兩種伏立康唑的真菌藥敏試驗對比研究

孫銀俊

摘要：目的? 對兩種伏立康唑的真菌藥敏試驗進行對比，發現兩種不同檢測手段的敏感性差異。方法? 我們使用MIC法（ATB FUNGUS）和KB法（紙片擴散法）檢測100株我院住院患者臨床體液標本分離的致病性念珠菌，分析2種不同方法的藥敏試驗結果，并進行橫向比較。結果? 我們發現對于熱帶念珠菌MIC法提示敏感的為52株，K-B法提示敏感的為68株，其中16株為假敏感，我們對差異進行統計學比較，發現差異（P<0.05）;MIC法提示耐藥的為24株，K-B法提示耐藥的為28株，其中4株為假耐藥，我們對差異進行統計學比較，發現差異（P<0.05）。結論? MIC法檢測準確性高于KB法，各大醫院微生物實驗室醫技人員應該采取MIC法來提高臨床診斷，為醫生提供準確的實驗室檢測結果，及時反映病情發展，為提供患者針對性性更強的高效抗真菌藥物。

關鍵詞：伏立康唑;藥敏試驗;真菌;對比研究

隨著人口的老年化，腫瘤病人的增多，廣譜抗菌藥物的廣泛使用，糖皮質激素的使用、免疫抑制劑適應癥的放寬，醫源性操作增多如支氣管鏡檢測、腹腔鏡、膀胱鏡、各種穿刺術）造成免疫低下人群逐漸增多，人體器官的念珠菌感染比例有上升趨勢，且念珠菌的耐藥性同時上升，限制了醫療工作者的臨床藥物選擇。伏立康唑是近年來在臨床上使用非常廣泛的三唑類抗真菌藥物，經過在國內20余年的使用，以及國外各大隨機雙盲的研究中被證實是十分有效的抗各類真菌藥品，且安全性也得到了非常好的保證。目前臨床上常用的用于檢測抗真菌藥物的藥敏試驗有2種，一種是 MIC法（即ATB FUNGUS 3試劑），另一種是K-B法（丹麥Rosco伏立康唑藥敏紙片擴散法），目前各大醫院暫無對2種體外敏感性試驗的評價及對比，本次研究的目的為對兩種伏立康唑的真菌藥敏試驗進行對比，發現兩種不同檢測手段的敏感性差異。

1.材料與方法

1.1 菌株來源 選擇我院各大科室的住院病人及門診患者，收集時間為2007年11月至2013年11月，共計150例患者，將患者體液標本（痰液、尿液、大便、胸水、腹水等）送我院中心微生物實驗室檢查，分離得出100株念珠菌，分別使用K-B法及MIC法觀察記錄藥敏試驗結果。

鑒定儀及鑒定卡? 念珠菌采用科瑪嘉念珠菌顯色法，由法國科瑪嘉公司生產，鑒定儀采用法國生物梅里埃埃公司鑒定儀。鑒定卡使用YBC卡，ATB FUNGUS 3真菌藥敏試劑盒，伏立康唑藥敏紙片為丹麥Rosco公司產品。

1.3 方法? 科瑪嘉顯色培養基上接種分離出的念珠菌單個菌落， VITEK32細菌鑒定儀以及配套的YBC卡鑒定念珠菌，結合顯色和儀器鑒定的結果，將念珠菌鑒定到種。分別用MIC法（我們設置MIC≤1為敏感）和伏立康唑K-B法（抑菌環直徑≥14設置為敏感）進行藥敏試驗。操作人員按照ATB FUNGUS 3試劑盒使用說明書以及紙片擴散法藥敏試驗操作規范流程進行檢驗工作。念珠菌質控株采用ATCC90028質控株。

2結果

2.1 白色念珠菌的菌株分布特點

我們對100株念珠菌進行分析，結果顯示熱帶念珠菌占80株（80%），白色念珠菌4株（4%），光滑念珠菌6株（6%），克柔念珠菌4株（4%），近平滑念珠菌4株（4%）、葡萄牙念珠菌3株（3%）和無名念珠菌念珠菌3株（3%）。

2.2 MIC法與K-B法對念珠菌體外抗菌活性對比

我們發現對于熱帶念珠菌MIC法提示敏感的為52株，K-B法提示敏感的為68株，其中16株為假敏感，我們對差異進行統計學比較，發現差異（P<0.05）;MIC法提示耐藥的為24株，K-B法提示耐藥的為28株，其中4株為假耐藥，我們對差異進行統計學比較，發現差異（P<0.05）。

3 討論

我們對100株念珠菌進行分析，結果顯示熱帶念珠菌占80株（80%），白色念珠菌4株（4%），光滑念珠菌6株（6%），克柔念珠菌4株（4%），近平滑念珠菌4株（4%）、葡萄牙念珠菌3株（3%）和無名念珠菌念珠菌3株（3%）。表明本院目前念珠菌的感染中，仍以熱帶念珠菌感染居首位，國外也有同樣報道，我們報道與其一致。我們本次研究顯示白色念珠菌感染率處于第二位，與全球多國家監測結果顯示，2001-2010 年念珠菌感染中白色念珠菌占15-20%，結果相似。白色念珠菌是臨床最為常見的酵母，為條件致病菌，是一種特殊的雙相型真菌，毒力最強，和其他微生物處于平衡狀態。白色念珠菌是人體正常菌，直接鏡檢陽性有診斷意義，在普通培養基以孢子相生長為主，大量菌絲說明念珠菌處于致病狀態。白色念珠菌侵入機體后，以孢子相與菌絲相二者混合出現，這樣的形態與感染性和致病性相關。

造成MIC法（ATB FUNGUS）和KB法（紙片擴散法）的藥物敏感差異我們分析如下：（1）首先是測定方法問題，KB法與宿主體內存在白細胞總數以及白細胞吞噬細胞對真菌的吞噬影響、感染機體傷口持續感染都會引起誤差。（2）由于藥物難于穿透機體的血腦屏障與肺泡膜呼吸屏障，造成藥物不能與病菌作用有效結合。（3）最后，念珠菌對不同的抗真菌藥的耐藥性有很大差別，不同的念珠菌類型對同一抗真菌藥物的耐藥性差別也很大。因此臨床上使用的KB法體外的藥物敏感試驗并不能完全指導臨床的治療用藥。MIC法檢測準確性高于KB法，各大醫院微生物實驗室醫技人員應該采取MIC法來提高臨床診斷，為醫生提供準確的實驗室檢測結果，及時反映病情發展，為提供患者針對性性更強的高效抗真菌藥物。

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