馬泰勒蟲頂膜抗原1基因的原核表達與鑒定

范士龍，劉丹丹，韋麗婷，蘆 星，李思媛，王金明，呼爾查，李永暢，巴音查汗，張 偉 (新疆農業大學 動物醫學學院，新疆 烏魯木齊 830052)

馬泰勒蟲(Theileriaequi)是一種由硬蜱傳播，寄生于馬屬動物的紅細胞及網狀內皮系統細胞內的頂復門血液原蟲，與馬駑巴貝斯蟲(Babesiasiscaballi)同屬于馬梨形蟲范疇[1-2]。馬泰勒蟲病的臨床癥狀主要為稽留熱、貧血、黃疸等[3]，其主要臨床特點為急性溶血性貧血[4]。孕馬感染此病易引起早產或流產，嚴重時會導致死亡[3]，對畜牧業的生產和發展造成嚴重影響。目前世界動物衛生組織(OIE)已將該病列入動物疫病名錄，屬法定報告疫病，在我國該病被列為二類動物疫病[5]。目前對于該病尚無十分有效的藥物和疫苗，因此如何有效預防和控制馬泰勒蟲病、減少其危害是相關領域研究的熱點。

頂復門原蟲的頂膜抗原1(apical membrane antigen 1，AMA1)是一種由微線體分泌的高度保守蛋白的Ⅰ型跨膜蛋白，包括N端氨基端富半胱氨酸胞外區、單一跨膜結構域以及C端羧基末端細胞質尾巴三部分[6]。對于頂復門原蟲AMA1蛋白的研究，戚南山等[7]主要關注該蛋白與RONs(棒狀體頸部蛋白)家族蛋白相互結合形成復合連接體后，參與到蟲體入侵宿主細胞的過程；以及KOCKEN等[8]將該蛋白作為候選抗原制備疫苗預防頂復門原蟲的感染。目前AMA1蛋白在弓形蟲(Toxoplasma)、瘧原蟲(Plasmodium)、巴貝斯蟲(Babesia)、球蟲(Eimeria)等頂復門原蟲中均有發現，并且在柔嫩艾美耳球蟲(Eimeriatenella)、剛地弓形蟲(Txoplasmagondii)和間日瘧原蟲(Plasmodiumvivax)中均被證實參與到蟲體對宿主的入侵過程中[7]。在梨形蟲中，目前僅有研究證明田鼠巴貝斯蟲(Babesiamicroti)和分歧巴貝斯蟲(Babesiadivergens)的AMA1蛋白參與了宿主入侵過程[9-10]。……