PD-L1和EGFR 在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)及關(guān)系分析

羅小紅，朱本玲

重慶市長(zhǎng)壽區(qū)人民醫(yī)院病理科，重慶 401220

肺癌患者以病理類型別依據(jù)，可以分成兩種肺癌，一種為小細(xì)胞肺癌，另一種為非小細(xì)胞肺癌，根據(jù)有關(guān)統(tǒng)計(jì)表明：所有肺癌患者中大約有70%為非小細(xì)胞肺癌[1]。國(guó)內(nèi)的早期肺癌篩查技術(shù)尚不成熟，無法有效在全國(guó)范圍內(nèi)實(shí)施早期肺癌篩查，或者說篩查工作開展開來比較困難。肺癌的發(fā)生率逐年提升，導(dǎo)致病死率逐漸升高，如果肺癌得到確診，患者的病情通常發(fā)展到中期或者后期，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，威脅其生命安全。近些年來，臨床中不斷深入研究非小細(xì)胞肺癌，人們從不同的角度來研究非小細(xì)胞肺癌的發(fā)病機(jī)制，從而制訂出不同的具有針對(duì)性治療方案[2]，使患者得到有效治療，腫瘤免疫以及對(duì)于腫瘤增殖靶向治療的研究已經(jīng)在逐步開展，并且得到了一定的研究成果，為臨床中非小細(xì)胞肺癌的治療提供了思路[3]。該次研究選取了該院在2018年6月—2020年1月期間收治的60例非小細(xì)胞肺癌患者，再選取同一時(shí)期來該院治療的良性病變患者40例，對(duì)其組織標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，分析疾病類型不同的肺癌患者組織中的PD-L1和EGFR的表達(dá)情況，研究?jī)煞N指標(biāo)與疾病的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以該院收治的60例非小細(xì)胞肺癌患者為研究對(duì)象，對(duì)組織標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，以上患者簡(jiǎn)稱觀察組，再選取同一時(shí)期來該院治療的良性病變患者40例，對(duì)其組織標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，以上患者簡(jiǎn)稱對(duì)照組。觀察組患者年齡30～82歲，平均（63.45±5.45）歲；男性患者34例，女性患者26例。對(duì)照組患者年齡29～81歲，平均（63.21±5.18）歲；男性患者21例，女性患者19例。兩組一般資料對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。具有可比性。患者以及患者家屬于同意書上簽字，得到院內(nèi)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18歲；②在同意書上簽字；③患者的肝、腎功能無異常情況。排除標(biāo)準(zhǔn)：①顱內(nèi)轉(zhuǎn)移患者②心、肝、腎功能異常的患者；③重復(fù)癌患者。

1.2 方法

采集非小細(xì)胞肺癌組織60份，采集良性病變組織40份。

將所有的標(biāo)本組織放在10%的中性福爾馬林溶液中進(jìn)行固定，通過常規(guī)的石蠟包埋，4μm連續(xù)冰凍切片。利用二甲苯進(jìn)行脫蠟、水化，進(jìn)行抗原修復(fù)之后，在使用10%的BSA對(duì)標(biāo)本組織進(jìn)行封閉，持續(xù)封閉10 min，孵育1∶100的多克隆小鼠抗人PD-L1和兔抗人EGFR抗體，孵育溫度保持室溫，使用DAB反應(yīng)顯色，利用蘇木素進(jìn)行復(fù)染后，通過顯微鏡對(duì)組織標(biāo)本進(jìn)行觀察，細(xì)胞漿或者細(xì)胞膜中發(fā)現(xiàn)黃色至棕褐色的顆粒，則表明組織標(biāo)本為陽(yáng)性顯色。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩組患者中PD-L1和EGFR的陽(yáng)性表達(dá)率，以及PD-L1和EGFR的表達(dá)與肺癌的相關(guān)性進(jìn)行研究。陽(yáng)性表達(dá)率為陽(yáng)性切片數(shù)與總切片的比值。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料的表達(dá)方式為例數(shù)和率（%），組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者PD-L1和EGFR陽(yáng)性表達(dá)率的比較

觀察組患者的PD-L1與EGFR的陽(yáng)性表達(dá)率分別為：81.7%（49/60），55.0%（33/60），對(duì)照組患者的的PD-L1與EGFR的陽(yáng)性表達(dá)率分別為：10.0%（4/40），7.5%（3/40），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=49.485、23.503，P＜0.05）。

2.2 PD-L1和EGFR的表達(dá)與肺癌的相關(guān)性分析

PD-L1的表達(dá)和臨床分期情況以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況相關(guān)（P＜0.05），PD-L1的表達(dá)和性別、年齡、病理分級(jí)以及腫瘤大小無關(guān)（P＞0.05）；EGFR的表達(dá)與患者的性別、年齡、疾病的臨床分期、病理分級(jí)、腫瘤大小以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無關(guān)（P＞0.05），見表1。

表1 PD-L1和EGFR的表達(dá)與肺癌的相關(guān)性分析Table 1 Correlation analysis between the expression of PD-L1 and EGFR and lung cancer

3 討論

非小細(xì)胞肺癌是一種惡性腫瘤，源于支氣管粘膜上皮或者肺泡上皮，在臨床中發(fā)病率相對(duì)較高，且大多數(shù)發(fā)病患者的年齡超過60歲，但是，就最近幾年的統(tǒng)計(jì)表明[4]，非小細(xì)胞肺癌的發(fā)病人群逐漸年輕化。非小細(xì)胞肺癌根據(jù)其病理類型，可以分成5種，分別為：唾液腺型腫瘤、腺鱗癌、大細(xì)胞癌、鱗癌以及腺癌。臨床中，一般會(huì)通過手術(shù)方法將病灶切除，或者通過放射治療、放療、靶向治療以及免疫治療等，進(jìn)而可以將患者的疼痛進(jìn)行減輕，提高患者的生存質(zhì)量。醫(yī)學(xué)界的共識(shí)表明：肺癌的主要發(fā)作人群就是長(zhǎng)期吸煙人群，而長(zhǎng)期接觸氡元素或者長(zhǎng)期處于空氣污染嚴(yán)重地區(qū)的人群的肺癌發(fā)生率也相對(duì)較高[5]。非小細(xì)胞肺癌中的腺癌是一種比較常見的肺癌組織學(xué)亞型，亞洲患者以及女性患者的發(fā)病率較高，其病灶一般在肺的周圍組織，病灶為球形，和胸膜的距離較近，一般會(huì)發(fā)生在患者的肺泡以及較小的支氣管上皮細(xì)胞中，腺癌患者于發(fā)病早期，一般沒有明顯的疾病癥狀，通常是健康體檢偶然發(fā)現(xiàn)，腺癌標(biāo)本一般是不規(guī)則的分葉狀的外觀，切面的顏色無灰白色；鱗癌的主發(fā)人群一般為50歲以上的患者，男性患者多于女性患者，且吸煙史越長(zhǎng)的患者，發(fā)生概率越高，病灶一般在肺段以上的支氣管上，還有一小部分的鱗癌患者的病灶在外周的肺實(shí)質(zhì)中；大細(xì)胞癌的病灶直徑在5 cm以上，一般呈多角形，想要診斷大細(xì)胞癌，一般需要手術(shù)切除標(biāo)本，組織學(xué)評(píng)估腫瘤整體，將局部病灶分化后方可有效診斷；腺鱗癌的病灶的病理成分相對(duì)復(fù)雜，既有腺癌的惡性生物學(xué)特征，又有鱗癌的惡性生物學(xué)特征，即會(huì)出現(xiàn)局部浸潤(rùn)，又會(huì)出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，惡性程度較高，預(yù)后效果較差；唾液腺型腫瘤的發(fā)病概率較低，屬于異質(zhì)性高的腫瘤，且惡性程度較低，病程發(fā)展緩慢，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移概率較低，預(yù)后情況相對(duì)良好[6]。通過流行性病學(xué)表明：肺癌是全球的發(fā)病率以及病死率最高的惡性腫瘤，非小細(xì)胞肺癌占所有肺癌患者的80%以上，且女性患者發(fā)生肺癌的概率要低于男性患者，主要發(fā)病人群從原來的60歲以上變?yōu)?0歲以上，逐漸年輕化[7]。非小細(xì)胞肺癌患者在臨床中的主要疾病癥狀包括：咳嗽、咯血、呼吸障礙、胸部疼痛、消瘦等情況，如果患者到肺癌晚期，則會(huì)出現(xiàn)病灶轉(zhuǎn)移情況[8]，還有一部分的患者因?yàn)槟[瘤中出現(xiàn)內(nèi)分泌物質(zhì)，進(jìn)而呈現(xiàn)出非轉(zhuǎn)移性的全身癥狀，非小細(xì)胞肺癌的主要并發(fā)癥包括：膿胸、病理性骨折以及營(yíng)養(yǎng)不良等情況，所以，臨床中，需要對(duì)非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行及時(shí)診斷，使患者得到及時(shí)治療。病理診斷為肺癌的診斷金標(biāo)準(zhǔn)，其他的影像學(xué)檢查技術(shù)可以提示肺癌，但是，確診還是需要病理診斷[9]。病理診斷主要是通過取出病灶標(biāo)本，進(jìn)行病理送檢，最終得到完整的病理診斷報(bào)告，而隨著臨床技術(shù)的越發(fā)成熟，有研究表明，PD-L1以及EGFR和非小細(xì)胞肺癌具有一定的相關(guān)性[10]。

續(xù)表1Continued Table 1

PD-L1屬于負(fù)性T細(xì)胞共刺激分子，它能夠和配體PD-L1進(jìn)行過結(jié)合，對(duì)CD4以及CD8T細(xì)胞的增值以及活化情況進(jìn)行抑制[11]，從而能夠?qū)C(jī)體免疫應(yīng)答情況進(jìn)行負(fù)性調(diào)控，進(jìn)而能夠在腫瘤的免疫逃逸以及腫瘤增殖中起到十分重要的作用。2004年，有研究文獻(xiàn)上表明，非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌、大腸癌以及肝癌等多種腫瘤細(xì)胞患者組織中的PD-L1水平表達(dá)情況會(huì)出現(xiàn)明顯異常情況[12]。2004年[13]以后的多數(shù)研究文獻(xiàn)，都對(duì)PD-L1在腫瘤疾病介導(dǎo)中的免疫逃逸情況以及免疫功能的影響情況進(jìn)行研究，對(duì)于PD-L1和惡性腫瘤的其他發(fā)病機(jī)制的關(guān)聯(lián)性并沒有一個(gè)明確研究[14]。目前，非小細(xì)胞肺癌與PD-L1的表達(dá)之間的相關(guān)性還正處于研究階段。除此之外，EGFR屬于一種跨膜受體，重要性較強(qiáng)，EGFR能夠和多種配體相結(jié)合，對(duì)于增值信號(hào)的傳遞中也能夠起到重要作用，同時(shí)，EGFR在腫瘤的增值、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和血管的新生也起到一定作用[15]。目前，有研究文獻(xiàn)表明，EGFR的異常表達(dá)和腫瘤患者存在一定關(guān)系[16]。EGFR的表達(dá)可以在多種腫瘤組織標(biāo)本中檢測(cè)，EGFR通過自分泌的形式在腫瘤增殖以及發(fā)展中均產(chǎn)生一定的作用。有部分研究表明，非小細(xì)胞肺癌組織標(biāo)本中的EGFR的異常表達(dá)發(fā)生率較高，但是，臨床中對(duì)于PD-L1和EGFR的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌疾病之間的相關(guān)性還沒有明確分析[17]。

該次研究結(jié)果表明，觀察組患者的PD-L1與EGFR的陽(yáng)性表達(dá)率分別為81.7%（49/60）、55.0%（33/60），對(duì)照組患者的的PD-L1與EGFR的陽(yáng)性表達(dá)率分別為10.0%（4/40），7.5%（3/40）；PD-L1的表達(dá)和臨床分期情況以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況相關(guān)（P＜0.05），PD-L1的表達(dá)和性別、年齡、病理分級(jí)以及腫瘤大小無關(guān)（P＞0.05）；EGFR的表達(dá)與患者的性別、年齡、疾病的臨床分期、病理分級(jí)、腫瘤大小以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無關(guān)（P＞0.05）；張浩等[18]的研究結(jié)果表明：非小細(xì)胞肺癌患者中的PD-L1和EGFR陽(yáng)性表達(dá)率為：83.9%，55.4%，良性病變組織的PD-L1和EGFR陽(yáng)性表達(dá)率為：9.5%，4.7%，和該次研究結(jié)果大致相符。

綜上所述，PD-L1和EGFR的異常表達(dá)和非小細(xì)胞肺癌的發(fā)病存在密切聯(lián)系，影響組織免疫、增值情況，給臨床治療提供根據(jù)。