日標本核酸檢測為有反應(Ct值為32.39,病毒載量為2.26×103copy/mL),酶免檢測為無反應,確證檢測為HIV-1型抗體陰性;2月1日標本核酸檢測為有反應(Ct值為25.42,病毒載量為3.79×105copy/mL),酶免檢測為無反應,確證檢測為HIV-1抗體陰性;2月5日標本核酸檢測為有反應(Ct值為18.16,病毒載量為7.89×107copy/mL),酶免檢測為有反應,確證檢測為HIV-1抗體不確定;2月12日,核酸檢測為有反應(Ct值為14.23,病毒載量為1.42×108copy/mL),酶免檢測為有反應,確證檢測為HIV-1抗體陽性,該患者首次于陸軍軍醫大學附屬第一醫院就診時,HIV型核酸檢測便已呈現有反應,陽性強度隨時間推移逐次增高,HIV-1型核酸檢測比HIV抗原抗體檢測HIV的窗口期要短,見表1。

表1 HIV酶免檢測及核酸檢測結果
截至2020年,中國艾滋病的感染人數已經超過百萬[4],在目前該病無法治愈的情況下,預防艾滋病感染顯得尤為重要,早發現、早干預、早治療是一種行之有效的方法[5]。血站在全面開展獻血者HIV核酸檢測后,每年都會有大量的窗口期感染者被發現,大大減少了經血傳播HIV的風險[6]。對患者而言開展HIV核酸篩查也有重要意義:其一,早發現、早治療可有效減少醫院內感染的風險;其二,有利于患者更早得到有效治療,HIV感染者可以通過調整手術臺次或轉到專科醫院就診,減少醫務人員職業暴露和患者間交叉感染的風險;其三,早期發現HIV窗口期的感染者,近親屬間采取防護措施可有效避免HIV傳播;其四,可減少因窗口期問題而導致的醫療糾紛事件。
盡管HIV核酸檢測可以大大縮短窗口期,但是所有的檢測方法均存在窗口期,HIV-1核酸檢測的窗口期約7 d,HIV抗原抗體檢測的窗口期約為14 d,HIV抗體檢測約為21 d[7-8]。另外,由于HIV-2型非常少見,目前HIV核酸檢測試劑主要針對HIV-1型,因而,對于 HIV-2型則會漏檢。同時,對于免疫力低下的HIV感染患者,則會出現HIV抗體持續陰性的可能,另外,終末期艾滋病患者或孕產婦等特殊人群HIV檢測結果有差異[9-10]。因此,建議采用核酸和酶免方法同時檢測的模式,以提高HIV感染者的檢出率。