氯已定、次氯酸鈉及雙氧水根管沖洗對牙髓炎根管中基質金屬蛋白酶MMP-8及MMP-2水平的影響

張紹芳,谷達瑋,童琳（湖南省郴州市第一人民醫院,湖南 郴州 423000）

基質金屬蛋白酶（MMPs）與口腔的多種疾病具有密切的關系，其屬于內切蛋白水解酶家族，且對鋅離子有高度的依賴性，可降解細胞外基質的多種蛋白質及基底膜[1]。臨床上大量研究表明，炎癥因子對牙髓細胞進行刺激，能合成的MMPs包括MMP-28、MMP-20、MT1-MMP、MMP-9、MMP-8、MMP-3及MMP-2等[2]。牙髓組織處于炎癥狀態時，MMPs的水平會出現上升趨勢，國外研究中發現，慢性牙髓炎組織中的MMP-1、MMP-13及MMP-8水平高于正常牙髓組織，其研究結果提示，MMPs與牙髓的發展及炎癥過程中細胞外基質的破壞具有密切聯系[3]。本研究通過探討分析臨床上三種較為常用的根管沖洗液，對基質金屬蛋白酶MMP-8及MMP-2水平的影響主要包括雙氧水、氯已定、次氯酸鈉。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2019年1月-2020年6月于本院收治的240例擬行根管治療的牙髓炎患者，選用的牙齒均為單根管恒前牙或恒前磨牙，依據隨機數表法將患者分為A、B、C、D4組，4組患者各60例且各組間一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05）。納入標準：①所有患者近3個月內均未使用抗生素及免疫制劑；②無系統性疾病，牙周袋在3mm以下；③患者及患者家屬均簽署知情同意書，且能配合完成根管治療。

1.2 實驗方法 A組患者行氯已定治療，2%氯已定溶液在根管沖洗備用；B組患者行次氯酸鈉進行治療，1%次氯酸鈉溶液在根管沖洗備用；C組患者采用雙氧水治療，3%雙氧水溶液在根管沖洗備用；D組患者采用生理鹽水，0.9%生理鹽水溶液在根管沖洗備用。去除患牙上腐質并去除牙髓，再將患牙根管擴通至35#通過K銼擴通，吸潮紙捻取樣。常規機用鎳鈦挫擴挫，根管沖洗液沖洗，干燥后再次吸潮紙捻取樣。最后提取根管滲出液，在根管內放入35#吸潮紙尖，放置片刻，立刻放回消毒EP管內，重復進行3次操作。樣品在-70℃下保存。

1.3 樣本處理 根據酶聯免疫吸附法檢測MMP-8及MMP-2水平，具體操作根據試劑盒說明書進行樣品檢測，最后繪制標準曲線，并求出MMP-8及MMP-2濃度水平。

1.4 統計學方法 采用SPSS23.0統計軟件進行數據處理。計量資料以（±s）表示，采用獨立樣本t檢驗；計數資料以n（%）表示，行χ2檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 MMP-8水平比較 A組及C組治療后MMP-8水平低于治療前，差異具有統計學意義（P＜0.05），B組及D組雖治療后MMP-8水平低于治療前，但差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 各組治療前后MMP-8水平比較（±s,ng/mL）

表1 各組治療前后MMP-8水平比較（±s,ng/mL）

組別 A組（n=60） B組（n=60） C組（n=60） D組（n=60）治療前 0.27±0.03 0.22±0.06 0.25±0.04 0.26±0.03治療后 0.21±0.02 0.21±0.03 0.19±0.02 0.25±0.02 t 7.442 0.667 6.000 1.240 P＜0.001 0.509 ＜0.001 0.215

2.2 MMP-2水平比較 A組治療后MMP-2水平低于治療前（P＜0.05），B、C、D三組治療后MMP-2水平差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 各組治療前后MMP-2水平比較（±s,ng/mL）

表2 各組治療前后MMP-2水平比較（±s,ng/mL）

組別 A組（n=60） B組（n=60） C組（n=60） D組（n=60）治療前 0.50±0.11 0.42±0.04 0.41±0.08 0.56±0.45治療后 0.42±0.05 0.39±0.07 0.39±0.04 0.47±0.01 t 2.961 1.664 1.000 0.894 P 0.005 0.096 0.324 0.377

3 討論

牙髓炎是指發生在牙髓上的炎癥性病變，大部分是由齲齒發展而來，是口腔中多發的口腔疾病，臨床表現為牙痛，嚴重者會導致頭痛、臉痛。引起牙髓炎的病因有很多，如細菌感染，物理和化學刺激等病因，其中細菌感染為主要病因。在牙髓炎的發展中，MMP家族蛋白在其炎癥的發展過程中有著重要作用，其既能破壞牙髓組織，又能繼發參與機體免疫反應及防護功能。相關研究報道，炎癥因子及其內毒素感染牙髓組織，對中性粒細胞脫顆粒產生刺激作用，從而促進炎癥因子的釋放，進一步對MMPs的活化產生誘導作用[4]。有國外研究學者通過明膠酶譜法及酶聯免疫吸附法對正常的牙髓組織及炎癥牙髓組織中的MMP-2、MMP-9、MPO水平及活性進行檢測，檢測結果提示，MMP-2、MMP-9、MPO水平在炎癥牙髓組織中高于正常的牙髓組織，且只有在炎癥組織中能檢測到活化MMPs[5]。對牙髓的膿腫組織根管滲出液進行檢測，結果發現基質金屬蛋白酶8具有較高水平表達。在本研究中，各組患者對牙根管進行治療后MMP-2及MMP-8水平均較治療前降低，可提示為根管沖洗明顯抑制MMP-2及MMP-8表達，表現出根管治療過程中能有效降低基質金屬蛋白酶8水平。臨床上評估牙髓炎的病情程度，是臨床上對治療成功情況預測的必要條件[5]。若單純的通過臨床癥狀進行評估，存在一定的局限性。生化分子水平作為一種臨床檢測方法，是臨床上有效的鑒別不可逆或可逆牙髓炎的輔助方法，對于提高保髓治療的成功率有重要意義。在本研究數據中發現氯已定能顯著降低MMP-8及MMP-2水平，數據提示氯已定對基質金屬蛋白酶的抑制作用更為顯著。氯已定是一種雙胍類抗菌藥物，臨床上常用的氯已定制劑包括醋酸氯已定、鹽酸氯已定及葡萄糖酸氯已定三種。氯已定是目前臨床上常用的非特異性MMPs抑制劑[6]。國外研究均已證明其對于MMP-8及MMP-2水平有顯著的抑制作用，并認為氯已定可能成為一種新型的抗菌劑[7]。氯已定能有效的抑制菌斑數量，降低牙齦出血情況，其具有副作用小，安全性高，常在日常生活中添加漱口水作為口腔抗菌藥物，治療牙周炎癥、窩洞消毒及根管沖洗。

氯已定抑制MMPs的機制主要是通過螯合作用結合鋅、鈣離子，從而能有效抑制MMPs催化區域的活性。研究報道，氯已定對于牙本質來源的半胱氨酸組織蛋白酶的蛋白水解活性具有顯著抑制作用，提示為氯已定可作為本質牙髓復合體中半胱氨酸組織蛋白水解酶的抑制劑，其在抑制半胱氨酸組織蛋白酶的過程中可控制炎癥的進展[8]。氯已定是MMPs的一種非特異性抑制劑，也是一種陽離子表面活性劑，具有很強的廣譜抑菌、殺菌作用，對革蘭氏陽性菌和陰性菌的抗菌作用都比較強。它能結合陽離子生成金屬螯合物，抑制MMPs的活性，高濃度時會呈現出殺菌作用，而且在血清以及血液存在時仍然對細菌有效，在牙本質粘結過程中，能緩解膠原纖維降解速度，使混合層穩定，以提高粘結耐久性。本研究結果提示氯已定能對于MMP-8及MMP-2水平有顯著的抑制作用。在臨床上對于根管沖洗液選擇，應綜合考慮到治療的各個步驟。

綜上所述，氯已定能顯著抑制牙髓炎癥組織中的MMPs，還能提高牙質粘結度，能提高牙髓病治療及修復率，臨床上值得推廣。